سلام به همگى☺️

از امروز قرار هست كمى راجع به تكنيك ها و روش هاى آزمايشگاهى كه زياد باهاشون در آزمايشگاه سر و كار داريم هم مطالبى رو خدمتتون ارائه كنيم.

🔸در اولين موضوعِ اين هفته، مى پردازيم به: كروماتوگرافى (Chromatography) كه در همه آزمايشگاه هاى علوم پايه به خصوص بيولوژى و شيمى،به كار ميره.

🤔اما براى چه كارى؟!

🔸براى جداسازى اجزاى تشكيل دهنده ى يك مخلوط. يعنى با اين روش ميتونيم به خوبى اجزاى تشكيل دهنده ى مخلوط رو تحليل و بررسى كنيم.

🔸در كل ٤ دسته ميشن و اساس كار همه ى اون ها يكسانه؛

•كروماتوگرافى گازى GC
•كروماتوگرافى مايع
•كروماتوگرافى تبادل يونى
•كروماتوگرافى ميل تركيبى


امروز بيشتر راجع به كروماتوگرافى گازىGC كه خيلى زياد هم در رشتمون باهاش سروكار داريم رو توضيح ميديم.

🔸كروماتوگرافى گازى اولين بار در سال ١٩٥٢ براى جداسازى اسيد هاى چرب استفاده شد، اما همونطور كه پيش تر گفتيم،كار اصلى همه اون ها به عنوان متد تجزيه اى مناسب براى شناسايى و اندازه گيرى تركيباتِ.

🔺تركيباتى كه با اين تكنيك قابل اندازه گيرى هستن بايد فرار بوده و پايدارى دمايى بالايى داشته باشن


❓اما اساس كار چيه

مثل ساير دسته هاى كروماتوگرافى، اساس جداسازى در اين تكنيك بر مبناى فاز ساكن و فاز متحرك ( گاز بى اثر مثل هليوم،آرگون يا نيتروژن) هستش.در اين متد عموما از ستون هاى كپيلارى( كه عمدتا٦٠-٣٠متر طول و قطر بسيار كمى دارند)، به عنوان فاز ساكن استفاده ميشه.

🔸جداسازی ترکیبات برمبنای قدرت برهمکنش متفاوت ترکیبات نمونه با فاز ساکن صورت ميگیره به گونه ای که ترکیباتی از نمونه که برهمکنش قوی تری با فاز ساکن دارن به مدت طولانی تری در ستون کپیلاری باقی ميمونن و در نتیجه این ترکیبات با زمان بازداری طولانی تری از سایر ترکیبات نمونه جدا ميشن.


🔸مطابق با شکلى كه براى شما قرار داده شده، یک سیلندر گاز حامل به دستگاه کروماتوگرافی گازی متصل هست و وظیفه ی حمل نمونه ی تزریق شده به دستگاه را برعهده داره. وقتی نمونه ی مجهول (که به صورت محلوله) به محل تزریق(injector)دستگاه تزریق میشه، تحت تاثیر دمای محل تزریق سریعا تبخیر شده و به فرم گازی در میاد و همراه با گاز حامل در طول ستون کپیلاری به جلو رونده ميشه.در اطراف ستون کپیلاری محفظه ی دمایی (oven) قرار داره ودرجه حرارت لازم برای برهمکنش بیشتر بین فاز ساکن و ترکیبات نمونه را فراهم می كنه تا جداسازی بهتری صورت بگیره. یک آشکارساز در قسمت انتهایی ستون تعبیه شده تا غلظت ترکیبات خروجی از ستون رو اندازه گیری كنه؛ مبنای این اندازه گیری براساس یک نمونه ی استاندارد با غلظت مشخه.طورى که میزان ارتفاع یا سطح زیر پیک نمونه مجهول با ارتفاع یا سطح زیر پیک نمونه ی استانداردی که زمان بازداری یکسانی با نمونه ی مجهول داره سنجیده میشه و از این رو غلظت نمونه مجهول براساس غلظت نمونه ی استاندارد محاسبه و این اطلاعات به صورت گراف کروماتوگرام ثبت میشه.

#تکنیک
🆔@khustemcell

⚪️ منبع
https://www.britannica.com/science/chromatography

🔬میکروسکوپ


🔷 در ادامه #ابزاردان قرار هست تا با انواع میکروسکوپ ها و طرز کارشون بیشتر آشنا بشیم🤩

🔹برای شروع ميريم سراغ میکروسکوپ نوری و انواع اون🔬

🔹اكثر میکروسکوپ‌‌هایی که دانشجوها استفاده‌میکنن در گروه میکروسکوپ‌‌های نوری طبقه‌بندی می‌شن.در میکروسکوپ نوری، نور مرئی از داخل نمونه (نمونه بیولوژیکی) عبور می‌کنه و از طریق سیستم لنز شکسته می‌شه و به کاربر اين امکان رو میده تا تصویر رو با بزرگنمایی مشاهده كنه.

🔹میکروسکوپ های نوری در انواع مختلف ساخته ميشن:
•ساده •مرکب •استریو •زمینه روشن
•زمینه تاریک
•فلورسانس •فازکنتراست
•ماورابنفش

🔹میکروسکوپ‌های نوری ساده با یک لنز می‌تونن نمونه رو تا 300 برابر بزرگ كنن و قدرت تفكيك اون ها زیر 1 میکرومترِ (یک میکرومتر برابر با یک میلیونم متر است).از اين جهت قادر به دیدن برخی از باکتری‌ها هستیم.

در حالی که
🔹میکروسکوپ‌های نوری مرکب،می‌تونن نمونه رو تا 2000 برابر بزرگ تر کنن.و قدرت تفكيك و وضوحشون ممكنه تا حدود 0.2 ميكرومتر باشه.

🔹میکروسکوپ استریوStereoMicroscopy
نیز جهت مشاهده اجسام با بزرگنمایی اندک به كار ميره. در این نوع میکروسکوپ نور به جای عبور از خلال نمونه، به نمونه تابیده شده و انعکاس آن از عدسی عبور می کنه.

🔹میکروسکوپ زمینه روشنBright Field Microscopy
در این میکروسکوپ ساده‌ترین تکنیک نورپردازی به نمونه انجام ميشه.در میکروسکوپ زمینه روشن، نور از زیر به نمونه برخورد می‌کند و تصویر آن از بالا مشاهده میشه.در تصاویر حاصل از این میکروسکوپ، زمینه دارای نور سفید و نواحی متراکم نمونه، تیره دیده ميشه.

🔹میکروسکوپ زمینه تاریکDark Field Microscopy
در این نوع میکروسکوپ نور از منبع نوری فقط به کناره‌های نمونه برخورد می‌کنه.به همین دلیل نمونه به صورت روشن در زمینه تاریکی قابل مشاهدست و قدرت تفکیک این نوع میکروسکوپ از میکروسکوپ زمینه روشن بیشتر ِ و با استفاده از میکروسکوپ زمینه تاریک جزئیات بیشتری از نمونه قابل مشاهده می‌شه.

____Part1____

🔺منتظر ادامه ى مطالب درمورد میکروسکوپ ها در قسمت های بعدی ابزاردان باشید😀😎
🔺تصاوير رو هم حتما ببينيد تا با نمونه تصویر های ایجاد شده توسط این میکروسکوپ‌ها آشنا بشيد😇

#ابزاردان
🆔@khustemcell

◽️منبع:
1)https://microscope-microscope.org/microscope-info/microscope-buyers-guide/
2)https://compleatnaturalist.com/stereoscopes-vs-microscopes/
3)https://blog.faradars.org/%D9%85%DB%8C%DA%A9%D8%B1%D9%88%D8%B3%DA%A9%D9%88%D9%BE/

❇️ انجمن سلول های بنیادی دانشگاه خوارزمی و زیست فن برگزار میکند:

🧫 #کارگاه کشت سلول های بنیادی🧫

👩🏻‍🏫مدرس: سرکار خانم فاطمه صائبی

📆 زمان و ساعت برگزاری: ٢۶ آذرماه ساعت 18 تا 20

💳 هزینه‌ی دوره: تنها ٧٠ هزار تومان

🔖بهمراه اعطای مدرک معتبر به زبان انگلیسی از انجمن سلول های بنیادی دانشگاه خوارزمی

#رویداد_مجازی #وبینار

⚠️ ظرفیت محدود میباشد⚠️

⁉️جهت کسب اطلاعات بیشتر به آی دی زیر پیام دهید:
🆔 @Esmaeeli261
🆔 @sarrrrrrrrra
🔴 لینک ثبت نام:

🌐 https://zist-fan.ir/events/?p=4715

🆔 @zistfan_event‌
🆔 @khustemcell

🔺پروفسور داریوش فرهود

پژوهشگر و فعال در حوزه‌ی ژنتیک، روان شناسی، انسان شناسی و پزشکی است.
پروفسور فرهود به عنوان پدر علم ژنتیک ایران شناخته شده است.🧬
او عضو پیوسته فرهنگستان علوم پزشکی ایران و همچنین بنیانگذار و رئیس اولین کلینیک ژنتیک ایران است.

🌐وبینار اتحاد زیست شناسان ایران با پروفسور داریوش فرهود، چهره‌ی علمی ماندگار ایران
📆15 آذر 99
⏰ساعت 17
ثبت نام در لینک زیر 👇🏻

💊🧪تولید نسل جدیدی از ارگانوئیدهای روده انسانی بر روی تراشه

🔷در این قسمت از #سلول_درمانی با ارگانوئید های روده انسانی و تکنولوژی های مرتبط با اون آشنا مى شیم🤩

🔹پژوهشگران "موسسه پلی‌تکنیک فدرال لوزان"(EPFL) سوئیس، نمونه کوچيکی از روده انسان رو روی یه تراشه ابداع کردن که شباهت نزدیکی هم به نحوه شکل‌گیری و ترکیب سلولی روده کوچيک داره.شاید این تراشه بتونه به پیشرفت پزشکی شخصی‌سازی شده و بررسی دارو کمک کنه و حتی راه رو برای پرورش بافت‌ها و اندام‌های جدید در آزمایشگاه‌ها هموار كنه.

🔹 برای به وجود آوردن اندام‌واره‌ها معمولا از سلول‌هایی استفاده میكنن تا بافت‌ها و اندام‌های جدید رو شکل بدن.

❗️ولى روش‌های کنونی در تقلید از بافت‌های طبیعی انسان، محدوديت هايى دارن و پژوهشگرا هنوز نمی‌دونن که چطور به کنترل و هدایت حرکت و رشد سلول‌ها بپردازن.

🔹پژوهشگران موسسه پلی‌تکنیک فدرال لوزان در جدیدترین تلاش خود، از یك قالب استفاده کردن که با کمک لیزر درون هیدروژل و در یک کانال ریزسیال ایجاد شده و می‌تونه سلول‌های بنیادی رو برای داشتن آرایش بافتی مناسب شبیه به روده کوچيک،هدایت کنه.

▫️ قالب هیدروژل، ساختارهایی شبيه به ساختارهای موجود در روده به وجود مياره.

😯پژوهشگران در کمال شگفتی ديدن که سلول‌ها به محض رسیدن به ساختارهای ایجاد شده، بدون نیاز به راهنمایی به سازمان‌دهی خودشون پرداختن و به سلول‌هایی تبدیل شدن که در قسمت‌های خاصی از روده یافت میشن.

👈🏻شکل و ترکیب هیدروژل کافی بود که سلول‌ها را ارتقا بده تا مثل سلول‌های روده عمل کنن.

🔹ماتیاس لوتولف(Matthias Lütolf)، از پژوهشگران این پروژه :
به نظر می‌رسد هندسه چارچوب هیدروژل با حفره‌های اسرارآمیز خود، مستقیما رفتار سلول‌های بنیادی را تحت تاثیر قرار می‌دهد تا بتوانند مانند بافت طبیعی باشند.

🔹مایک نیکلایو(Mike Nikolaev)، از پژوهشگران این پروژه :
سیستم ریزسیال به ما امکان داد تا این روده‌های کوچک را ایجاد کنیم و اندام‌واره‌ای داشته باشیم که تعادل میان تولد و مرگ سلول‌ها در آن برقرار شده است.

#سلول_درمانی @khustemcell
Reference:https://actu.epfl.ch/news/next-gen-organoids-grow-and-function-like-real-t-2

🔶تكنيك بلاتينگ(Blotting Technique) يا روش لكه گذارى

🔸از اين روش در آزمايشگاه مولكولى براى شناسايى اسيد نوكلئيك و پروتئين ها و به طور كلى براى تشخيص اهداف بيولوژيكى مورد استفاده قرار مى گيره.

🔸روش كار به اين صورت هست كه بعد از الكتروفورز(كه در هشتك تكنيك هاى بعدى به طور كامل توضيح خواهيم داد)، مولكول مورد نظر رو روى يك بستر كه يك غشاى نيتروسلولزى يا پلى وينيليدن فلورايدى يا ... هست،تثبيت ميديم(از طريق خاصيت مويينگى).

از اين جا به بعد كه ديگه موقعيت مولكول ها تغيير نمى كنه،بر روى غشا، شناساگر هاى نشان دار را اضافه مى كنيم كه با مولكول هاى مورد نظرمون هيبريد ميشن.
بعد از هيبريداسيون و شستن مولكول هاى هيبريد نشده،
غشا رو توسط پرتو هاى آشكارساز X-ray رديابى ميكنيم.

❓حالا شايد واستون سوال پيش بياد كه چرا رو خود ژل اين كار رو نمى كنيم!

👈🏻 علتش اين هست كه ژل، نفوذ پذيرى كمى داره و شناساگرها(Probe) به راحتى از ژل خارج ميشن براى همين از غشا استفاده ميشه.

🔸روش هاى بلاتينگ بر اساس نوع مولكولى به ٣ دسته تقسيم ميشن:

•ساترن بلات(Southern Blotting)
• نوترن بلات(Northern Blotting)
•وسترن بلات(Western Blotting)

كه به ترتيب RNA,DNA,پروتئين ها از هم تفكيك ميشن.

در هر كدوم از روش هاى بالا از پروب هاى اختصاصى استفاده ميشه.

🔴حتما حتما فيلم زير رو ببينيد تا با نحوه وسترن بلات آشنا بشيد.

#تكنيك

🆔@khustemcell

⚪️منبع:
https://www.nature.com/scitable/definition/western-blot-288/