Наконец дошёл до Highfleet.
Визуальная новелла в пиксельартном стиле с уровнем сложности "Подставляй свою сраку!"
Визуальная новелла в пиксельартном стиле с уровнем сложности "Подставляй свою сраку!"
Forwarded from В 33-х парсеках от Земли
Один из проектов у меня полностью завязан на линии немелкоклеточного рака легкого человека А549. Я слышала от старшего коллеги, что это неудачная модель для изучения митохондрий - которые, разумеется, и требовалось в них изучать, - а кроме того, в отличие от других клеток, их оказалось сложно вылечить от микоплазмы. Когда потребовалось провести ее экстерминацию в дефицитных откриспованных А549, привезенных мне из Ирландии, я, начитавшись Видаля, решила попробовать кларитромицин.
Потестировала переносимость на клетках HCT116, и оказалось, что даже при 50 мкМ они и не думают гибнуть. Однако клеткам А549 и U2OS от минимальных концентраций стало очень плохо, и в частности, наблюдалась очень сильная вакуолизация. С азитромицином вышла та же история - правда, токсичность оказалась еще выше: они при сходных концентрациях уменьшились в размерах и перестали делиться - выглядели так же, как при обработке ингибитором обоих mTORC'ов и индуктором аутофагии торином 2.
Пошерстив пабмёд, я выяснила, что кларитромицин, азитромицин и, судя по всему, макролиды в принципе - ингибиторы поздней аутофагии (например, вот, вот, вот, вот). Для клеток НСТ116 кларитромицин был токсичен только в концентрациях более 80 мкМ, но не за счет аутофагии, а ингибирования калиевого канала hERG1 (вот). У U2OS и A549 довольно высокий базовый уровень аутофагии, в отличие от HCT116, - возможно, потому их микоплазма больше и любит и потому макролиды для них токсичны в меньших концентрациях.
Думаю, не добавить ли их в работу в качестве дополнительных ингибиторов аутофагии - или они приобретут устойчивость, пока я выбиваю из них микоплазму?
#лабораторный_могул
Потестировала переносимость на клетках HCT116, и оказалось, что даже при 50 мкМ они и не думают гибнуть. Однако клеткам А549 и U2OS от минимальных концентраций стало очень плохо, и в частности, наблюдалась очень сильная вакуолизация. С азитромицином вышла та же история - правда, токсичность оказалась еще выше: они при сходных концентрациях уменьшились в размерах и перестали делиться - выглядели так же, как при обработке ингибитором обоих mTORC'ов и индуктором аутофагии торином 2.
Пошерстив пабмёд, я выяснила, что кларитромицин, азитромицин и, судя по всему, макролиды в принципе - ингибиторы поздней аутофагии (например, вот, вот, вот, вот). Для клеток НСТ116 кларитромицин был токсичен только в концентрациях более 80 мкМ, но не за счет аутофагии, а ингибирования калиевого канала hERG1 (вот). У U2OS и A549 довольно высокий базовый уровень аутофагии, в отличие от HCT116, - возможно, потому их микоплазма больше и любит и потому макролиды для них токсичны в меньших концентрациях.
Думаю, не добавить ли их в работу в качестве дополнительных ингибиторов аутофагии - или они приобретут устойчивость, пока я выбиваю из них микоплазму?
#лабораторный_могул
Spandidos-Publications
Clarithromycin attenuates autophagy in myeloma cells
It has been reported that clarithromycin (CAM) augments the anti-tumor activity of thalidomide against multiple myeloma (MM) cells, while the mechanism remains unclear. A myeloma cell line or primary myeloma cells were treated with CAM. Autophagy was analyzed…
👍1
Forwarded from В 33-х парсеках от Земли
В статье экспрессировали токсин микоплазмы и смотрели на вакуолизацию. Ну и "лечили" ингибиторами v-ATPase.
Forwarded from Зоопарк из слоновой кости
#их_нравы
В Nature вышла статья о том, что, оказывается, прорывных, революционных работ за последние годы публикуется все меньше, а инкрементальных - все больше. И даже метрику придумали. И даже прелположили, что это может быть связано с массовизацией науки.
На третий день Зоркий Глаз заметил, что в сарае нет четвертой стены (c)
https://www.nature.com/articles/d41586-022-04577-5
В Nature вышла статья о том, что, оказывается, прорывных, революционных работ за последние годы публикуется все меньше, а инкрементальных - все больше. И даже метрику придумали. И даже прелположили, что это может быть связано с массовизацией науки.
На третий день Зоркий Глаз заметил, что в сарае нет четвертой стены (c)
https://www.nature.com/articles/d41586-022-04577-5
Nature
‘Disruptive’ science has declined — and no one knows why
Nature - The proportion of publications that send a field in a new direction has plummeted over the last half-century.
Решительно одобряем данную инициативу.
Во первых - кровь смывает любую вину.
Во вторых - предлагаю давать им путёвки в ВШЭ, чтоб у местных соевиков (тех, кто ещё остался) жиденькие дрищщи по штанине потекли от страха.
Во первых - кровь смывает любую вину.
Во вторых - предлагаю давать им путёвки в ВШЭ, чтоб у местных соевиков (тех, кто ещё остался) жиденькие дрищщи по штанине потекли от страха.
👍1👎1
Forwarded from ЕЖ
Пригожин обратился с просьбой к руководству МГУ и МГИМО принять без вступительных экзаменов бывших заключённых, которые отличились в СВО. Константин Калачев
Forwarded from историк-алкоголик
Страны «первого мира» - это буквально, где не топят и не лечат, а рашкованы в своей «Заснеженной Нигерии» дофига разбалованы.
Zmall Pharma pinned «Один из проектов у меня полностью завязан на линии немелкоклеточного рака легкого человека А549. Я слышала от старшего коллеги, что это неудачная модель для изучения митохондрий - которые, разумеется, и требовалось в них изучать, - а кроме того, в отличие…»
Forwarded from Кружок Пейпеца
Немного рекомендаций по расчету дозировок новых психоактивных веществ. Абсолютно бессмысленно смотреть данные in vitro, (Ki, EC50, Emax), здесь не создано адекватных моделей для трансляции хотя бы на уровень in vivo. Лучшим и наиболее точным способом прикинуть дозы является посмотреть соотношение доз в тесте лекарственной дифференцировки, лучше при интрацеребровентрикулярном введении, чтобы минимизировать влияние аллометрики, т.е. соотношения массы мозга к массе тела у животного и человека. В тесте лекарственной дифференцировки(ЛД) , детали методики можете загуглить, животное по субъективным ощущениям сравнивает два вещества по эффекту и определяет: сколько нужно Х, чтобы перло как Y. Почему это лучший вариант, да потому что поведенческие тесты слишком грубо оценивают поведение, индуцированное веществом (критерии эффекта, точность аппаратуры, умения учёного и т.д) и все может зависить от огромного числа факторов, а тут по сути мы спрашиваем у грызуна: "каково тебе, братишка? ". Для определения психонавтских доз самый лучший метод. Т.е. если в тесте ЛД для крысы 1 у.е. ЛСД можно заменить так, чтобы животное не заметило подмены 1.1 у.е. нового ПАВ, то ваше соотношение 1 к 1.1. Используя знания о хорошоизученных на человеке веществах делаем перенос на искомое вещество. Если хотите такой же эффект как от 100 мкг ЛСД, то примите 110 мкг нового ПАВ. Думаю предельно понятно.
Теперь немного цифр для ориентира. А. Хоффман хотел создать дыхательный аналептик и решил синтезировать эрготаминовый аналог кордиамина, так что история у него вполне медицинская. У d-LSD-25 было две официальные медицинские дозы: антимигренозная 25-75 мкг и около 100 мкг для уменьшения дозы опиоидных анальгетиков, в основном героина, в 2-2,5 раза. <150 мкг - стандартная доза для научных исследований на людях. В дозах > 150 мкг возникают побочные эффекты в виде гепатотоксичности, в книге Столярова макс.испытанная доза 400 мкг. Среднелетальная доза (LD50) на человека ~ 12 мг. LD99 - 70 мг. Обладает доказанным тератогенным действием. На сегодняшний день на чёрном рынке не продается. Последние партии было поставлены из Чехословакии в конце 90-х по линии КГБ, остатки распространяли ещё лет 10. Потом через Питерские порты из Швейцарии еще года до 2010. Затем на массовом чёрном рынке вместо d-LSD-25 в 99% случаев DOB/NBOMe.
Домашнее задание: по известным данным в тесте лек.дифферерцировки прикинуть дозу TCB-2 на человека. Обратите внимание на единицы измерения! Всем удачи.
Теперь немного цифр для ориентира. А. Хоффман хотел создать дыхательный аналептик и решил синтезировать эрготаминовый аналог кордиамина, так что история у него вполне медицинская. У d-LSD-25 было две официальные медицинские дозы: антимигренозная 25-75 мкг и около 100 мкг для уменьшения дозы опиоидных анальгетиков, в основном героина, в 2-2,5 раза. <150 мкг - стандартная доза для научных исследований на людях. В дозах > 150 мкг возникают побочные эффекты в виде гепатотоксичности, в книге Столярова макс.испытанная доза 400 мкг. Среднелетальная доза (LD50) на человека ~ 12 мг. LD99 - 70 мг. Обладает доказанным тератогенным действием. На сегодняшний день на чёрном рынке не продается. Последние партии было поставлены из Чехословакии в конце 90-х по линии КГБ, остатки распространяли ещё лет 10. Потом через Питерские порты из Швейцарии еще года до 2010. Затем на массовом чёрном рынке вместо d-LSD-25 в 99% случаев DOB/NBOMe.
Домашнее задание: по известным данным в тесте лек.дифферерцировки прикинуть дозу TCB-2 на человека. Обратите внимание на единицы измерения! Всем удачи.
У нас было 2 ламинара, 75 разных линий клеток, 5 крутейших микроскопов с кучей приставок, наполовину заполненное криохранилища и гора противоопухолевых агентов, много аптечной дряни и флуоресцентные красители, всех цветов, а ещё литр разведённого этидия бромида, литр среды LB, ящик пластиковых расходников, пол-литра плазмид с GFP и две дюжины различных конструкций. Не то чтобы это всё было нужно в научной деятельности, но раз начал заниматься биотехом, то иди в своём увлечении до конца. Единственное, что меня беспокоило — это упаковочные плазмиды. В мире нет никого более мрачного, сурового и безнравственного, чем человек в молбиольном угаре. И я знал, что довольно скоро мы в это окунёмся.
❤1
Forwarded from Зоопарк из слоновой кости
#их_нравы
В США приняли норму, согласно которой FDA (тамошний регулятор фармы) теперь не обязан требовать, чтобы лекарство прошло тесты на животных перед испытаниями на людях.
Зоошиза, само собой, в восторге. Те, кто верит в могущество компьютерного моделирования и прочих альтернативных методов (включая, впрочем, и "мокрые"), очень рады, полагая, что наука шла-шла и, наконец, дошла. Остальные настроены весьма скептически, полагая, что у FDA хватит ума не применять эту норму до поры до времени и что моделирование пока все-таки не настолько круто, как это показывают разработчики.
https://www.science.org/content/article/fda-no-longer-needs-require-animal-tests-human-drug-trials
В США приняли норму, согласно которой FDA (тамошний регулятор фармы) теперь не обязан требовать, чтобы лекарство прошло тесты на животных перед испытаниями на людях.
Зоошиза, само собой, в восторге. Те, кто верит в могущество компьютерного моделирования и прочих альтернативных методов (включая, впрочем, и "мокрые"), очень рады, полагая, что наука шла-шла и, наконец, дошла. Остальные настроены весьма скептически, полагая, что у FDA хватит ума не применять эту норму до поры до времени и что моделирование пока все-таки не настолько круто, как это показывают разработчики.
https://www.science.org/content/article/fda-no-longer-needs-require-animal-tests-human-drug-trials
Science
FDA no longer needs to require animal tests before human drug trials
New law welcomed by animal welfare groups, but others say change won’t happen fast
Дорогие Суровикин, Лапин и Шойгу!
Зачем я плачу налоги, если киевские колл-центры "службы безопасности Сбербанка" всё ещё работают и активно названивают?
Зачем я плачу налоги, если киевские колл-центры "службы безопасности Сбербанка" всё ещё работают и активно названивают?