✋ ســلام و درود بر همــراهان آکادمـی تخصـصـــی "Lab Hub"🧪

💠 امروزه، یادگیری تکنیک‌های آزمایشگاهی بعنوان یک skill بسیار حیاتی، نه فقط برای دانشجویان رشته علوم‌آزمایشگاهی و بیوشیمی، بلکه برای تمامی دانشجویان و پژوهشگران دنیا حائز اهمیت می‌باشد.

💎 مجموعه لب‌هاب به عنوان قوی‌ترین آکادمی تخصصی در زمینه آموزش "تکنیک‌های آزمایشگاهی" برای دانشجویان علوم پزشکی سراسر ایران، برنامه های مدونی را ارائه خواهد کرد.

👈 دوره های آموزشی فوق‌العاده جامع و بشدت کاربردی جهت توانمندسازی دانش‌پذیران مجموعه لب‌هاب برگزارخواهدشد.

🙏 پس تمام‌قد همراه و یاور ما باشید
و ما را به دوستان خود معرفی نمائید.

#لب_هاب
#تکنیکهای_آزمایشگاهی

〰️〰️〰️〰️〰️〰️〰️〰️🔹🔸
🎓آکادمی تخصصی لب‌هاب
🧪@Lab_Hub_ir🌡

🔬بافت شناسی🔬

✅ بافت شناسی (Histology) مطالعه‌ی ساختار میکروسکوپیک بافت‌ها و سلول‌هاست.

🧪 این شاخه از آناتومی (میکروآناتومی) نقش اساسی در درک ترتیب، ترکیب و عملکرد انواع بافت‌ها در بدن انسان و سایر موجودات زنده دارد.
هیستولوژی به‌ویژه در پزشکی، زیست‌شناسی و پاتولوژی بسیار مهم است زیرا به تشخیص بیماری‌ها، درک فرآیندهای فیزیولوژیکی و انجام تحقیقات کمک می‌کند.

#بافت_شناسی
#مفاهیم_پایه
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬تهیه لام بافت شناسی🔬

✅مراحل این پروسه به ترتیب شامل:

🟠 تثبیت Fixation:
گام اول دریافت نمونه بافت است که ممکن است از یک بیوپسی یا ارگان باشد. بافت برای حفظ ساختارهای سلولی خود و جلوگیری از تبدیل به فساد نیاز به تثبیت دارد. روشن‌ترین ماده تثبیت‌کننده، فرمالین است که پروتئین‌های بافت را به یکدیگر متصل می‌کند.

🟡 آبگیری (Dehydration):
به علت اینکه 90% حجم نمونه را آب تشکیل داده است، این مرحله منجر به خارج شدن آب از نمونه میگردد ، تا امکان این که فضای آب تخلیه شده را با ماده سفت کننده جایگزین کنیم را فراهم نماید.
برای این کار از الکل هایی با درصد خلوص %70 و %80 و 90% و 100% استفاده میکنیم یعنی در واقع هر بار درصد خلوص الکل را افزایش میدهیم تا به تدریج آب از نمونه خارج و با الکل جایگزین شود.

🟢 شفاف سازی (Clearing):
در این مرحله نمونه را در محلول های حاوی حلال های آلی قرار میدهیم که باعث خارج شدن الکل میشود و این حلال‌ها به جای الکل در نمونه نفوذ میکنند معمول ترین حلال آلی مورد استفاده گزیلول هست.
(گزیلول حدواسط الکل و ماده سفت کننده (پارافین) میباشد.)

🔵 نفوذپذیری (Infilteration):
در این مرحله پارافین ذوب شده با دمای 52 الی 60 درجه سانتیگراد را روی نمونه میریزیم که دمای پارافین باعث تبخیر حلال آلی شده و پارافین که ماده سفت کننده ما هست جایگزین آن شده و داخل نمونه نفوذ میکند.
(برای میکروسکوپ های الکترونی به جای پارافین از رزین استفاده میشود.)

#بافت_شناسی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬تهیه لام بافت شناسی🔬

✅ادامه مراحل:

🟣 قالب‌گیری (Embedding):
نمونه آغشته شده با پارافین را در داخل قالبهای پر از پارافین مذاب قرار میدهیم و سپس ده دقیقه زمان میدهیم تا سرد شود و آماده‌ی مقطع گیری گردد.

🔴 آراستن (Trimming):
پارافین های اضافی قالب سرد شده را توسط تیغ جراحی برش میدهیم و
شکلی ذوزنقه مانند ایجاد میشود.

🔵 برش گیری (Sectioning):
قالب پارافینی حاوی نمونه را با دستگاهی به نام Microtome برش می دهیم که قادر است ورقه هایی به ضخامت 5 تا 10 میکرون ایجاد کند. سپس برش های ایجادشده را برروی لام گرم می گذاریم تا از بوجود آمدن چروک های احتمالی جلوگیری شود.

🟠 رنگ آمیزی (Staining):
از آنجایی که نمونه ها بدون رنگ اند و اگر لام را زیر میکروسکوپ قرار دهیم اجزای داخل و خارج سلول قابل مشاهده نیستند، باید نمونه ها را رنگ آمیزی کنیم تا بتوانیم قسمت های مختلف را از هم تشخیص بدهیم.
چون بیشتر رنگ های مورد استفاده در رنگ آمیزی محلول در آب هستند ،باید نمونه ها را پارافین‌ زدایی کنیم.
برای این کار ابتدا لام را حرارت میدهیم تا پارافین ذوب شود و سپس نمونه ها را در الکل و آب قرار میدهیم تا شفاف سازی انجام و رنگ آمیزی امکان پذیر شود. به این صورت که ابتدا با استفاده از گزیلُل پارافین را به صورت کامل خارج میکنیم و سپس با استفاده از الکل نزولی به نمونه ها آب می‌دهیم.

🟡 نصب (Mounting)
پس از رنگ آمیزی باید لام ها را حفظ کنیم. به این منظور لام ها را با لامل می پوشانیم.
لامل: صفحه ای شیشه ای که با چسب های مخصوص روی لام قرار گرفته و آن را می پوشاند تا لام حفظ شود، فرایندی که مانتینگ نام دارد.
با قرار گیری لامل روی لام اصطلاحا نمونه، مانت نامیده میشود.

#بافت_شناسی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬انواع مختلف Fixation بافت🔬

✅روش‌های مختلف تثبیت(Fixation) بافت برای حفظ ساختارهای سلولی و جلوگیری از تبدیل به فساد در هیستولوژی وجود دارد. هر روش مزایای خود را دارد و بر اساس نیازهای خاص تحقیق یا تحقیق تشخیصی انتخاب می‌شود.
در ادامه چندین روش مختلف تثبیت بافت آورده شده است:

🟧 تثبیت با فرمالین:
فرمالین، محلولی از گاز فرمالدهید در آب، معمول‌ترین تثبیت‌کننده در هیستولوژی است. این ماده سریعاً به بافت نفوذ می‌کند و با پروتئین‌ها متصل می‌شود، ساختارهای سلولی را پایدار می‌کند.
بافت‌های تثبیت‌شده با فرمالین با فرآیند هیستولوژی معمولی سازگاری دارند و ساختار مورفولوژیکی سلول‌ها را به خوبی حفظ می‌کنند که این ویژگی مناسب اهداف تشخیصی روتین است.

🟦 تثبیت با الکل:
اتانول یا ایزوپروپانول (الکل) می‌تواند به عنوان تثبیت‌کننده استفاده شود (به تنهایی یا در ترکیب با سایر تثبیت‌کننده‌ها).
تثبیت با الکل معمولاً برای نمونه‌های سیتولوژی (مانند تست پاپ) استفاده می‌شود، اما ممکن است به انقباض سلولی منجر شود و حفظ ناکافی برخی اجزا در مقایسه با تثبیت با فرمالین داشته باشد.

🟥 تثبیت با Carnoy:
تثبیت Carnoy ترکیبی از اتانول، کلروفرم و اسید استیک است. این ترکیب حفظ عالی از سلول‌ها و ساختارهای بافتی را فراهم می‌کند و معمولاً برای حفظ ساختارهای حساس مانند اتصالات سلولی و جزئیات هسته‌ای استفاده می‌شود. با این حال، ممکن است باعث سفت شدن و انقباض بافت شود.

ادامه دارد..

#بافت_شناسی
#Fixation
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬انواع مختلف Fixation بافت🔬

🔸 تثبیت با Zenker:
تثبیت Zenker حاوی مخلوطی از فرمالدهید، دی کرومات پتاسیم و کلرید مرکوریک است.
این تثبیت‌کننده برای حفظ گلیکوژن و برخی اجزا بافتی مرتبط با بافت همبند مناسب است، اما ممکن است باعث ایجاد آرتیفکت‌های رنگی شود و به دلیل مواد سمی که در ترکیب وجود دارد، اکنون به طور معمول استفاده نمی‌شود.

🔹 تثبیت با Glutaraldehyde:
گلوتارآلدهید تثبیت‌کننده‌ای است که به طور اصلی برای میکروسکوپ الکترونی استفاده می‌شود.
این تثبیت‌کننده حفظ عالی از ساختار اولتراسلولی را فراهم می‌کند، اما برای هیستولوژی معمولی مناسب نیست زیرا می‌تواند باعث سفت شدن بافت و محدودیت‌ در Downstream processing شود.

🔸 تثبیت‌ با Bouin:
این تثبیت‌کننده از اسید پیکریک، فرمالدهید و اسید استیک تشکیل شده است.
این تثبیت‌کننده حفظ خوبی از بافت‌ها فراهم می‌کند، به ویژه برای رنگ‌آمیزی با تریکروم و برخی از رنگ‌های ویژه.
با این حال، ممکن است باعث ایجاد آرتیفکت‌ها شود و ممکن است برای همه بافت‌ها مناسب نباشد.

🔹 سکشن بخش‌های منجمد:
تا به اینجا همه روش های نامبرده روشی از فیکس شیمیایی بودند اما میتوان به جای استفاده از فیکس‌کننده‌های شیمیایی با روش های فیزیکی فیکس کرد اگرچه معمول نیستند.
بافت‌ها به سرعت منجمد و در حالی که منجمد هستند سکشن می‌شوند. این روش به ویژه برای تشخیص در حین جراحی مفید است و نتایج فوری را ارائه می‌دهد. با این حال، ممکن است ساختارهای سلولی را به خوبی حفظ نکند مانند تثبیت با فرمالین.

🔰 انتخاب روش تثبیت بستگی به نوع بافت مشخص، اهداف تحقیقاتی و نیازهای دیگر دارد. تثبیت های مختلف می‌تواند باعث تغییرات در مورفولوژی بافت و تأثیر بر نتایج بررسی هیستولوژیک و روش‌های رنگ‌آمیزی شود. بنابراین انتخاب دقیق روش فیکس مناسب برای هر کاربرد هیستولوژیک بسیار حائز اهمیت است.

#بافت_شناسی
#Fixation
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬انواع روش های رنگ آمیزی بافت🔬

✅در هیستولوژی از چندین نوع تکنیک رنگ‌آمیزی برای افزایش قابلیت رؤیت و بررسی ساختارهای سلولی و بافتی استفاده می‌شود.
برخی از این تکنیک ها:

🟠 رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین (H&E):
این تکنیک رنگ‌آمیزی، بیشترین استفاده را در هیستولوژی دارد.
هماتوکسیلین، هسته‌ها را آبی-بنفش و ائوزین، سیتوپلاسم و ماتریکس خارج سلولی را صورتی می‌کند.

🟡 رنگ‌آمیزی پریودیک اسید-شیف (PAS):
این تکنیک برای شناسایی کربوهیدرات‌ها مانند گلیکوژن، گلیکوپروتئین و پروتئوگلیکان استفاده می‌شود و آنها را به رنگ ارغوانی می‌آمیزد.

🔵 رنگ‌آمیزی تریکروم ماسون:
این روش رشته های کلاژن (آبی)، فیبرهای عضلانی، گلبول های قرمز و کراتین بافتی (قرمز) و هسته سلول ها (سیاه) رنگ آمیزی می شوند.

⚪️ رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی (IHC):
این تکنیک شامل استفاده از آنتی‌بادی‌ها برای شناسایی پروتئین‌ها یا آنتی‌ژن‌های خاص در بافت‌ها است. آنتی‌بادی‌ها با نشانگرهای رنگی مانند رنگ آمیزی فلورسنت یا آنزیم نشان دار می‌شوند که واکنش، رنگ قابل رؤیتی ایجاد می‌کند.

#بافت_شناسی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

📣 هوش مصنوعی حتی به رنگ‌آمیزی بافت هم رحم نکرد 📣

✅محققان دانشگاه فنلاند، تورکو و تامپره یک روش مبتنی بر هوش مصنوعی را برای رنگ‌آمیزی مجازی نمونه‌های هیستوپاتولوژیک توسعه داده‌اند.

🔺 رنگ آمیزی شیمیایی سنگ بنای مطالعه هیستوپاتولوژی برای بیش از یک قرن بوده است. رنگ‌آمیزی شیمیایی باعث می‌شود که مورفولوژی بخش‌های بافت تقریباً شفاف و کم کنتراست قابل مشاهده باشد.
بدون آن، تجزیه و تحلیل مورفولوژی بافت برای بینایی انسان تقریبا غیرممکن است. رنگ‌آمیزی شیمیایی برگشت‌ناپذیر است و در بیشتر موارد، از استفاده از همان نمونه برای آزمایش‌ها یا اندازه‌گیری‌های دیگر جلوگیری می‌کند.

▪️هوش مصنوعی توسعه‌یافته در این مطالعه تصاویری کامپیوتری تولید می‌کند که بسیار شبیه به تصاویر تولید شده توسط فرآیند رنگ‌آمیزی شیمیایی واقعی است.سپس می توان از این تصویر تقریباً رنگ آمیزی شده برای بررسی مورفولوژی بافت ها استفاده کرد.

▪️رنگ‌آمیزی مجازی هم بار شیمیایی و هم کار دستی مورد نیاز برای پردازش نمونه را کاهش می‌دهد و همچنین استفاده از بافت را برای مقاصدی غیر از خود رنگ‌آمیزی امکان‌پذیر می‌سازد.

▪️نقطه قوت روش رنگ آمیزی مجازی پیشنهادی این است که به سخت افزار یا زیرساخت خاصی فراتر از یک میکروسکوپ نوری معمولی و یک کامپیوتر مناسب نیاز ندارد.

🔻 «نتایج بسیار قابل اجرا هستند. موضوعات زیادی برای تحقیقات بعدی وجود دارد و روش‌های محاسباتی هنوز قابل بهبود هستند. با این حال، ما می‌توانیم چندین حوزه کاربردی را تصور کنیم که در آن رنگ‌آمیزی مجازی می‌تواند تأثیر عمده‌ای در هیستوپاتولوژی داشته باشد.»

منبع:
Researchers Developed an AI-Based Method to Replace Chemical Staining of Tissue

#خبر
#هوش_مصنوعی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬انواع روش های رنگ آمیزی بافت🔬

✅ادامه روش های رنگ آمیزی:

🟣 رنگ آمیزی گیمسا:
این تکنیک رنگ آمیزی، برای نمایش سلول های خونی، انگل مالاریا و هلیکو باکتر پیلوری استفاده می شود. هسته سلول ها را آبی-بنفش و سیتوپلاسم سلول ها را صورتی رنگ می کند. و نیز امکان مشاهده میکروارگانیسم ها را فراهم می آورد.

🟤 رنگ‌آمیزی گوموری منتامین سیلور (GMS):
این تکنیک رنگ‌آمیزی برای دیدن ساختار های قارچی و سایر ارگانیسم های دارای دیواره سلولی حاوی کربوهیدرات استفاده می‌شود. این ساختار ها به رنگ قهوه ای تیره یا سیاه در می آیند.

🔴 رنگ‌آمیزی red oil o:
این روش رنگ‌آمیزی برای شناسایی لیپیدها مانند قطرات چربی در بافت چربی استفاده می‌شود و آنها را به رنگ قرمز آمیزش می‌دهد.

🟢 رنگ‌آمیزی تولوئیدین بلو:
این تکنیک رنگ‌آمیزی برای دیدن سلول‌های ماستوسیت و اجزای اسیدی بافت استفاده می‌شود. اسیدنوکلئیک ها را به رنگ آبی و مخاط و غضروف را به رنگ بنفش می‌آمیزد.

#بافت_شناسی
#رنگ_آمیزی
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬تست های مولکولی🔬

✅ تست‌های مولکولی نوعی تست تشخیصی هستند که جزئیات و مواد ژنتیکی مانند DNA یا RNA را شناسایی و تجزیه و تحلیل می‌کنند تا نشانگرهای ژنتیکی خاص یا جهش‌ها را شناسایی کنند.
این تست‌ها به طور معمول در حوزه‌های مختلف از جمله پزشکی، پزشکی قانونی و تحقیقات استفاده می‌شوند.

🔰 آن ها با ارائه روش‌های دقیق و حساس‌تر برای شناسایی ناهنجاری‌های ژنتیکی، شناسایی عوامل عفونی و پیش‌بینی خطر بیماری، حوزه تشخیص را به طور اساسی تغییر داده‌اند.
و همچنین نقش حیاتی در پزشکی شخصی‌سازی شده(personalized) ایفا کرده‌اند و به ارائه درمان‌های هدفمند بر اساس پروفایل ژنتیکی فرد کمک می‌کنند.

#تست_مولکولی
#مفاهیم_پایه
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡

🔬استخراج DNA🔬

✅استخراج DNA فرآیند جداسازی DNA از سلول‌ها و بافت ها برای تجزیه و تحلیل بیشتر است. این مرحله در فرآیندهایی چون PCR، توالی گیری DNA و آزمایش ژنتیک حائز اهمیت است.

🟡 براساس منبع DNA (مانند خون، بافت، سلول)و کاربردهای مورد نظر، پروتکل‌ها و کیت‌های مختلفی برای استخراج DNA وجود دارد.
انتخاب روش استخراج بر اساس عواملی مانند اندازه نمونه، نیازهای خلوص و وجود مهارکننده‌ها متغیر می باشد.

🟣مراحل کلیدی استخراج DNA:

1⃣ لیز سلول:
این مرحله شامل شکستن غشای سلول‌ و پوسته هسته ای برای آزادسازی DNA است.روش‌های مختلفی برای لیز سلول استفاده می شود؛ مانند خرد کردن مکانیکی، هضم آنزیمی یا استفاده از detergent.

2⃣ تصفیه DNA:
این مرحله به معنای جداسازی DNA از سایر اجزای سلولی مانند پروتئین‌ها، RNA و لیپیدها است. روش‌های مختلفی برای تصفیه DNA وجود دارد مانند استفاده از فنل-کلروفرم.

3⃣ رسوب DNA:
این مرحله شامل افزودن یک محلول نمک (مانند استات سدیم) و الکل (مانند اتانول) به محلول DNA است. نمک و الکل باعث متمرکز شدن مولکول‌های DNA و تشکیل رسوب قابل مشاهده می‌شوند.

4⃣ روان‌سازی DNA:
رسوب DNA با یک بافر شسته می‌شود تا آلودگی ها یا نمک باقی مانده حذف شوند.در نهایت، DNA در یک بافر مناسب یا آب برای ذخیره سازی یا تجزیه و تحلیل بیشتر روان می‌شود.

#تست_مولکولی
#استخراج_DNA
➿➿➿➿➿➿➿➿◽️◾️
🧑🏻‍🔬 آکادمی تخصصی لب‌هاب 🔬
🧪 @Lab_Hub_ir 🌡