А вот пример как вирусы забирают то, что принадлежит им по праву - линия HEK 293 была иммортализована путём внедрения в неё генома человеческого аденовируса 5 серотипа. В те времена (70е года) это делалось просто - нарезанный МЕХАНИЧЕСКИ геном вируса (да да - длинные куски ДНК при пропускании через иглы суб-миллиметрового диаметра распадаются от воздействия гидродинамических сил) был загнан в первичные клетки почек человека (Human Embryonic Kidney, хотя позже выяснено, что это были надпочечники). И после отбора колоний, только "опыт номер 293" оказался успешным и пригодным для дальнейшей работы. В дальнейшем, это открыло путь для такой важной штуки как генотерапия - в таких клетках можно собирать репликативно-неактивные аденовирусы. А прикол вот в чём - в той выжившей колонии оказался ген Е1, встроившийся в геном. Этот ген необходим для запуска репликации и сборки аденовирусов. В нормальных человеческих клетках он отсутствует - пока они не встречаются с аденовирусом ;)
Трюк в чём - к HEK293 добавляются плазмиды, несущие геном модифицированного аденовируса (допустим, с правильным геном какого-нибудь дефектного белка). Этот вирус успешно собирается (без встройки гена Е1), и "кастрированные" вирусные частицы вкалываются человеку - в итоге в организм пациента попадает строго определённое количество вирусных частиц, необходимое для доставки исправленной ДНК, причём сам организм пациента новые вирусные частицы не производит.
Но тут нас поджидает опасность - иногда, при наработке аденовирусов, случаются сбои и в вирусный капсид пакуется ДНК гена Е1. В таком случае получается полноценный репликативно-активный аденовирус, который, попадая в организм пациента, трансформирует большее количество клеток, чем это необходимо. Не смотря на то, что наша иммунная система успешно и быстро борется с аденовирусами, это всё равно несколько неприятно. И когда кто-то говорит о "дозозависимой успешности генотерапии" - гоните его, насмехайтесь над ним. Успешный расчёт доз в данном случае возможен только при использовании гарантированно не самовоспроизводящихся векторов, например наночастиц или MOFов (металлорганических нано-"губок").

А вот та самая оригинальная статья с первым сообщением о клетках HEK293. Обратите внимание на длительность выделения стабильного жизнеспособного клона - больше года непрерывной работы, без контаминации, отключения электричества и углекислоты в инкубаторе, заростов и "ой я студентов пустила пересеять". Титаническая работа.

Дорогие коллеги, компания BestDoctor ищет среди наших подписчиков людей на позиции врача-консультанта, врача-куратора и врача-терапевта для онлайн-консультаций.

Подробнее: https://bestdoctor.ru/career/vacancy/medics-medach

BestDoctor – медицинская компания, которая разрабатывает технологичные и сервисные решения для людей и для бизнеса. Мы работаем в востребованной сфере ДМС страхования и создаем кардинально новый продукт на рынке, а также развиваем технологичные решения в системе оказания медицинской помощи.

Клиент для нас не просто клиент, а пациент, который вместе с нами понимает, что медицина и забота о здоровье — это просто, когда рядом есть надежный партнер.

Оставляйте своё резюме на сайте и с вами обязательно свяжутся.

​​До Нового года осталось совсем немного. Елка украшена, оливье приготовлено, и уже третий раз подряд просмотрена «Ирония судьбы». Кажется, все идет по классическому плану.

Но мы понимаем, что такая чудесная (и скучная) идиллия может быть разбавлена не только хлопушками и фейерверками. Травмы, ранения, ушибы и прочие неприятности в «абсолютно невероятных» ситуациях — традиционные новогодние атрибуты медика. Порой смешно, но чаще — не до смеха.

Потому мы подготовили для вас руководство по выживанию в новогодние праздники. С его помощью вы сможете справиться с любой напастью, которая поджидает вас в эти праздничные дни.

Читать далее → https://medach.pro/post/2509

Источник в Кремле подтвердил наступление нового года. Слава России!

Белковая инженерия глазами ребенка 6 лет

Рекомендую тёплое и ламповое архивное чтение. В самый раз для расслабление в новогодние праздники. Статья Оксенгендлера (автора монографии "Яды и противоядия") в ноябрьском номере "Химия и жизнь" от 1992 года - "А биомолекулы против!". По нумерации страниц в исходном документе - страница 44.

Историческая заметочка -
Нелокальность хранения воспоминаний в мозге была открыта Карлом Лешли во время довольно простого эксперимента. Сначала он обучал мышей проходить один и тот же лабиринт, затем хирургически разрушал им различные участки коры. Вне зависимости от участка, у всех групп мышей снижение результатов происходило в равной мере. Корреляция присутствовала только с масштабом микрохирургического вмешательства.

Существует теория, что энграммы памяти о рефлексах хранятся в межпозиционном ядре мозжечка (nucleus interpositus). С одной стороны это кажется вздором - где память, с её сложной организацией и необходимостью задействования гиппокампа для перехода краткосрочной в долгосрочную, а где мозжечок? Видите ли в чём дело, мозг - крайне сложно, и в месте с тем, оптимально устроенный орган. Зачем напрягать кору и все эти сложные, эволюционно молодые, структуры? Когда можно просто, по одному лишь болевому (например) стимулу быстро отдёрнуть руку.
Пусть лучше перебздеть, чем недобздеть.

Известно, что длительный приём антигистаминных препаратов (особенно первых поколений, особенно неизбирательных, особенно свободно проходящих в ЦНС как к себе домой) снижает когнитивные способности и ухудшает способность к запоминанию. Считается, что это связано с близким структурным филогенетическим родством рецепторов гистамина (особенно первого типа Н1) с мускариновыми. Если вы посмотрите профиль связывания того же димедрола, то увидите достаточно сильную аффинность к обоим видам рецепторов. А как поступают с памятью холинолитики - напоминать (пардон за каламбур) не надо, вспомните (да блять) хотя бы атропин и скополамин.
Но существует также и замечательное наблюдение относительно высокоселективных антигистаминных, а точнее - обратных агонистов Н3 и Н4 рецепторов, не взаимодействующих с Н1, Н2 и mAChR.. В нормальных условиях (т.е. при встрече с гистамином или другим агонистом) эти рецепторы снижают уровень цАМФ внутри клетки, а вот при воздействии селективных антагонистов - наоборот, повышают. Более того, при воздействии Н3 и Н4 антагонистов на гистаминэргический нейрон... повышается выброс гистамина как такового! За счёт увеличения концентрации цАМФ и взаимодействия с кальциевыми сигнальными системами. А если учесть, что в основном эти типы рецепторов находятся на нейронах ЦНС, то ВНЕЗАПНО высокоселективные Н3/Н4-антигистаминные могут являться перспективными cognitive enhancer'ами.

​​В 2015–2016 годах был написан объемный курс, посвященный ключевым нейромедиаторам. Этот курс был настоящей жемчужиной нашего сообщества, но, к сожалению, был поврежден при переездах сайта и чуть было не канул в Лету. К счастью, мы его полностью восстановили и сверстали в виде небольшого пособия. Данный курс позволит вам погрузиться в удивительный мир нейромедиаторов и узнать их функцию в норме и при патологии. Несмотря на то, что поднимаемые темы достаточно сложны, курс написан легким и приятным языком. Автор также умело разбавляет описание взаимодействий лигандов и рецепторов шутками и историческими сведениями, что способствует улучшению понимания сложных взаимодействий на уровне синапсов. В дальнейшем мы планируем полностью обновить этот курс, добавив в него актуальные сведения из современных исследований. А пока предлагаем вам ознакомиться с версией 1.0.

Читать: https://medach.pro/post/2512

Телеграм-канал автора курса: https://t.me/smallpharm

Знаете ли вы?

Вчера в Твиттере забанили не только аккаунт Трампа, но и аккаунт Sci-Hub. Причем наш аккаунт забанили раньше, даже появились статьи, где люди возмущались в комментариях, что полезный Сайхаб забанили, а Трампа годами забанить не могут. Через несколько часов снесли аккаунт Трампа.

Формальная причина бана Sci-Hub в Твиттере - нарушение копирайта. Хотя 9 лет это никого не волновало. На момент блокировки было 183 тысячи подписчика, а твиты набирали тысячи репостов и комментариев, причем 90% в поддержку Sci-Hub. И вот все нажитое непосильным трудом пропало! Возможно, скрытой причиной блокировки аккаунта проекта стали протесты в США и активизация борьбы с русскими шпионами на этом фоне. Как известно, власти США подозревают меня в работе на ГРУ, а в Твиттере проекта Sci-Hub был закреплен большой плакат с Лениным.

Существует огромный класс генно-инженерных белков - так называемые "фьюз-белки". Структурно они состоят из одной аминокислотной последовательности, которая кодирует сразу три структурных части - первый белок, линкер и второй белок. Размера и структура линкера подбирается из следующих соображений - 1) Отсутствие влияния на фолдинг соединяемых белков, 2) Отсутствие собственной каталитической активности, 3) При желании - наличие специфических сайтов узнавания протеазами.
Как правило, при проектировании плазмид с генами этих белков, их ставят под промоторами конституитивной (постоянной) экспрессии, например под промотором цитомегаловируса (CMV).
Это очень удобно, когда нужно изучить совместное влияние на клетку гиперэкспрессии двух или более белков, но не хочется мучаться с подбором нескольких плазмид с одинаковой продуктивностью и копийностью при встройке в клетку - достаточной собрать одну последовательность, чья трансляция в белок-два-в-одном будет проходить с одинаковой интенсивностью для обоих изучаемых белков.

Нейростероиды: биологические функции и терапевтический потенциал. Лекторий Медача.

Открытия последних двух десятилетий свидетельствуют о том, что мозг может самостоятельно синтезировать стероиды из холестерола de novo через механизмы, которые по крайней мере частично независимы от периферических желез, синтезирующих стероидные гормоны. Такие гормоны принято называть нейростероидами. В этой лекции аспирант СибГМУ Антон Николаевич Осипенко расскажет о том, что такое нейростероиды, какие у них есть биологические функции и какое они имеют медицинское значение.

https://youtu.be/NbA-3_Ff0YY

Мероприятие: "Эндокринология: во власти гормонов", Новосибирск, 24 февраля 2018.

Санкт-Петербург, максимальные внимание и репост! Разошлите по своим чатам и знакомым, быть может, кому-то это будет интересно.

Институт Мозга Человека им. Н.П. Бехтеревой РАН объявляет набор добровольцев для участия в психофизиологическом исследовании по картированию функций мозга. Требуются здоровые мужчины и женщины от 20 до 40 лет. Метод исследования — функциональная МРТ.

Требования:
- отсутствие признаков ОРВИ: при их наличии доброволец не допускается к прохождению исследования;
- неотягощенный неврологический анамнез;
- правши;
- хорошие зрение и слух;
- отсутствие приема медикаментов (витамины сюда не относятся) ;
- отсутствие абсолютных МРТ-противопоказаний. К таковым относятся любые инородные тела любой локализации, электронные водители ритма, электронные медицинские девайсы (типа инсулиновых помп), сосудистые клипсы, послеоперационные скобы;
- отсутствие некоторых относительных противопоказаний (неснимаемый пирсинг, массивные стоматологические конструкции типа брекетов, ретейнеров);

В период пандемии с необходимостью соблюдения мер противоэпидемического режима порядок прохождения следующий:

1. Посещение института для общения с сотрудниками лаборатории и сдачей экспресс-теста на SARS-Cov-2 за 2-3 дня до прохождения исследования. Только в случае отрицательного результата доброволец допускается к прохождению исследования.
2. Прохождение фМРТ-исследования после получения результатов теста.

Участие в исследовании поощряется вознаграждением.

По всем вопросам:
vk.com/myz_artem