Обнаружение плазмодиев в мазках методом микроскопии

— «золотой стандарт» диагностики малярии.
Готовят 2️⃣типа мазков:

Толстый
🔻визуализация плазмодиев независимо от клеточных структур (механический лизис эритроцитов).
🔻анализ большего объема крови (паразитов 〜в 30 раз больше, чем на такой же площади тонкого мазка).
🔻для скрининга (повышенная чувствительность).
🔻используют для измерения плотности паразитов.

Если в толстом мазке есть плазмодии→просмотр тонкого мазка для определения вида.

Тонкий
🔻сохраняется целостность и морфология эритроцитов (паразиты видны внутри эритроцитов).
🔻определение вида паразитов.
🔻используют для измерения плотности паразитов.

Микроскопия не позволяет:
❎ выявить низкую паразитемию (<5-10 паразитов/мкл).
❎диагностировать малярию в случае секвестрации плаценты во время беременности.

NB!
1 пациент = не менее 3 препаратов толстая капля + 3 тонких мазка.

#малярия #мазок

❗️Cito❗️режим выполнения анализа, при подозрении на малярию.

🔰Мазки крови должны быть исследованы в день забора крови. А ответ выдан через 1-2 ч после поступления материала.

🟢все положительные,
🟢сомнительные и
🟢10% отрицательных препаратов —
направляют для контрольного исследования и подтверждения в «Центр гигиены и эпидемиологии».

❌Отрицательные препараты хранят 3 месяца.
✅Положительные препараты хранят бессрочно.

#малярия

Недостаточное перемешивание размороженных аликвот сыворотки приводит к ошибочным результатам тестов.

🔰Авторы обратили внимание на различие результатов при тестировании размороженной сыворотки одного пациента, но разных аликвот.

При размораживании в пробе всегда образуется градиент концентрации. Перемешивание оказалось недостаточным…

🔰При большом количестве размороженных образцов часто для перемешивания пользуются вортексом - эта работа показывает, что стоит быть осторожным.

✅Лучше перемешивать переворачивая пробирки.
Вортекс как единственный способ перемешивания — ненадежен, может привести к ошибочным результатам. Дополнить эту ошибку может еще пипетирование из верхнего слоя пробы.

#case #преаналитика

Как сделать «толстую каплю» ⬆️

🟠Маркировать предметное стекло.
🟠Поместить небольшую каплю крови в центр стекла.
🟠Распределить каплю по кругу до диаметра 1,5 см2 с помощью уголка другого предметного стекла или аппликатором.
🟠Сушить в горизонтальном положении.

Можно готовить тонкий и толстый мазок на одном предметном стекле.

Качественно приготовленная толстая капля:
✅Через мазок (пока он влажный) можно рассмотреть газетный шрифт.
✅После окрашивания препарат имеет светлый фон без нитей фибрина и осадка краски.
✅При микроскопии под иммерсией в 1 поле зрения содержится 10-20 лейкоцитов.

#малярия #мазок

Tips and tricks:

🟢Сушите толстую каплю при комнатной температуре (это может занять несколько часов), можно использовать вентилятор в холодном режиме, чтобы ускорить высыхание.

🔴Не фиксируйте нагреванием и защищайте от горячей окружающей среды - чтобы исключить термофиксацию мазка.

🔴Недостаточно высушенные мазки (или слишком толстые) отделяются от предметного стекла при окрашивании.

🟢Приготовьте мазки как можно скорее после забора крови - чтобы избежать изменения морфологии паразита.

🟢Сначала окрасьте один препарат - чтобы оценить качество окрашивания, исправить дефекты окраски.

#мазок #малярия

Для установления диагноза при малярии нужно ответить на вопросы:
1️⃣Есть ли паразиты?
2️⃣Не Р.falciparum ли это? (если он - есть ли гаметоциты?)
3️⃣Есть стадии, подтверждающие 3 остальных вида?
4️⃣Какой вид?

Подробнее ⬇️

#мазок #малярия