SH-SY5Y - сублиния клеток нейробластомы SK-N-SH, часто используемую в качестве модели культуры нейронов для продукции статей. Перед тем, как налить им что-то, что сам пьешь, их необходимо дифференцировать с помощью нескольких соединений и/или факторов.
Когда я взяла эти клетки, мне сказали, что культура выдерживает около 20 пассажей, после чего теряет нейрональных маркеры и перестает дифференцироваться. Правда, с какого момента отсчитывали пассажи, не сообщили. Да и по опыту коллег, они неплохо дифференцируются спустя довольно приличное число пассажей.
Постепенная потеря способности к дифференцировке в первую очередь связана с тем, что в культуре есть две субпопуляции: дифференцирующиеся нейробластоподобные клетки (N-типа) и более активно делящиеся эпителиально-подобные клетки (S-типа), постепенно вытесняющие нейрональные клетки.
Когда я сортировала светящиеся клетки с флуоресцентным репортером, я обнаружила две немного различающиеся по светорассеянию субпопуляции, которые потенциально могли оказаться N- и S-клетками. Мне пришло в голову попробовать их разделить.
После разморозки клеток оказалось мало, и когда они подросли, образовались колонии клеток двух морфологических типов, похожих на популяции из статьи. Так что мне зачем-то удалось достоверно показать, что у SH-SY5Y есть два подтипа клеток. Ну и кроме того, возможно, процент клеток с нейритами все-таки стал выше, чем в исходной популяции, но это уже неточно. Про то, как я сортировала это, напишу позже.
Ниже пруффото с тапочка, снято на телефон через окуляр. Единственное, что меня смущает, - это то, у них без дифференцировки так много нейритов. Но они выглядят так все время, независимо от условий ведения, так что возможно, это норма.

#лабораторный_могул

Картинка из статьи