Ошибочные результаты анализов после исследований с контрастом

🔰Присутствие в крови контрастных веществ на основе йода или гадолиния влияет на результаты лабораторных анализов.

Примеры тестов вы найдёте в файле

Также контрастные вещества меняют плотность крови. При взятии образца в пробирки с разделительным гелем он может занять неверное положение:
⏩неправильно отделяется сыворотка и клетки крови.
⏩возможно засорение игл анализатора.

Интерференция связана с контрастным веществом, также с реагентом и методом анализа.

#преаналитика #интерференция

❓Что это за клетка?

Пишите предположения в комментариях ⬇️ Ответ там же когда-то.

#case от Blood-Academy

Оптические методы анализа
— основаны на изучении оптических свойств:

2️⃣Нефелометрия и турбидиметрия.

🔶Нефелометрия — измерение интенсивности света, рассеянного частицами раствора.

🔶Турбидиметрия — измерение ослабления интенсивности света, прошедшего через раствор. При чем, интенсивность света ⬇️из-за поглощения частицами, и рассеяния от частиц.

#методы

Прочитать про иммунологические методы и получить эстетическое удовольствие можно тут ⏩ 12 методов в картинках: иммунологические технологии

#методы

Ложноотрицательный результат анализа мочи на бензодиазепин

1️⃣пациент:
Для снижения симптомов синдрома отмены при злоупотреблении опиатами пациенту назначен лоразепам.

2️⃣ пациент:
Поступил в отделение после передозировки лоразепамом.

Пробы мочи отправили для анализа на бензодиазепины и ожидали положительный результат.

❕Но результат на платформе ARCHITECT с реагентом Multigent на бензодиазепин (гомогенный ИФА) оказался отрицательным для обоих пациентов.

✅При измерении на другой платформе содержание бензодиазепинов: 320 нг/мл у 1 пациента, 4895 нг/мл — у 2 пациента.

🔰До 47% результатов скрининга мочи на бензодиазепины являются ложноотрицательными при использовании ИФА. Низкая чувствительность связана с низкой перекрестной реактивностью к лекарственным метаболитам.

Например, лоразепам выводится в виде метаболита ▶️глюкуронида.
То есть важно знать перекрестную реактивность теста с метаболитом, а не с исходным препаратом.

❎ У Abbott Multigent Benzodiazepines отсутствует перекрестная реактивность ИФА с метаболитом лоразепама, поэтому результаты пациентов были отрицательные.

С осторожностью используйте этот реагент для скрининга или наблюдения за пациентами, принимающими лоразепам.

#case #моча #преаналитика

🔰Для тех, кому интересна диагностика аутоиммунных заболеваний
⏩ сайт Международной группы (ICAP) типов свечения антинуклеарного фактора.

Фото и описание морфологических типов свечения при непрямой иммунофлуоресценции на клетках HEp-2.

#методы #теория #международный_опыт

ИФА: Сэндвич-метод

Иммунологический метод для выявления антигенов: целевой антиген оказывается зажат между иммобилизованным и меченым антителом — как в сэндвиче.

Схема реакции

🔵Инкубация 1: образование комплекса Аг-Ат.

К носителю с иммобилизованными антителами (в лунку) добавляют раствор, в котором содержится анализируемый антиген ⏩ образование специфического комплекса.

🔵Отмывка: удаление несвязавшихся молекул антигена.

🔵Инкубация 2: образование комплекса Аг-Ат-конъюгат.

Добавляют меченные ферментом антитела (конъюгат) ⏩ образование тройного комплекса — конъюгат связывается с антигеном из комплекса Аг-Ат.

🔵Отмывка: удаления избытка конъюгата.

🔵Определение активности фермента:

1️⃣Добавление раствора хромогенного субстрата: фермент и субстрат вступают в реакцию с изменением цвета содержимого ячейки.

2️⃣Добавление стоп-реагента: для остановки ферментативной реакции.

3️⃣Определение концентрации антигена: интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию целевого антигена в пробе.

#методы #ИФА

Реакция прямой гемагглютинации

Гемагглютинация — «склеивание», агрегация эритроцитов.

🔰При «прямой» реакции антитела (агглютинины) сыворотки непосредственно взаимодействуют с антигенами (агглютиногенами) эритроцитов.

Пример:
Для определения групп крови по системе АВ0 и резус-фактора используют цоликлоны анти-А, анти-В и анти-D-супер. Цоликлоны — раствор мышиных моноклональных антител.

В лунку специального планшета помещают:
▶️одну большую каплю (0,1 мл) цоликлона.
▶️рядом одну маленькую каплю (~0,01 мл) исследуемой крови.

Цоликлон и кровь перемешивают, через некоторое время регистрируют появление или отсутствие реакции агглютинации.

#методы

Виртуальная иммунологическая лаборатория от Howard Hughes Medical Institute, позволяет воспроизвести все этапы ИФА:

▶️от подготовки образцов
▶️до интерпретации результатов.

Каждый шаг сопровождается теоретическими пояснениями на английском.

🟩Нажмите кнопку «Start Interactive» и на 30 минут погрузитесь в постановку ИФА.

#методы #ИФА

❓Что это за клетка?

Пишите предположения в комментариях ⬇️Ответ там же завтра.

#case от Blood-Academy

Реакция непрямой гемагглютинации

🔰Гемагглютинация — «склеивание», агрегация эритроцитов.
При «непрямой» агглютинации антитела сыворотки взаимодействуют с антигенами, которые адсорбированными на эритроцитах или инертных частицах (латекс).

🟢Сенсибилизированные антигеном эритроциты — это эритроцитарный диагностикум для обнаружения антител.
🟢Эритроциты «нагруженны» антителами — это эритроцитарный антительный диагностикум для выявления антигенов.

Реакции непрямой гемагглютинации применяют для:
▶️серологической диагностики инфекций, вызванных бактериями, риккетсиями, простейшими.
▶️выявления чувствительности к лекарственным препаратам,
определение СРБ (латекс) и т.д.

✅Положительный результат: эритроциты оседают на дне лунки в виде круга со складчатым краем («зонтик»).

🚫Отрицательный результат: эритроциты компактно оседают в центре лунки, как «пуговка» или колечко.

#методы

Хук-эффект

Обсуждали эффект-крючка в статье Ложнонизкий результат β-ХГЧ у беременной, теперь о том, почему так происходит.

🔰Хук-эффект наблюдается, когда при очень высокой концентрации аналита, измеренное содержание ошибочно занижено.

⏩Избыток аналита в сэндвич-ИФА связывается обоими антителами - с иммобилизованными и мечеными, что мешает образованию иммунного комплекса. Компоненты реакции, не участвующие в сэндвиче удаляются.

❕Интенсивность сигнала снижается и может попасть в диапазон калибровочной кривой. Это приводит к ложно отрицательному результату или занижению фактической концентрации.

Наблюдается:
🔻в сэндвич-ИФА.
🔻в твердофазных ИФА, когда концентрация иммобилизованных антител ограничена.
🔻для аналитов с широким диапазоном концентраций, например, опухолевые маркеры.

#методы