#تکنیک

✅آنالیز موقعیت چرخه سلولی در پستانداران✅

💥Analysis of Cell Cycle Position in Mammalian Cells💥

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک

✅فیلم آموزشی استخراج DNA از خون✅

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک

✅ نحوه لیوفیلیزه کردن✅

💥Lyophilization💥

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک

💠استراتژی‌های مطالعه میانکنش‌های پروتئین - پروتئین💠

💥Strategies for Studying Protein-Protein Interactions💥

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک

✅ساختار برخی از فلوئورفورهای غیرذاتی (مولکولهای نشان‌دار شده رنگ با فلورسانس) ✅

💥Structures of some extrinsic fluorophores. Fura-2 is a fluorescent chelator for divalent and higher valent metal ions💥

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک
#PNS

✅غربالگری پیش‌ از تولد آنیوپلوئیدی‌ها✅

💥Prenatal Aneuploidy Screening💥

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک

✅آموزش کامل استخراج RNA و سنتز cDNA✅

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک

✅ آموزش انواع مختلف‌ روش‌های PCR ✅

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک #ویروس_شناسی

✅روش‌های تشخیص عفونت‌های ویروسی✅

💥Methods for Diagnosis of Viral Infection💥

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸

#تکنیک #الایز

💠الایزای غیر مستقیم (Indirect ELISA): معرفی، مراحل، مزایا و پروتکل💠
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
✔️الایزای غیر مستقیم یک الایزای دو مرحله‌ای است که شامل دو فرآیند اتصال آنتی‌بادی اولیه و آنتی‌بادی ثانویه نشان‌دار می‌باشد. آنتی‌بادی اولیه با آنتی‌ژن و سپس با آنتی‌بادی ثانویه، انکوبه می‌شود.

✔️با این حال، این امر ممکن است به دلیل واکنش متقاطع که آنتی‌بادی ثانویه می‌تواند ایجاد کند، به سیگنال‌های غیر اختصاصی منجر شود. در تست الایزای غیر مستقیم، آنتی‌بادی نمونه بین آنتی‌ژن که روی پلیت (Plate) را پوشانده و یک مزدوج گلوبولین ضد گونه با برچسب آنزیمی، قرار می‎گیرد. افزودن یک شناساگر کروموژنیک (Chromogenic) سوبسترای آنزیمی باعث ایجاد رنگ می‌شود.

✔️این رنگ با مقدار آنتی‌بادی نمونه متصل شده، نسبت مستقیم دارد. هر چه آنتی‌بادی در نمونه بیشتر باشد، شدت رنگ در چاهک‌های تست قوی‌تر است. این فرمت از الایزای غیر مستقیم برای تعیین سطح آنتی‌بادی کل در نمونه‌ها مناسب است.
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
✔️الایزای غیر مستقیم برای تخمین کمی آنتی‌بادی‌ها در سرم و سایر مایعات بدن استفاده می‌شود. در این روش، نمونه‌ها به چاهک‌های پلیت میکروتیتر (Microtiter) پوشانده شده با آنتی‌ژن که قرار است آنتی‌بادی‌های اختصاصی روی آن‌‌ها شناسایی شوند، اضافه می‌شوند. پس از یک دوره انکوباسیون، چاهک‌ها شسته می‌شوند.

✔️اگر آنتی‌بادی در نمونه وجود داشته باشد، کمپلکس آنتی‌ژن- آنتی‌بادی تشکیل می‌شود و با شستن از بین نمی‌رود. از طرف دیگر، اگر آنتی‌بادی خاصی در نمونه وجود نداشته باشد، تشکیل کمپلکسی هم وجود نخواهد داشت. سپس یک آنتی‌بادی ضد ایزوتایپ (Anti-isotype) کونژوگه شده (Conjugated) با یک آنزیم، اضافه شده و انکوبه می‌شود. پس از یک مرحله شستشوی دیگر، یک سوبسترا برای این آنزیم اضافه می‌شود.

✔️اگر در مرحله اولیه، تشکیل کمپلکس وجود داشته باشد، آنتی‌بادی ضد ایزوتایپ ثانویه به آنتی‌بادی اولیه متصل می‌شود و یک واکنش کروموژنیک بین آنزیم و سوبسترا وجود خواهد داشت. با اندازه‌گیری مقادیر چگالی نوری چاهک‌ها، پس از افزودن محلول متوقف کننده (Stop solution) برای توقف واکنش کروموژنیک، می‌توان مقدار کمپلکس آنتی‌ژن- آنتی‌بادی تشکیل‌شده در مرحله اول را تعیین کرد.
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
◀️مراحل/ فرایند الایزای غیر مستقیم

1️⃣پلیت‌های میکروول (Micro-well plate) با آنتی‌ژن انکوبه می‌شوند، سپس شسته شده و با BSA مسدود می‌شوند.
2️⃣نمونه‌های حاوی آنتی‌بادی اضافه شده و شسته می‌شوند.
3️⃣آنتی‌بادی ثانویه متصل به آنزیم اضافه شده و شسته می‌شود.
4️⃣یک سوبسترا اضافه می‌شود و آنزیم‌های روی آنتی‌بادی یک سیگنال کروموژنیک یا فلورسنت ایجاد می‌کنند.

◀️مزایای الایزای غیر مستقیم

1️⃣حساسیت بالا: بیش از یک آنتی‌بادی نشان‌دار شده به هر مولکول آنتی‌ژن متصل است.
2️⃣انعطاف‌پذیری: آنتی‌بادی‌های تشخیص اولیه مختلف را می‌توان با یک آنتی‌بادی ثانویه نشان‌دار منفرد استفاده کرد.
3️⃣صرفه جویی در هزینه: آنتی‌بادی‌های نشان‌دار کمتری مورد نیاز است.
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬

#تکنیک #الایز
ادامه

◀️پروتکل الایزای غیر مستقیم
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
1️⃣پلیت میکروتیتر را با آنتی‌ژن بپوشانید: 50 میکرولیتر محلول آنتی‌ژن (شناساگر پوشش) را در چاهک‌های پلیت میکروتیتر پخش کنید.
2️⃣پلیت‌های پوشش داده شده را در پوشش پلاستیکی بپیچید تا غیر قابل نفوذ گردد و سپس به مدت 2 ساعت در دمای 37 درجه سانتی‌گراد در انکوباتور، آن‌ها را انکوبه کنید.
3️⃣پس از انکوباسیون، پلیت میکروتیتر را باز کرده و محلول را در یک ظرف بریزید.
4️⃣مرحله شستشو: محلول پوششی را بردارید و با پر کردن چاهک‌ها با 200 میکرولیتر PBS، پلیت را دو بار بشویید. محلول‌ها یا شستشوها با پیپت کردن (Pipetting) حذف می‌شوند. قطرات باقیمانده با کشیدن ملایم پلیت روی یک حوله کاغذی پاک می‌شوند.
5️⃣مرحله مسدود کردن: با افزودن 200 میکرولیتر بافر مسدود کننده، محل‌های اتصال پروتئین باقی‌مانده در چاهک‌های پوشش داده شده را مسدود کنید و 30 دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
6️⃣محلول را دور بریزید و مرحله شستشو را انجام دهید. میکروپلیت را به آرامی روی حوله کاغذی بکشید.
7️⃣ 50 میکرولیتر محلول آنتی‌بادی را با استفاده از میکروپیپت (Micropipette) از ویال به چاهک اضافه کنید.
8️⃣پلیت را در پلاستیک بپیچید و به مدت 2 ساعت در دمای اتاق انکوبه کنید. مایع را دور بریزید و کف پلیت را با کاغذ جاذب خشک به آرامی پاک کنید.
9️⃣مرحله شستشو را تکرار کنید
🔟مرحله مسدود کردن را تکرار کنید.
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
1️⃣1️⃣مرحله شستشو را تکرار کنید.
2️⃣1️⃣ 50 میکرولیتر شناساگر آنتی‌بادی ثانویه را به چاهک‌ها اضافه کنید.
3️⃣1️⃣پلیت میکروتیتر را در پوشش پلاستیکی بپیچید و 2 ساعت در دمای اتاق انکوبه کنید.
4️⃣1️⃣مرحله شستشو را تکرار کنید.
5️⃣1️⃣ 75 میکرولیتر محلول سوبسترا را از ویال به چاهک‌های روی پلیت‌های میکروتیتر اضافه کنید.
6️⃣1️⃣پلیت‌های میکروتیتر را در پوشش پلاستیکی بپیچید و به مدت 1 ساعت در دمای اتاق انکوبه کنید.
7️⃣1️⃣ 25 میکرولیتر محلول متوقف کننده (NaOH5 مولار) را از ویال به چاهک‌های روی پلیت‌های میکروتیتر اضافه کنید.
8️⃣1️⃣جهت استفاده از یک دستگاه میکروتیتر پلیت ریدر (Micro titer plate reader) برای اندازه‌گیری هیدرولیز NPP، از یک فیلتر 405 نانومتری استفاده کنید.

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬