Автоматический подсчет ретикулоцитов

🔰Автоматический подсчет ретикулоцитов проводится методом флуоресцентной проточной цитометрии.
— быстрый
— экономный в масштабе
— стандартизован
— высокая точность (подсчет более 30 тыс.кл)
— высокая воспроизводимость (CV 6%)

Суть:
🔵лизирующий реагент перфорирует мембрану клеток
🔵флуорохром проникает внутрь клеток через поры
🔵флуорохром метит внутриклеточные нуклеиновые кислоты

⏩В результате получаем гистограмму ⬆️распределения ретикулоцитов: интенсивность флуоресценции прямо пропорциональна содержанию РНК.

🔰Содержание РНК при созревании ретикулоцитов снижается. В зависимости от интенсивности сигнала (степени зрелости) различают:

🟢зрелые ретикулоциты с низкой абсорбцией LFR (реф. 87-99%)
🟠незрелые ретикулоциты со средней абсорбцией MFR (реф. 3-12%)
🔴незрелые ретикулоциты с высокой абсорбцией HFR (реф. 1-2%)

#Ret #КАК

Анализы парапротеинов и электролитов: эффект исключения электролитов

🚫При ГИПЕРпротеинемии или -липидемии результат определения электролитов ложно снижен - эффект исключения электролитов.

В образцах с увеличениием белка измеряли электролиты на двух анализаторах — используют ионоселективный электрод, но измеряют ионы косвенным или прямым методом.

Пробы:
🔶без подготовки, Siemens (косвенное измерение).
🔶предварительный нагрев, тот же анализатор.
🔶осаждение белка, тот же анализатор.
🔶фильтрация, тот же анализатор.
🔶без подготовки, Radiometer (прямое измерение).

‼️При любом способе предварительной подготовки и прямом измерении (ABL90) результаты электролитов значительно отличались от измерения косвенным методом.

Показано, что при гиперпротеинемии:
✅нагрев - наиболее подходящий метод предварительной подготовки для измерения K, Na, Cl.
✅подходящим методом измерения электролитов является ИС-электрод с косвенным измерением.

#case #электролиты

Индексы ретикулоцитов

Современные анализаторы позволяют рассчитывать и оценивать при лечении индексы ретикулоцитов 👇

✅ MRV, средний объем ретикулоцитов (реф. 101,1-128,8 фл)

- низкий объем ретикулоцитов объясняет появление микроцитов в крови.
- используется в диагностике ЖДА, мониторинге ответа на терапию железом, препаратами В6 и В12.

✅ IRF, фракция незрелых ретикулоцитов (реф. 2-14%) — IRF = MFR + HFR

- при ускоренном выбросе незрелых клеток из костного мозга IRF увеличивается.
- повышается значительно раньше RET% (как правило, на 2 дня).
- показатель регенерации костного мозга.
- маркер для мониторинга эффективности лечения препаратами В12, В6, железа и ЭПО.
- используют как допинг контроль.
- отсутствие увеличения говорит о резистентности к препарату или недостаточной дозировке.

Ret + IRF — замена индексу продукцииии ретикулоцитов

✅Delta-Не

- вычисляется как разница между содержанием гемоглобина в ретикулоцитах и зрелых эритроцитах.
- в норме результат всегда положительный (кроме новорожденных - при смене макроцитарной кроветворения на нормоцитарные).
- показатель биодоступности железа для эритропоэза.

✅ Ret-He, гемоглобин эритроцитов (реф. 28-35 пг)

- показатель биодоступности железа (доступное для включения в гемоглобин в эритроцитах за предыдущие 3-4 дня).
- ранний показатель оценки ответа на терапию железосодержащими препаратами (повышается через 2-3 дня).
- нет зависимости от воспалительных процессов.
наиболее значимый маркер железодефицитной анемии у детей.
- использование Ret-He+HGB снижает необходимость дополнительного биохимического тестирования на 80%.

#Ret #КАК

Индексы ретикулоцитов при сниженном гематокрите

Расчет индексов⬇️ важен для оценки эритропоэза и подбора схемы лечения.

При высоком уровне эритропоэтина, например, у людей с тяжелой анемией — ретикулоциты преждевременно высвобождаются из костного мозга в кровоток.

⏩При этом увеличивается число дней циркуляции (дозревания) ретикулоцитов в крови — приводит к ложному повышению числа ретикулоцитов.

✅ CRC, скорректированное число ретикулоцитов, рассчитывается при наличии анемии.

✅ RPI, индекс продукции ретикулоцитов.

— снижает эффект преждевременного высвобождения Ret из костного мозга, за счет учета времени созревания.
— рекомендуется рассчитывать, если присутствуют незрелые ретикулоциты (MFR и HFR) и пониженный Hct.

#Ret #КАК

Комплексная оценка анализа крови и индексов ретикулоцитов позволяет:

❓узнать характеристику анемии
❓активность эритропоэза (Ret, RPI)
❓наличие железодефицита (Ret-He↓) или дефицита фолатов/В12 (Ret-He↑)
❓вести мониторинг восстановления эритроцитарного ростка в ходе лечения ЭПО (Ret-He, IRF)
❓принимать решение о трансфузии эритроцитов (HGB, Ret-He)

#Ret #КА

Результат клинического анализа ⬆️
Вопросы ниже.

#анемия #КАК

Что такое макроциты

Макроциты — эритроциты большого размера.

Подозревают, если:
✅MCV>100 фл
✅RDW (популяции RBC разного размера)
✅большие эритроциты в мазке крови (>ядра малого лимфоцита)

‼️MCV зависит от возраста

Критерии макроцитоза:
🔵у недоношенных детей (≤25 недель) от 125 фл
🔵у доношенных детей от 110 фл
🔵у младенцы и детей младшего возраста от 90 фл
🔵у взрослых от 100 фл

#анемия #RBC

Находки в анализе крови и мазке — помогут в поиске причины макроцитоза

🔰Тяжелый макроцитоз (MCV 110-115 фл) почти всегда связан с мегалобластными анемиями.

🔰Анемия + цитопения (Leu-пения и/или Tr-пения) — первичное заболевание костного мозга.

🔰Особенности эритроцитов:
⏩Клетки-мишени — заболевание печени.
⏩Макроовалоциты — мегалобластный тип кроветворения.
⏩Сфероциты — наследственный сфероцитоз или аутоиммунная гемолитическая анемия.
⏩Агглютинация эритроцитов (холодовая).
⏩Гиперсегментированные нейтрофилы — мегалобластный тип кроветворения.
⏩Гипорсегментированные нейтрофилы или гипогранулярные нейтрофилы — миелодисплазия.

❕Изменения НЕ специфичны для указанных состояний

#анемия #RBC

Коллеги, всем привет ❤️

Сегодня начинается серия постов по обмену липидов: про методы измерения, рекомендации по выдаче результатов, контроль лечения гиполипидемическими препаратами.

Все посты можно найти по #липиды

Типы липопротеинов

В крови содержится 5 основных:
🔺хиломикроны
🔺липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП)
🔺промежуточной плотности (ЛПНП)
🔺низкой плотности (ЛПНП) - атерогенны
🔺высокой плотности (ЛПВП)

Каждый из них содержит холестерин и триглицериды в разном соотношении.

#липиды

Макро-форма витамина B12: причина ложных результатов

💊Высокий уровень В12 может быть при гематологических заболеваниях (промиелоцитарная лейкемия, истинная полицитемия), заболеваниях печени и почек, приеме добавок, помех при иммуноанализе.

🚫Ложно высокий уровень B12 может быть связан с:
— гетерофильными Ат.
— макровитамином-В12, комплекс витамина В12 + какой-то Ig.

Напоминайте клиницистам о макро-форме:
🔵при поиске причины неожиданно высокого уровня B12 — пациент НЕ принимает добавки B12, но уровень B12 высокий.

🔵при клинике дефицита В12, но нормальном результате В12 — макро-форма может маскировать дефицит.

#case #ИФА #методы #интерференция

Липидограмма

Включает:
🔻общий холестерин
🔻ХЛ ЛПВП
🔻триглицериды
🔻ХЛ ЛПНП

🚫ApoB не входит в стандартную липидограмму. Концентрация напрямую отражает атерогенные липопротеины.

🔴Лп(а) определяют 1 раз в жизни и не повторяют — Концентрации практически не меняется в течение жизни.

🟢ХЛ не-ЛПВП = Об ХЛ — ХЛ ЛПВП. Описывает весь атерогенный холестерин, включая ЛП(а).

Для каждого аналита существует 🥇эталонный метод измерения — показывает максимальную точность. Но для рутинного использования разработаны более простые методы.
Производители реагентов обеспечивают точность, сравнивая свой метод измерения с эталонным.

#липиды

Измерение холестерина

ХС измеряют ферментативными методами — точные при верной калибровке.

🧪Реагент для ХС обычно один флакон со всеми ферментами и другими компонентами реакционной смеси.

Например, ферменты: холестеролэстераза+холестеролоксидаза+пероксидаза.

🔰Значения калибратора прослеживаются до эталонного метода — это сснижает межлабораторные различия.

Если реагент-калибратор-прибор от одного производителя:
🔹точность определения холестерина ~1-3% от референтных значений.
🔹CV менее 2,5%.

#липиды #методы

Измерение триглицеридов

ТГ определяют ферментативными методами, автоматические анализаторы с «родными» реагентами работают с CV<3%.

🔰Ферментативные методы измеряют весь глицерин в реакционной смеси. В крови тоже содержится глицерин в низком клинически НЕ значимом содержании.

⏩Свободный глицерин из крови вносит погрешность в результат? Нужна ли поправка на него?

Поправку можно делать бланкированием триглицеридов:

🟠холостая проба с двумя кюветами:
определение свободного глицерина и общих триглицеридов в разных кюветах. Затем расчет разницы между результатами.

🟠двухэтапный способ в одной кювете:
расходование из реакционной смеси свободного глицерина — продукты реакции бесцветны. Затем измерение глицерина из состава триглицеридов.

Бланкирование всегда ⬆️время и стоимость анализа, поэтому его чаще игнорируют.

🔰Некоторые производители используют «бланк калибратора» — корректируют значения калибратора для компенсации среднего содержания свободного глицерина в пробе.

Такое бланкирование дает более точный и надежный результат для большинства проб.

#липиды #методы