🔬انواع مختلف Fixation بافت🔬
🔸 تثبیت با Zenker:
تثبیت Zenker حاوی مخلوطی از فرمالدهید، دی کرومات پتاسیم و کلرید مرکوریک است.
این تثبیتکننده برای حفظ گلیکوژن و برخی اجزا بافتی مرتبط با بافت همبند مناسب است، اما ممکن است باعث ایجاد آرتیفکتهای رنگی شود و به دلیل مواد سمی که در ترکیب وجود دارد، اکنون به طور معمول استفاده نمیشود.
🔹 تثبیت با Glutaraldehyde:
گلوتارآلدهید تثبیتکنندهای است که به طور اصلی برای میکروسکوپ الکترونی استفاده میشود.
این تثبیتکننده حفظ عالی از ساختار اولتراسلولی را فراهم میکند، اما برای هیستولوژی معمولی مناسب نیست زیرا میتواند باعث سفت شدن بافت و محدودیت در Downstream processing شود.
🔸 تثبیت با Bouin:
این تثبیتکننده از اسید پیکریک، فرمالدهید و اسید استیک تشکیل شده است.
این تثبیتکننده حفظ خوبی از بافتها فراهم میکند، به ویژه برای رنگآمیزی با تریکروم و برخی از رنگهای ویژه.
با این حال، ممکن است باعث ایجاد آرتیفکتها شود و ممکن است برای همه بافتها مناسب نباشد.
🔹 سکشن بخشهای منجمد:
تا به اینجا همه روش های نامبرده روشی از فیکس شیمیایی بودند اما میتوان به جای استفاده از فیکسکنندههای شیمیایی با روش های فیزیکی فیکس کرد اگرچه معمول نیستند.
بافتها به سرعت منجمد و در حالی که منجمد هستند سکشن میشوند. این روش به ویژه برای تشخیص در حین جراحی مفید است و نتایج فوری را ارائه میدهد. با این حال، ممکن است ساختارهای سلولی را به خوبی حفظ نکند مانند تثبیت با فرمالین.
🔰 انتخاب روش تثبیت بستگی به نوع بافت مشخص، اهداف تحقیقاتی و نیازهای دیگر دارد. تثبیت های مختلف میتواند باعث تغییرات در مورفولوژی بافت و تأثیر بر نتایج بررسی هیستولوژیک و روشهای رنگآمیزی شود. بنابراین انتخاب دقیق روش فیکس مناسب برای هر کاربرد هیستولوژیک بسیار حائز اهمیت است.
#بافت_شناسی
#Fixation
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
🔸 تثبیت با Zenker:
تثبیت Zenker حاوی مخلوطی از فرمالدهید، دی کرومات پتاسیم و کلرید مرکوریک است.
این تثبیتکننده برای حفظ گلیکوژن و برخی اجزا بافتی مرتبط با بافت همبند مناسب است، اما ممکن است باعث ایجاد آرتیفکتهای رنگی شود و به دلیل مواد سمی که در ترکیب وجود دارد، اکنون به طور معمول استفاده نمیشود.
🔹 تثبیت با Glutaraldehyde:
گلوتارآلدهید تثبیتکنندهای است که به طور اصلی برای میکروسکوپ الکترونی استفاده میشود.
این تثبیتکننده حفظ عالی از ساختار اولتراسلولی را فراهم میکند، اما برای هیستولوژی معمولی مناسب نیست زیرا میتواند باعث سفت شدن بافت و محدودیت در Downstream processing شود.
🔸 تثبیت با Bouin:
این تثبیتکننده از اسید پیکریک، فرمالدهید و اسید استیک تشکیل شده است.
این تثبیتکننده حفظ خوبی از بافتها فراهم میکند، به ویژه برای رنگآمیزی با تریکروم و برخی از رنگهای ویژه.
با این حال، ممکن است باعث ایجاد آرتیفکتها شود و ممکن است برای همه بافتها مناسب نباشد.
🔹 سکشن بخشهای منجمد:
تا به اینجا همه روش های نامبرده روشی از فیکس شیمیایی بودند اما میتوان به جای استفاده از فیکسکنندههای شیمیایی با روش های فیزیکی فیکس کرد اگرچه معمول نیستند.
بافتها به سرعت منجمد و در حالی که منجمد هستند سکشن میشوند. این روش به ویژه برای تشخیص در حین جراحی مفید است و نتایج فوری را ارائه میدهد. با این حال، ممکن است ساختارهای سلولی را به خوبی حفظ نکند مانند تثبیت با فرمالین.
🔰 انتخاب روش تثبیت بستگی به نوع بافت مشخص، اهداف تحقیقاتی و نیازهای دیگر دارد. تثبیت های مختلف میتواند باعث تغییرات در مورفولوژی بافت و تأثیر بر نتایج بررسی هیستولوژیک و روشهای رنگآمیزی شود. بنابراین انتخاب دقیق روش فیکس مناسب برای هر کاربرد هیستولوژیک بسیار حائز اهمیت است.
#بافت_شناسی
#Fixation
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
👍9👏2
🔬انواع روش های رنگ آمیزی بافت🔬
✅در هیستولوژی از چندین نوع تکنیک رنگآمیزی برای افزایش قابلیت رؤیت و بررسی ساختارهای سلولی و بافتی استفاده میشود.
برخی از این تکنیک ها:
🟠 رنگآمیزی هماتوکسیلین و ائوزین (H&E):
این تکنیک رنگآمیزی، بیشترین استفاده را در هیستولوژی دارد.
هماتوکسیلین، هستهها را آبی-بنفش و ائوزین، سیتوپلاسم و ماتریکس خارج سلولی را صورتی میکند.
🟡 رنگآمیزی پریودیک اسید-شیف (PAS):
این تکنیک برای شناسایی کربوهیدراتها مانند گلیکوژن، گلیکوپروتئین و پروتئوگلیکان استفاده میشود و آنها را به رنگ ارغوانی میآمیزد.
🔵 رنگآمیزی تریکروم ماسون:
این روش رشته های کلاژن (آبی)، فیبرهای عضلانی، گلبول های قرمز و کراتین بافتی (قرمز) و هسته سلول ها (سیاه) رنگ آمیزی می شوند.
⚪️ رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی (IHC):
این تکنیک شامل استفاده از آنتیبادیها برای شناسایی پروتئینها یا آنتیژنهای خاص در بافتها است. آنتیبادیها با نشانگرهای رنگی مانند رنگ آمیزی فلورسنت یا آنزیم نشان دار میشوند که واکنش، رنگ قابل رؤیتی ایجاد میکند.
#بافت_شناسی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
✅در هیستولوژی از چندین نوع تکنیک رنگآمیزی برای افزایش قابلیت رؤیت و بررسی ساختارهای سلولی و بافتی استفاده میشود.
برخی از این تکنیک ها:
🟠 رنگآمیزی هماتوکسیلین و ائوزین (H&E):
این تکنیک رنگآمیزی، بیشترین استفاده را در هیستولوژی دارد.
هماتوکسیلین، هستهها را آبی-بنفش و ائوزین، سیتوپلاسم و ماتریکس خارج سلولی را صورتی میکند.
🟡 رنگآمیزی پریودیک اسید-شیف (PAS):
این تکنیک برای شناسایی کربوهیدراتها مانند گلیکوژن، گلیکوپروتئین و پروتئوگلیکان استفاده میشود و آنها را به رنگ ارغوانی میآمیزد.
🔵 رنگآمیزی تریکروم ماسون:
این روش رشته های کلاژن (آبی)، فیبرهای عضلانی، گلبول های قرمز و کراتین بافتی (قرمز) و هسته سلول ها (سیاه) رنگ آمیزی می شوند.
⚪️ رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی (IHC):
این تکنیک شامل استفاده از آنتیبادیها برای شناسایی پروتئینها یا آنتیژنهای خاص در بافتها است. آنتیبادیها با نشانگرهای رنگی مانند رنگ آمیزی فلورسنت یا آنزیم نشان دار میشوند که واکنش، رنگ قابل رؤیتی ایجاد میکند.
#بافت_شناسی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
👍9❤4👏2
📣 هوش مصنوعی حتی به رنگآمیزی بافت هم رحم نکرد 📣
✅محققان دانشگاه فنلاند، تورکو و تامپره یک روش مبتنی بر هوش مصنوعی را برای رنگآمیزی مجازی نمونههای هیستوپاتولوژیک توسعه دادهاند.
🔺 رنگ آمیزی شیمیایی سنگ بنای مطالعه هیستوپاتولوژی برای بیش از یک قرن بوده است. رنگآمیزی شیمیایی باعث میشود که مورفولوژی بخشهای بافت تقریباً شفاف و کم کنتراست قابل مشاهده باشد.
بدون آن، تجزیه و تحلیل مورفولوژی بافت برای بینایی انسان تقریبا غیرممکن است. رنگآمیزی شیمیایی برگشتناپذیر است و در بیشتر موارد، از استفاده از همان نمونه برای آزمایشها یا اندازهگیریهای دیگر جلوگیری میکند.
▪️هوش مصنوعی توسعهیافته در این مطالعه تصاویری کامپیوتری تولید میکند که بسیار شبیه به تصاویر تولید شده توسط فرآیند رنگآمیزی شیمیایی واقعی است.سپس می توان از این تصویر تقریباً رنگ آمیزی شده برای بررسی مورفولوژی بافت ها استفاده کرد.
▪️رنگآمیزی مجازی هم بار شیمیایی و هم کار دستی مورد نیاز برای پردازش نمونه را کاهش میدهد و همچنین استفاده از بافت را برای مقاصدی غیر از خود رنگآمیزی امکانپذیر میسازد.
▪️نقطه قوت روش رنگ آمیزی مجازی پیشنهادی این است که به سخت افزار یا زیرساخت خاصی فراتر از یک میکروسکوپ نوری معمولی و یک کامپیوتر مناسب نیاز ندارد.
🔻 «نتایج بسیار قابل اجرا هستند. موضوعات زیادی برای تحقیقات بعدی وجود دارد و روشهای محاسباتی هنوز قابل بهبود هستند. با این حال، ما میتوانیم چندین حوزه کاربردی را تصور کنیم که در آن رنگآمیزی مجازی میتواند تأثیر عمدهای در هیستوپاتولوژی داشته باشد.»
منبع:
Researchers Developed an AI-Based Method to Replace Chemical Staining of Tissue
#خبر
#هوش_مصنوعی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
✅محققان دانشگاه فنلاند، تورکو و تامپره یک روش مبتنی بر هوش مصنوعی را برای رنگآمیزی مجازی نمونههای هیستوپاتولوژیک توسعه دادهاند.
🔺 رنگ آمیزی شیمیایی سنگ بنای مطالعه هیستوپاتولوژی برای بیش از یک قرن بوده است. رنگآمیزی شیمیایی باعث میشود که مورفولوژی بخشهای بافت تقریباً شفاف و کم کنتراست قابل مشاهده باشد.
بدون آن، تجزیه و تحلیل مورفولوژی بافت برای بینایی انسان تقریبا غیرممکن است. رنگآمیزی شیمیایی برگشتناپذیر است و در بیشتر موارد، از استفاده از همان نمونه برای آزمایشها یا اندازهگیریهای دیگر جلوگیری میکند.
▪️هوش مصنوعی توسعهیافته در این مطالعه تصاویری کامپیوتری تولید میکند که بسیار شبیه به تصاویر تولید شده توسط فرآیند رنگآمیزی شیمیایی واقعی است.سپس می توان از این تصویر تقریباً رنگ آمیزی شده برای بررسی مورفولوژی بافت ها استفاده کرد.
▪️رنگآمیزی مجازی هم بار شیمیایی و هم کار دستی مورد نیاز برای پردازش نمونه را کاهش میدهد و همچنین استفاده از بافت را برای مقاصدی غیر از خود رنگآمیزی امکانپذیر میسازد.
▪️نقطه قوت روش رنگ آمیزی مجازی پیشنهادی این است که به سخت افزار یا زیرساخت خاصی فراتر از یک میکروسکوپ نوری معمولی و یک کامپیوتر مناسب نیاز ندارد.
🔻 «نتایج بسیار قابل اجرا هستند. موضوعات زیادی برای تحقیقات بعدی وجود دارد و روشهای محاسباتی هنوز قابل بهبود هستند. با این حال، ما میتوانیم چندین حوزه کاربردی را تصور کنیم که در آن رنگآمیزی مجازی میتواند تأثیر عمدهای در هیستوپاتولوژی داشته باشد.»
منبع:
Researchers Developed an AI-Based Method to Replace Chemical Staining of Tissue
#خبر
#هوش_مصنوعی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
👍8❤4👌2💯1
🔬انواع روش های رنگ آمیزی بافت🔬
✅ادامه روش های رنگ آمیزی:
🟣 رنگ آمیزی گیمسا:
این تکنیک رنگ آمیزی، برای نمایش سلول های خونی، انگل مالاریا و هلیکو باکتر پیلوری استفاده می شود. هسته سلول ها را آبی-بنفش و سیتوپلاسم سلول ها را صورتی رنگ می کند. و نیز امکان مشاهده میکروارگانیسم ها را فراهم می آورد.
🟤 رنگآمیزی گوموری منتامین سیلور (GMS):
این تکنیک رنگآمیزی برای دیدن ساختار های قارچی و سایر ارگانیسم های دارای دیواره سلولی حاوی کربوهیدرات استفاده میشود. این ساختار ها به رنگ قهوه ای تیره یا سیاه در می آیند.
🔴 رنگآمیزی red oil o:
این روش رنگآمیزی برای شناسایی لیپیدها مانند قطرات چربی در بافت چربی استفاده میشود و آنها را به رنگ قرمز آمیزش میدهد.
🟢 رنگآمیزی تولوئیدین بلو:
این تکنیک رنگآمیزی برای دیدن سلولهای ماستوسیت و اجزای اسیدی بافت استفاده میشود. اسیدنوکلئیک ها را به رنگ آبی و مخاط و غضروف را به رنگ بنفش میآمیزد.
#بافت_شناسی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
✅ادامه روش های رنگ آمیزی:
🟣 رنگ آمیزی گیمسا:
این تکنیک رنگ آمیزی، برای نمایش سلول های خونی، انگل مالاریا و هلیکو باکتر پیلوری استفاده می شود. هسته سلول ها را آبی-بنفش و سیتوپلاسم سلول ها را صورتی رنگ می کند. و نیز امکان مشاهده میکروارگانیسم ها را فراهم می آورد.
🟤 رنگآمیزی گوموری منتامین سیلور (GMS):
این تکنیک رنگآمیزی برای دیدن ساختار های قارچی و سایر ارگانیسم های دارای دیواره سلولی حاوی کربوهیدرات استفاده میشود. این ساختار ها به رنگ قهوه ای تیره یا سیاه در می آیند.
🔴 رنگآمیزی red oil o:
این روش رنگآمیزی برای شناسایی لیپیدها مانند قطرات چربی در بافت چربی استفاده میشود و آنها را به رنگ قرمز آمیزش میدهد.
🟢 رنگآمیزی تولوئیدین بلو:
این تکنیک رنگآمیزی برای دیدن سلولهای ماستوسیت و اجزای اسیدی بافت استفاده میشود. اسیدنوکلئیک ها را به رنگ آبی و مخاط و غضروف را به رنگ بنفش میآمیزد.
#بافت_شناسی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
👍7🔥4💯3
🔬تست های مولکولی🔬
✅ تستهای مولکولی نوعی تست تشخیصی هستند که جزئیات و مواد ژنتیکی مانند DNA یا RNA را شناسایی و تجزیه و تحلیل میکنند تا نشانگرهای ژنتیکی خاص یا جهشها را شناسایی کنند.
این تستها به طور معمول در حوزههای مختلف از جمله پزشکی، پزشکی قانونی و تحقیقات استفاده میشوند.
🔰 آن ها با ارائه روشهای دقیق و حساستر برای شناسایی ناهنجاریهای ژنتیکی، شناسایی عوامل عفونی و پیشبینی خطر بیماری، حوزه تشخیص را به طور اساسی تغییر دادهاند.
و همچنین نقش حیاتی در پزشکی شخصیسازی شده(personalized) ایفا کردهاند و به ارائه درمانهای هدفمند بر اساس پروفایل ژنتیکی فرد کمک میکنند.
#تست_مولکولی
#مفاهیم_پایه
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
✅ تستهای مولکولی نوعی تست تشخیصی هستند که جزئیات و مواد ژنتیکی مانند DNA یا RNA را شناسایی و تجزیه و تحلیل میکنند تا نشانگرهای ژنتیکی خاص یا جهشها را شناسایی کنند.
این تستها به طور معمول در حوزههای مختلف از جمله پزشکی، پزشکی قانونی و تحقیقات استفاده میشوند.
🔰 آن ها با ارائه روشهای دقیق و حساستر برای شناسایی ناهنجاریهای ژنتیکی، شناسایی عوامل عفونی و پیشبینی خطر بیماری، حوزه تشخیص را به طور اساسی تغییر دادهاند.
و همچنین نقش حیاتی در پزشکی شخصیسازی شده(personalized) ایفا کردهاند و به ارائه درمانهای هدفمند بر اساس پروفایل ژنتیکی فرد کمک میکنند.
#تست_مولکولی
#مفاهیم_پایه
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
👍6👏3💯3❤1
🔬استخراج DNA🔬
✅استخراج DNA فرآیند جداسازی DNA از سلولها و بافت ها برای تجزیه و تحلیل بیشتر است. این مرحله در فرآیندهایی چون PCR، توالی گیری DNA و آزمایش ژنتیک حائز اهمیت است.
🟡 براساس منبع DNA (مانند خون، بافت، سلول)و کاربردهای مورد نظر، پروتکلها و کیتهای مختلفی برای استخراج DNA وجود دارد.
انتخاب روش استخراج بر اساس عواملی مانند اندازه نمونه، نیازهای خلوص و وجود مهارکنندهها متغیر می باشد.
🟣مراحل کلیدی استخراج DNA:
1⃣ لیز سلول:
این مرحله شامل شکستن غشای سلول و پوسته هسته ای برای آزادسازی DNA است.روشهای مختلفی برای لیز سلول استفاده می شود؛ مانند خرد کردن مکانیکی، هضم آنزیمی یا استفاده از detergent.
2⃣ تصفیه DNA:
این مرحله به معنای جداسازی DNA از سایر اجزای سلولی مانند پروتئینها، RNA و لیپیدها است. روشهای مختلفی برای تصفیه DNA وجود دارد مانند استفاده از فنل-کلروفرم.
3⃣ رسوب DNA:
این مرحله شامل افزودن یک محلول نمک (مانند استات سدیم) و الکل (مانند اتانول) به محلول DNA است. نمک و الکل باعث متمرکز شدن مولکولهای DNA و تشکیل رسوب قابل مشاهده میشوند.
4⃣ روانسازی DNA:
رسوب DNA با یک بافر شسته میشود تا آلودگی ها یا نمک باقی مانده حذف شوند.در نهایت، DNA در یک بافر مناسب یا آب برای ذخیره سازی یا تجزیه و تحلیل بیشتر روان میشود.
#تست_مولکولی
#استخراج_DNA
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
✅استخراج DNA فرآیند جداسازی DNA از سلولها و بافت ها برای تجزیه و تحلیل بیشتر است. این مرحله در فرآیندهایی چون PCR، توالی گیری DNA و آزمایش ژنتیک حائز اهمیت است.
🟡 براساس منبع DNA (مانند خون، بافت، سلول)و کاربردهای مورد نظر، پروتکلها و کیتهای مختلفی برای استخراج DNA وجود دارد.
انتخاب روش استخراج بر اساس عواملی مانند اندازه نمونه، نیازهای خلوص و وجود مهارکنندهها متغیر می باشد.
🟣مراحل کلیدی استخراج DNA:
1⃣ لیز سلول:
این مرحله شامل شکستن غشای سلول و پوسته هسته ای برای آزادسازی DNA است.روشهای مختلفی برای لیز سلول استفاده می شود؛ مانند خرد کردن مکانیکی، هضم آنزیمی یا استفاده از detergent.
2⃣ تصفیه DNA:
این مرحله به معنای جداسازی DNA از سایر اجزای سلولی مانند پروتئینها، RNA و لیپیدها است. روشهای مختلفی برای تصفیه DNA وجود دارد مانند استفاده از فنل-کلروفرم.
3⃣ رسوب DNA:
این مرحله شامل افزودن یک محلول نمک (مانند استات سدیم) و الکل (مانند اتانول) به محلول DNA است. نمک و الکل باعث متمرکز شدن مولکولهای DNA و تشکیل رسوب قابل مشاهده میشوند.
4⃣ روانسازی DNA:
رسوب DNA با یک بافر شسته میشود تا آلودگی ها یا نمک باقی مانده حذف شوند.در نهایت، DNA در یک بافر مناسب یا آب برای ذخیره سازی یا تجزیه و تحلیل بیشتر روان میشود.
#تست_مولکولی
#استخراج_DNA
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
👍9💯3👌2
➖➖➖➖➖➖➖➖➖➖➖➖➖
#مروری_بر_مطالب
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍8❤4💯1
🔬استخراج RNA🔬
✔️ استخراج RNA فرآیندی است شامل جداسازی و تصفیه مولکولهای RNA از نمونههای زیستی.
مولکول RNA یا اسید ریبونوکلئیک، مولکولی حیاتی است که در فرآیندهای سلولی مختلف مانند بیان ژن و سنتز پروتئین نقش دارد.
🔵 چندین روش استخراج RNA وجود دارد، مانند استخراج فنل-کلروفرم، تصفیه مبتنی بر ستون و استخراج مبتنی بر مغناطیس.
این روش ها شامل استفاده از بافرها، حلال های آلی و مراحل مرکز گردانی برای جداسازی انتخابی RNA هستند.
🟠 برای استخراج RNA نمی توان از شیوه های استخراج DNA استفاده کرد؛ زیرا ضمن تفاوت ساختار و تعداد رشته های این دو مولکول، DNA نسبت به RNA حساسیت بالاتری در برابر عوامل محیطی چون دما و ریبونوکلئاز ها دارد.
بنابراین، شرایط استخراج هرکدام متفاوت است.
🟣 نکته حائز اهمیت آن است که در استخراج RNA، با توجه به نوع نمونه زیستی، کاربرد های مدنظر و حساسیت مولکول های RNA گوناگون، شیوه استخراج و پروتکل های آن متفاوت است.
#تست_مولکولی
#استخراج_RNA
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡
مولکول RNA یا اسید ریبونوکلئیک، مولکولی حیاتی است که در فرآیندهای سلولی مختلف مانند بیان ژن و سنتز پروتئین نقش دارد.
🔵 چندین روش استخراج RNA وجود دارد، مانند استخراج فنل-کلروفرم، تصفیه مبتنی بر ستون و استخراج مبتنی بر مغناطیس.
این روش ها شامل استفاده از بافرها، حلال های آلی و مراحل مرکز گردانی برای جداسازی انتخابی RNA هستند.
🟠 برای استخراج RNA نمی توان از شیوه های استخراج DNA استفاده کرد؛ زیرا ضمن تفاوت ساختار و تعداد رشته های این دو مولکول، DNA نسبت به RNA حساسیت بالاتری در برابر عوامل محیطی چون دما و ریبونوکلئاز ها دارد.
بنابراین، شرایط استخراج هرکدام متفاوت است.
🟣 نکته حائز اهمیت آن است که در استخراج RNA، با توجه به نوع نمونه زیستی، کاربرد های مدنظر و حساسیت مولکول های RNA گوناگون، شیوه استخراج و پروتکل های آن متفاوت است.
#تست_مولکولی
#استخراج_RNA
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍8👏1👌1💯1
نمونه زیستی مانند بافت و سلول جمع آوری می شوند.از آنجا که RNA توسط RNase قابل تجزیه است، بنابراین باید تماس با RNase را کاهش دهیم.
در این مرحله غشای سلولی تخریب شده و محتوای سلولی آزاد می شود.روش های مختلف لیز شامل: خرد کردن مکانیکی، هضم آنزیمی یا لیز شیمیایی.
برای جلوگیری از تجزیه،باید RNA استخراج شده را با اعمالی چون افزودن ترکیبات مهار کننده RNase یا سرمایش نمونه در نیتروژن مایع استحکام بخشید.
برای جداسازی RNA از سایر مولکول های سلولی مانند DNA و پروتئین، پردازش صورت می گیرد.
در یکی از روش ها، پس از افزودن کلروفرم به نمونه، آن را تحت شرایط ویژهای سانتریفیوژ کرده که در پایان، سه فاز تفکیکی (به ترتیب از پایین به بالا پروتئین، DNA و RNA) حاصل می شود.
سپس RNA به دست آمده برای حذف آلاینده های باقیمانده، مطابق روش های معمول تصفیه مانند رسوب الکل، تصفیه مبتنی بر ستون و یا تصفیه مبتنی بر مغناطیس،تصفیه می شود.
همچنین RNA تصفیه شده می تواند در دمای (-80 درجه سانتیگراد) برای بلند مدت ذخیره شود.
#تست_مولکولی
#استخراج_RNA
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍9💯2
در این مرحله مولکولهای دو رشتهای DNA الگو، به وسیله حرارت بالا (حدود 94 درجه سانتی گراد) از یکدیگر جدا شده و به مولکولهای تک رشتهای تبدیل میشوند.
در این مرحله کاهش دما صورت میگیرد تا پرایمرها بتوانند با توالیهای مکمل خودشان روی رشته های الگو جفت شوند. این دما بسته به نوع پرایمرها متغیر است که معمولا از دمای 55 درجه سانتی گراد استفاده می شود.
در این مرحله آنزیم Taq DNA پلیمراز، پرایمرها را روی DNA تک رشتهای امتداد میدهد تا DNA دو رشته ای جدید ساخته شود. درجه حرارت مورد استفاده در این بخش 72 درجه سانتی گراد میباشد.
#تست_مولکولی
#PCR
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍6❤4👌2
پرایمرهای خاص، منطقه مورد نظر از رشته DNA را فرا میگیرند و آنزیم DNA پلیمراز، پرایمرها را گسترش میدهد و نسخههای چندتایی از DNA هدف را ایجاد میکند. تقویت از طریق چرخههای گرمایش و سرد کردن در دستگاه سیکل ترمال اتفاق میافتد.
این فرآیند تعداد کپیهای دنباله DNA هدف را به صورت نمایی افزایش میدهد.
#تست_مولکولی
#RT_PCR
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍9❤3🔥2
#تست_مولکولی
#qPCR
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍6💯4❤1
انواع مختلفی از روشهای qPCR وجود دارد، از جمله:
#تست_مولکولی
#qPCR
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍6🔥2💯2
اندازه گیری مقدار RNA در یک نمونه
#تست_مولکولی
#Rt_qPCR
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻🔬 آکادمی تخصصی لبهاب
Please open Telegram to view this post
VIEW IN TELEGRAM
👍9💯3👌1