Полезность показателей активации нейтрофилов анализатора Sysmex XN-1000 для диагностики острого аппендицита.

Анализаторы Sysmex серии XN измеряют параметры активации нейтрофилов в составе анализа крови:
🔶незрелые гранулоциты (IG).
🔶активированные нейтрофилы.
🔶гранулярность нейтрофилов (NEUT-GI).
🔶реактивность нейтрофилов (NEUT-RI).

Эти показатели позиционируются как перспективные маркеры воспаления при сепсисе, ковид-19 и т.д.

🚫Но они не улучшили точность диагностики у пациентов с подозрением на острый аппендицит, по сравнению с классическими показателями воспаления (СРБ, WBC и абс.Neut).

🔰Авторы говорят, что новые параметры бесполезны для ранней диагностики острого аппендицита.

#case #методы

Подсчет лейкоцитов на 3 фракции (а также эритроцитов и тромбоцитов) происходит методом импеданса (Культера).

Суть:
🔶проба крови смешивается с лизирующим раствором (для разрушения эритроцитов)
🔶различные типы лейкоцитов претерпевают изменение размеров в разной степени (под действием лизирующего р-ра+дилюента)
🔶раствор клеток проходит через апертуру
🔶каждая клетка в потоке изменяет напряжение
🔶происходит регистрация величины импульса для клетки

#WBC #КАК

В результате получаем такую ⬆️гистограмму распределения с 3 пиками ⬇️
▪️ 35-90 мкл — лимфоциты (LYMPH)
◾️90-120 мкл — «средние клетки», корреляция с моноцитами, но могут попадать эозинофилы и базофилы (MXD)
◼️120-400 мкл — нейтрофилы, эозинофилы, базофилы (GRAN)

🔰Появление аномальных клеток смазывает впадины между пиками.

Лаба с 3diff анализатором обычно микроскопирует много лейкоформул (60-100%). Но если для ваших пациентов формулу считать обязательного (н-р, новорожденные), то почему бы не экономить на реагентах?

#WBC #КАК

Для разделения лейкоцитов на 5 фракции (и более) нужна уже комбинация методов (в зависимости от анализатора):
🔶кондуктометрия
🔶радиочастотный анализ
🔶оптический метод
🔶окрашивание пероксидазой
🔶флуоресцентные красители
🔶клеточно-специфические лизирующие реагенты
🔶РНК/ДНК-гистоновый краситель

В результате получаем скатерограмму распределения с зонами для нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, лимфоцитов и моноцитов.

🔰Для таких анализаторов чувствительность к обнаружению большого кол-ва аномальных клеток >90%, микроскопии подвергается 15-20% проб.

#WBC #КАК

Причины ложного изменения числа лейкоцитов:

Ложное ⬆️WBC:
нормобласты (резистентны к лизису)
криоглобулинемия
агрегаты тромбоцитов
малярия (эритроциты с гаметоцитами распознаются как лейкоциты)

Ложное ⬇️WBC: разрушение лейкоцитов (длительное хранение пробы; грубое перемешивание крови).

#WBC #КАК

❓Пациент принимает варфарин, его ПТ 34 сек. Чему равно МНО

Пишите предположения в комментариях ⬇️ Ответ там же завтра.

#case от Blood-Academy

Гематологический анализатор точно считает и дифференцирует лейкоциты (конечно при отсутствии аномальных популяций).
✅подсчитывается тысячи клеток, в сравнении с 100-200 штук при микроскопии.
✅точный, воспроизводимый результат при очень низком или высоком числе лейкоцитов.

🔰Но микроскопия остается необходимой в присутствии «флагов» и аномальных популяций, морфологических аномалий.

⏩В рутинной практике, лейкоформулу чаще считают на 100 лейкоцитов.
Стоит помнить, что Classification of Tumours of Haemopoietic and Lymphoid Tissues рекомендует подсчет на 200 клеток.

#WBC #КАК

❓Когда считать формулу после анализатора
Этот вопрос приводит к ссорам 😁 но обычно не имеет ответа

Советом по стандартизации в гематологии ICSH были предложены критерии для микроскопического исследования. На них можно опираться, дополнять или урезать с учетом специфики отделений и пациентов.

По какому принципу вы отбираете пробы для микроскопии?

#WBC #КАК

Посмотрим на разницу между незрелыми нейтрофилами?

🔰Их увеличение в периферической крови (до миелоцитов, метамиелоцитов, при гемобластозах до промиелоцитов) называют сдвигом в лейкоцитарной формуле влево.

⏩Отличить миелоцит от метамиелоцита:
Округляем ядро клетки и определяем его центр.
Миелоцит — вдавление ядра не попадает в центр.
Метамиелоцит — вдавление ядра более выражено и соприкасается / выходит за пределы центра ядра.

⏩Отличить метамиелоцит от палочкоядерного нейтрофила:
Метамиелоцит — длина ядра <3 раз его толщины.
Палочка — длина ядра больше, чем в 3 раза его толщины.

#WBC #КАК

🔰Приведу определение (признаки) палочкоядерных нейтрофилов:

🇺🇸Американский колледж патологов (CAP):
🔴Такого же размера или немного меньше метамиелоцита.
🔴Центрально или эксцентрично расположенное ядро.
🔴Ядро в форме полосы, сосиски, букв C или U, может быть дольчатым.
🔴В случае дольчатого строения - перемычка между долями должна быть достаточно широкой, чтобы четко определялось 2 лопасти ядра.

🇷🇺Отечественные критерии:
🔵Толщина перемычки ядра не менее 1/3 от самой широкой части ядра
🔵При Т и Y-образной форме ядра, или наложении частей ядра друг на друга без
видимой межсегментарной перемычки - клетка относится к сегментоядерным.

Просто ❓Не думаю.

Стандартизация при подсчете палочек Ох как затруднена. Поэтому часто получается разный вариант лейкоформулы у одного и того же пациента (у одного врача, и среди разных врачей тем более).

А в этой⏩ статье как раз демонстрируют низкую воспроизводимость при подсчете палочкоядерных нейтрофилов.

#WBC #КАК

❓Какая из комбинаций CD-маркеров лучше всего описывает стволоовые клетки крови

Пишите предположения в комментариях ⬇️Ответ там же завтра.

#case от Blood-Academy

🧪Что же рекомендует относительно палочек лабораторное сообщество

🔰ICSH рекомендует учитывать палочкоядерные нейтрофилы как сегментоядерные.
Так как, при учете сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов вместе - коэффициент вариации (CV) для общего числа нейтрофилов снижается.

❗️При повышенном содержании палочек можно (и нужно) оставить комментарий в бланке ответа.

Многие лаборатории не указывают палочки отдельно - это вполне приемлемая практика.
Так как:
✅низкая воспроизводимость при подсчете.
✅отсутствие строгих критериев, контроля качества, субъективность.
✅времязатраты на приготовление мазка.
✅современные анализаторы определяют дополнительные параметров, которые могут помочь в диагностике инфекции по КАК.

В то же время:
♦️палочки включены в некоторые клин. реки (неонатальный сепсис, легочная инфекция).
♦️используют для расчет индекса сегменты/палочки.
♦️некоторые врачи в некоторых учреждениях требуют их подсчета.

🔰Выход из этой ситуации - работа с клиницистами. Просвещать, обучать, выдавать вместо палочек IG индекс или только сегменты. Да, тяжело и неблагодарно…

Но повышает безопасность пациентов.

#WBC #КАК #международный_опыт

Упомянутый ⬆️выше IG индекс измеряют анализаторы Sysmex. IG или Immature Granulocyte - показатель незрелых клеток, 6 diff популяция.

Референс:
%IG 0-0,6%
# IG 0-0,06 х 109/л

IG это промиелоциты, метамиелоциты и миелоциты (НЕ палочкоядерные).
✅лучшее выявление воспалительных заболеваний.
✅мониторинг терапии инфекций.
✅снижение кол-ва ручной микроскопи.

❓Как действовать при появлении сообщений анализатора?

🔰Флаг “IG Present” рекомендаци Sysmex:

Просмотр (не подсчет) мазка для исключения малигнизации/особенностей клеток:
для первичных пациентов (более 90 дней от предыдущего рез-та)
если IG >5%

▶️Для клиницистов - выдавать информацию в виде индексов %IG и # IG.
Сдвиг влево при %IG >1% и # IG >0,1 х 109/л

🔰Флаг “Left shift” рекомендаци Sysmex:

Просмотр (не подсчет) мазка:
для новорожденных
при нейтропении или нейтрофилезе, или флаге “WBC Abn Scattergram”

▶️Для клиницистов - оставляем комментарий, в случае увеличения кол-ва палочек.

Не призываю вас следовать именно этим рекомендациям, если в вашей лабе анализатор с возможностью подсчета IG.

❕ Каждая лаборатория может подобрать для себя алгоритм действий, критерии для подсчета лейкоформулы и просмотра мазка. При этом снизив %ручной микроскопии, но сохранив чувствительность к обнаружению патологии.

#WBC #КАК

Статья ⏩как одна из иллюстраций ценности определения IG.

В ней проводили сравнение маркеров сепсиса - числа незрелых гранулоцитов (# IG),
СРБ, липополисахарид-связывающего белка (LBP) и ИЛ-6.

IG попали в эту компанию, так как согласно критериям ACCP/SCCM при сепсисе должно присутствовать ≥2 признаков:
▶️температура >38C или <36C
▶️ЧСС >90 уд/мин
▶️ЧДД >20 вдохов/мин или раCO2 <32 мм рт.ст.
▶️кол-во WBC >12х109/л или <4×109/л или >10% незрелых (палочкоядерных) нейтрофилов
и вот как раз кол-во незрелых нейтрофилов.

Результаты:
🔵сепсис связан с увеличением количества IG.
🔵IG стат.знач. различается у пациентов с инфекцией в течение первых 48 ч (в отличие от СРБ).
🔵IG более надежный маркер сепсиса, по сравнению с CРБ, белком, связывающим липополисахарид, и ИЛ-6 (ROC-анализ).

#WBC #КАК #статья