Пост по ссылке и связанный с ним вопрос в чате мне напомнили о паре случаев.
Однажды у нас посередине эксперимента изменилась локализация одного регуляторного белка, слитого с GFP, как раз в клетках линии остеосаркомы U2OS. В первых экспериментах в норме белок был равномерно распределен в цитозоле, а при стрессах шел к лизосомам - зато потом он все время был колокализован с митохондриями.
В другом случае я получала с помощью лентивирусной трансдукции сенсор на митофагию из линии человеческих легочных фибробластов MRC5, иммортализованных большим Т-антигеном вируса SV40. Способ иммортализации убил р53 и ретинобластому в клетках, соответственно, нарушив G1-чекпоинт и репарацию ДНК. К этому могут добавиться последствия инсерционного мутагенеза при встраивании лентивирусного вектора. И мы имели возможность последствия геномной нестабильности увидеть в микроскоп.
Сенсор - химерный белок mCherry-GFP-FIS1, который окрашивает митохондрии в желтый цвет. Я регулярно наблюдала в культуре клетки, в которых митохондрии светятся только красным, что говорит о том, что в GFP что возникает мутация и он перестает светится. Пару раз я встречала только зеленые клетки, что говорило об аналогичной мутации в mCherry. Но однажды произошла любопытная вещь: спустя некоторое число пассажей вместо желтых митохондрий мы обнаружили, что в клетках цитоплазма равномерно окрашена в красный цвет, что говорило о том, что GFP сломался посередине, а mCherry и FIS1, отвечающий за митохондриальную локализацию репортера, транслировались отдельно. Нонсенс-мутация выглядит невероятной, так что, скорее всего, это или хромосомная перестройка, или мутация в GFP, которая привела к появлению 2A-сайта.

#лабораторный_могул

Ровно 20 лет назад вышел великий Morrowind, задавший высочайшую планку для РПГ и игр с открытым миром.

Миром, в котором ты был мало чем ограничен и где тебе не очень-то рады.

Миром, где ты можешь как довольно быстро убить божество или двух, так и принять смерть от грязекраба.

Миром, где ты можешь помимо квестов, просто гулять, слушать крики Силт Страйдеров, охотиться на скальных наездников, наслаждаться видами Аскадианских островов, собирая грибы и травы или купить кошко-раба или рабыню редгардку.

Как свет Солнца, проходя сквозь кристалл лунного сахара, превращается в танец множества цветов, так и 3-я часть Древних свитков стала настоящим культом, порождающим смежные культы внутри культов.
Возрадуемся, что однажды волею Шигората вместе идеально сошлись люди, ресурсы и конечно же талант гениального композитора Джереми Соула.

НАС ВЫПУСТЯТ
ЭТО ТОЧНО!