Влияние разных антикоагулянтов на скрининговые тесты ⬆️

#гемостаз

Действие антагонистов витамина К вызывает удлинение ПВ.

Поэтому, мониторинг заключается в измерение МНО:

🔺1 раз в несколько дней до достижения терапевтического диапазона.
🔺затем 2-3 раза в неделю в течение 2х недель.
🔺при стабилизации 1 раз в месяц.

🔰Внеплановое измерение проводят:

▶️изменение дозы или переход на другой препарат.
▶️появление повышенной кровоточивости.
▶️после перенесенных инфекций.
▶️при ограничении приема пищи, диарее.
▶️при начале приема других лекарств.

🔰Целевой диапазон МНО

2-3 Пациенты высокого риска (АФС+арт./вен тромбоз в анамнезе), ТГВ, ТЭЛА.

2-3 Пациенты с биологическим клапаном (митральный).

2,5-3,5 Пациенты с механическим клапаном (митральный, аортальный).

#гемостаз

Расхождения в значениях ПСА между лабораториями

✅ Известно, что после радикальной простатэктомии уровень ПСА должен быть неопределяемым, близким к 0.

Повышение ПСА через месяцы-годы признак прогрессирования рака.
Биохимический рецидив — ⬆️ПСА после операции выше 0,2 нг/мл, в двух определениях.

🔵Пациент после радикальной простатэктомии, каждые 3−6 месяцев определял уровень ПСА.
Работа пациента связана с поездками, поэтому анализ проводили на двух разных аналитических платформах.

Динамика изменений схожая ⬆️ но
🔴по результатам Siemens — бх рецидив случился на 43 месяце.
🔴 по результатам Beckman — значения ниже порога в 0,2 нг/мл даже на 48 месяце.

На платформе Beckman, два последовательных значения ПСА >0,2 нг/мл появились бы только через 6−7 месяцев.

‼️В случае принятия клинического решения на основе результатов Beckman, лечение было бы задержано на 6−7 месяцев, что возможно повлияло бы на выживаемость пациента.

#case

Механический способ детекции сгустка

— время образование сгустка определяется по изменению вязкости реакционной смеси.

Суть:
🔻в кювете металлический шарик, который движется в магнитном поле.
🔻скорость вращения или амплитуда колебаний строго фиксированы.
🔻при формировании сгустка вязкость пробы увеличивается, движение шарика замедляется.
🔻при остановке шарика — регистрируется время образования сгустка.

‼️Результат механического измерения НЕ зависит от оптической плотности пробы.

То есть, можно использовать иктеричные, липемичные и гемолизные пробы (но всё же проверьте ограничения для реагентов).

#гемостаз #методы

Оптический способ детекции сгустка

— время образование сгустка определяется по изменению оптической плотности пробы.

Суть:
🔹исходная плазма прозрачна.
🔹добавление активаторов свертывания снижает пропускание света через кювету.
🔹снижение оптической плотности фиксируется прибором.

‼️Результат зависит от оптической плотности пробы — нельзя использовать иктеричные, липемичные и гемолизные образцы. Реагенты также должны быть прозрачными.

✅Оптический способ имеет лучшую чувствительность:
- при замедленном образовании сгустка.
- при низком уровне фибриногена.
- на фоне антикоагулянтной терапии.
- разрушении шариком нитей фибрина.

🚫Помните, не существует оптико-механического способа детекции.

Выпускаются коагулометры оптико-механического типа - технически возможно работа как механическим, так и оптическим методом. Но его выбирает оператор.

#гемостаз #методы

Завершаем блок гемостаза подборкой:

🔴Преаналитический этап исследований гемостаза

🔴Гемостаз

🔴Схемы коагуляционных процессов (красивые 😍)

🔴Youtube-канал компании Гемостатика

#подборки #гемостаз

Ретикулоциты: истина или ложь

Ретикулоциты — незрелые, безъядерные эритроциты, содержат остатки РНК (митохондрий, рибосом, эндоплазм.ретикулума).

🔺созревают в крови за 24 ч.
🔺по мере созревания количество РНК уменьшается.
🔺отражают скорость продукции эритроцитов в костном мозге.
🔺характеризуют активность эритропоэза.

Ложное ⬆️RET:
— включения в эритроцитах (тельца Жолли, малярийные паразиты)
— высокий лейкоцитоз
— аномальные формы гемоглобина
— тяжелая анемия
— гипертромбоцитоз
— гигантские тромбоциты
— стрессовый эритропоэз

Истинное ⬆️RET:
— после кровотечения
— гемолиз (гемолитическая анемия, гемолитическая болезнь новорожденных)
— ответ на лечение (препараты железа, B12/фолиевой кислоты, ЭПО, восстановление костного мозга после ХТ или трансплантации костного мозга)

Истинное ⬇️RET:
— дефицит B12, В6, железа
— снижение уровня ЭПО (хроническая почечная недостаточность)
— апластическая анемия или синдромы недостаточности костного мозга
— поражение костного мозга (саркоидоз; лейкозы, лимфомы, метастазы)

#Ret #КАК

❓Какая причина могла вызвать такое изменение цвета сыворотки?

Пишите предположения в комментариях ⬇️ Ответ там же завтра.

#case

Особенности ручного подсчета

🔰Ручной подсчет ретикулоцитов проводят при суправитальной суправитальной окраске (без фиксации).
— дешевый
— трудоемкий, длительный
— низкая воспроизводимость (CV 25-50%)
— плохая стандартизация
— субъективный

Окрашивание бриллиантовым крезиловым синим:
🟢эритроциты — желто-зеленые.
🔵зернисто-сетчатая субстанция — синего / фиолетово-синего цвета.

⏩Зернисто-сетчатая субстанция может быть в виде клубка, густой сети, отдельных нитей или зерен — всё это ретикулоциты.

❕Остатки РНК делают ретикулоциты заметными даже при стандартной окраске по Романовскому — это полихроматофильные эритроциты

#Ret #КАК

Методика ручного подсчета

Для подсчета ретикулоцитов:

🔵окрасить эритроциты по инструкции

1️⃣приготовить мазок

2️⃣микроскопировать под масляной иммерсией

Находят п/з, где эритроциты располагаются раздельно.
В таких полях нужно подсчитать не менее 1000 эритроцитов (лучше 2-3 тыс), и отметить среди них число ретикулоцитов.

3️⃣количество ретикулоцитов выражают в % (на 100) или в промилле (на 1 тыс) эритроцитов.

Но ❗️ICSH рекомендует представлять число ретикулоцитов в 10*9/л.

#Ret #КАК

Tips and tricks

Глаза разбегаются — как много эритроцитов в поле зрения, а нужно еще и ретикулоциты посчитать. Как облегчить жизнь⬇️:

🔰уменьшить поле зрения.
специальной «шторкой» на окуляре (как на фото).

🔰ограничить поле зрения.
Вырезать из бумаги «окошко» и положить его поверх окуляра (круг размером с окуляр, в центре - небольшой квадрат).

#Ret #КАК

Автоматический подсчет ретикулоцитов

🔰Автоматический подсчет ретикулоцитов проводится методом флуоресцентной проточной цитометрии.
— быстрый
— экономный в масштабе
— стандартизован
— высокая точность (подсчет более 30 тыс.кл)
— высокая воспроизводимость (CV 6%)

Суть:
🔵лизирующий реагент перфорирует мембрану клеток
🔵флуорохром проникает внутрь клеток через поры
🔵флуорохром метит внутриклеточные нуклеиновые кислоты

⏩В результате получаем гистограмму ⬆️распределения ретикулоцитов: интенсивность флуоресценции прямо пропорциональна содержанию РНК.

🔰Содержание РНК при созревании ретикулоцитов снижается. В зависимости от интенсивности сигнала (степени зрелости) различают:

🟢зрелые ретикулоциты с низкой абсорбцией LFR (реф. 87-99%)
🟠незрелые ретикулоциты со средней абсорбцией MFR (реф. 3-12%)
🔴незрелые ретикулоциты с высокой абсорбцией HFR (реф. 1-2%)

#Ret #КАК

Анализы парапротеинов и электролитов: эффект исключения электролитов

🚫При ГИПЕРпротеинемии или -липидемии результат определения электролитов ложно снижен - эффект исключения электролитов.

В образцах с увеличениием белка измеряли электролиты на двух анализаторах — используют ионоселективный электрод, но измеряют ионы косвенным или прямым методом.

Пробы:
🔶без подготовки, Siemens (косвенное измерение).
🔶предварительный нагрев, тот же анализатор.
🔶осаждение белка, тот же анализатор.
🔶фильтрация, тот же анализатор.
🔶без подготовки, Radiometer (прямое измерение).

‼️При любом способе предварительной подготовки и прямом измерении (ABL90) результаты электролитов значительно отличались от измерения косвенным методом.

Показано, что при гиперпротеинемии:
✅нагрев - наиболее подходящий метод предварительной подготовки для измерения K, Na, Cl.
✅подходящим методом измерения электролитов является ИС-электрод с косвенным измерением.

#case #электролиты

Индексы ретикулоцитов

Современные анализаторы позволяют рассчитывать и оценивать при лечении индексы ретикулоцитов 👇

✅ MRV, средний объем ретикулоцитов (реф. 101,1-128,8 фл)

- низкий объем ретикулоцитов объясняет появление микроцитов в крови.
- используется в диагностике ЖДА, мониторинге ответа на терапию железом, препаратами В6 и В12.

✅ IRF, фракция незрелых ретикулоцитов (реф. 2-14%) — IRF = MFR + HFR

- при ускоренном выбросе незрелых клеток из костного мозга IRF увеличивается.
- повышается значительно раньше RET% (как правило, на 2 дня).
- показатель регенерации костного мозга.
- маркер для мониторинга эффективности лечения препаратами В12, В6, железа и ЭПО.
- используют как допинг контроль.
- отсутствие увеличения говорит о резистентности к препарату или недостаточной дозировке.

Ret + IRF — замена индексу продукцииии ретикулоцитов

✅Delta-Не

- вычисляется как разница между содержанием гемоглобина в ретикулоцитах и зрелых эритроцитах.
- в норме результат всегда положительный (кроме новорожденных - при смене макроцитарной кроветворения на нормоцитарные).
- показатель биодоступности железа для эритропоэза.

✅ Ret-He, гемоглобин эритроцитов (реф. 28-35 пг)

- показатель биодоступности железа (доступное для включения в гемоглобин в эритроцитах за предыдущие 3-4 дня).
- ранний показатель оценки ответа на терапию железосодержащими препаратами (повышается через 2-3 дня).
- нет зависимости от воспалительных процессов.
наиболее значимый маркер железодефицитной анемии у детей.
- использование Ret-He+HGB снижает необходимость дополнительного биохимического тестирования на 80%.

#Ret #КАК

Индексы ретикулоцитов при сниженном гематокрите

Расчет индексов⬇️ важен для оценки эритропоэза и подбора схемы лечения.

При высоком уровне эритропоэтина, например, у людей с тяжелой анемией — ретикулоциты преждевременно высвобождаются из костного мозга в кровоток.

⏩При этом увеличивается число дней циркуляции (дозревания) ретикулоцитов в крови — приводит к ложному повышению числа ретикулоцитов.

✅ CRC, скорректированное число ретикулоцитов, рассчитывается при наличии анемии.

✅ RPI, индекс продукции ретикулоцитов.

— снижает эффект преждевременного высвобождения Ret из костного мозга, за счет учета времени созревания.
— рекомендуется рассчитывать, если присутствуют незрелые ретикулоциты (MFR и HFR) и пониженный Hct.

#Ret #КАК

Комплексная оценка анализа крови и индексов ретикулоцитов позволяет:

❓узнать характеристику анемии
❓активность эритропоэза (Ret, RPI)
❓наличие железодефицита (Ret-He↓) или дефицита фолатов/В12 (Ret-He↑)
❓вести мониторинг восстановления эритроцитарного ростка в ходе лечения ЭПО (Ret-He, IRF)
❓принимать решение о трансфузии эритроцитов (HGB, Ret-He)

#Ret #КА

Результат клинического анализа ⬆️
Вопросы ниже.