Общие рекомендации по обращению с пробами для анализа гемостаза в карточках ⬆️

#гемостаз

Ускорение центрифуги

Тесты коагулограммы привередливые, режим центрифугирования имеет не последнее значение.

🔰Число оборотов в минуту рассчитывается для конкретной центрифуги, так как радиус ротора разный.

Узнать, сколько об/мин нужно настроить можно с помощью:
🔶 номограммы-таблицы ⬆️
🔶 калькулятора Относительное ускорение центрифуги


▶️у меня в лабе радиус ротора (r) центрифуги 25 см (250 мм)
▶️для гемостаза нужно 1500g
▶️проводим линию от 250 мм через 1500 g
▶️получаем 25000 об/мин

Наша настроена верно 15 мин, 2500 об/мин 🤓 Как у вас?

#преаналитика

Режим центрифугирования для разных типов плазмы:

🔴PRP богатая тромбоцитами плазма — 10 мин 200-250 g

🔴PPP бедная тромбоцитами плазма — 15 мин 1500 g

🔴PFP безтромбоцитарная плазма — 2 центрифугирования
▶️15 мин 1500 g
▶️сбор надосадочной плазмы
▶️15 мин 1500 g (двойное центрифугирование).

Остаточное число тромбоцитов примерно 10x10^9/л.

#преаналитика #гемостаз

❓Назовите пропущенную клетку

Пишите предположения в комментариях ⬇️ Ответ там же завтра.

#case от Blood-Academy

CLSI рекомендует корректировать объем цитрата в 🔵пробирках для гемостаза у пациентов с гематокритом более 55%.

Для сохранения верного соотношения плазма : антикоагулянт
‼️не кровь : антикоагулянт.

Проба с гематокритом >55%
⏩ меньше плазмы после центрифугирования
⏩ плазма повышенной концентрацией антикоагулянта
⏩ ложное удлинение ПВ, АЧТВ.

🔰Корректировка проводится до взятия крови, вручную, требуется дополнительное измерение гематокрита.

🔰К сожалению, не существует способа без изменения объема цитрата пересчитать готовый результат анализа.

Как рассчитать нужный объем цитрата натрия в карточке ⬆️

❓Кто-то делает так в работе? Поделитесь

#гемостаз

⬆️Таблица с рассчитанным объемом корректировки для разных объемов пробирок

❕Корректировка объема цитрата натрия в пробирках должна быть регламентирована СОП.

Есть несколько способов удалить лишний цитрат натрия:

1️⃣Со вскрытием пробирки (да, нарушается вакуум).
— открываем пробирку.
— убираем стерильным наконечником излишек антикоагулянта.
— взятие крови у пациента с помощью шприца.
— медленно, сняв иглу, перелить кровь из шприца в пробирку ДО метки.

2️⃣Без нарушения вакуума.
— убираем излишек антикоагулянта с помощью туберкулинового шприца.
— взятие крови у пациента обычным способом ДО метки.

🔰HCT <22% не требуют корректировки.

❓Скажите, кто нибудь такое делал в работе?

#гемостаз #преаналитика

‼️Важно помнить, тесты коагулограммы = тесты in vitro.

Не отражают происходящие в организме процессы, важную роль при диагностике играет личная история кровотечений или тромбозов.

Тесты скрининговой коагулограммы:
🔺 Активированное частичное тромбопластиновое время АЧТВ (сек)
🔺 Протромбиновое время ПВ (сек, МНО)
🔺 Фибриноген (г/л)
❌Тромбиновое время ТВ (сек) не входит к скрининг.

Идеально, если результат дополняется числом тромбоцитов.

#гемостаз

🔥Хорошая новость для лаб с анализатором STA-Compact-Max и реагентами Stago.

Показано, что HIL (🔴гемолиз 🟠иктеричность ⚪липемия) НЕ оказывают клинически значимого влияния на ПВ и фибриноген.

❕Оценивали именно клиническую значимость — учли биологическую и аналитическую изменчивость.

Но для АЧТВ нужно быть осторожными с реагентом STA-PTT Automate — значимая разница для гемолиза. На остальные АЧТВ реагенты HIL также не оказывает значимого влияния.

❓Вы бракуете легкий гемолиз для анализа гемостаза?

#преаналитика #гемостаз

Методика определения АЧТВ ⬆️

🔰АЧТВ характеризует внутренний и общий путь свёртывания крови.

Чувствителен к наследственным или приобретенным нарушениям факторов VIII, IX, X, XI, XII, V, II, фибриногена, прекалликреина, кининогена.

#гемостаз

Методика определения ПВ ⬆️

🔰ПВ характеризует внешний и общий путь свёртывания крови.

Чувствителен к наследственным или приобретенным нарушениям факторов II, V, VII, X и фибриногена.

Рекомендуется НЕ отражать в бланке значение протромбинового индекса (ПТИ%), только секунды ПВ и МНО.

Чаще всего реагенты содержат тромбопластины с МИЧ ~ 1:
🔻человеческий тканевой тромбопластин.
🔻тромбопластин из мозга кролика.

#гемостаз

Измерение фибриногена

🔰Фибриноген характеризует время образования сгустка фибрина.

Может измеряться несколькими методами:

🔵На основе определения протромбинового времени

При определении ПВ строится калибровочный график: концентрация фибриногена в разведениях стандартной плазмы от оптической плотности смеси.Фибриноген рассчитывается по графику, косвенный метод определения.

🔵Иммунологический метод

Определяется уровень антигена фибриногена. Используют при его высоком уровне или врожденной дисфибриногенемии — когда есть несоответствие между функциональной активностью и уровнем антигена фибриногена.

🔵Гравиметрический метод

УСТАРЕЛ, измерение веса фибринового сгустка.

🔵ТЭГ И РОТЭМ

Могут применяться для качественного определения концентрации фибриногена.

🔵по Клаусу, ищите ⬆️

#гемостаз

❓Назовите клетку

Пишите предположения в комментариях ⬇️ Ответ там же завтра.

#case от Blood-Academy

Методика определения тромбинового времени ⬆️

🔰ТВ отражает превращение фибриногена в фибрин на последней стадии каскада коагуляции.

Тест НЕ обязателен для скрининговой коагулограммы.

ТВ удлиняется при уровне фибриногена <1 г/л, чувствителен к гепарину.

#гемостаз

Д-димеры

— специфические продукты деградации фибрина, маркер активации коагуляции и/или фибринолиза.

Нужен для:
🟩 исключение тромбоза глубоких вен и ТЭЛА.
🟩 определение длительности лечения антикоагулянтами.
🟩 оценка риска повторного тромбоза у госпитализированных пациентов.
🟩 диагностика ДВС-синдрома.
🟩 оценка тяжести ковид-19.

‼️Пороговое значение Д-димера корректируется по возрасту для пациентов старше 50 лет:

ПЗ < возраст х 0,01 (только для FFU, мкг/мл)

Корректировка дает:
✅увеличение специфичности.
✅снижение дополнительных визуализирующих исследований.

🔰Интерпретировать Д-димер с осторожностью у:
— пациентов с повторными эпизодами тромбоза.
— пожилых пациентов.
— госпитализированных пациентов.

Ложноотрицательные результаты, если:
♦️симптомы ТЭЛА/ТГВ >14 дней.
♦️пациенты с гипофибринолизом.
♦️при подозрении на ТЭЛА/ТГВ и приеме варфарина или гепарина.

#гемостаз

Несколько тонких мест в измерении Д-димера:

🔹важна высокая чувствительность теста.
🔹важно именно количественное определение.
🔹отсутствует референтный метод.
🔹отсутствует стандартный калибратор.
🔹используют различные моноклональные АТ (отличаются по специфичности и чувствительности).
🔹результат в различных единицах (DDU FEU нг/мл мкг/л мг/л).
🔹нет международной стандартизации.

Методы определения (чувствительность различается):
▶️ ИФА.
▶️ Агглютинация эритроцитов в цельной крови.
▶️ Латексная агглютинация.

Все тест-системы используют антитела к неоэпитопам. Они образуются при расщеплении нерастворимого фибрина, и отсутствуют на фибриногене и фибрин-мономерах.

#гемостаз