#普丁的P圖替身
俄羅斯總統的兩張P圖照片 (左) 被用來說明他有很多「複製人替身」,但照片是假的。
第1張照片的來源是2012/12/28在克林姆林宮的將軍晉升儀式。
第2張照片的來源是烏克蘭車諾比人Yurly Pyvovar臉書製作的惡搞圖片。(已遭刪除,但有落款。其臉書上有很多惡搞普丁圖片。)
#真要斬首就一鍋端就好了(都在一起)
#假消息 回目錄
俄羅斯總統的兩張P圖照片 (左) 被用來說明他有很多「複製人替身」,但照片是假的。
第1張照片的來源是2012/12/28在克林姆林宮的將軍晉升儀式。
第2張照片的來源是烏克蘭車諾比人Yurly Pyvovar臉書製作的惡搞圖片。(已遭刪除,但有落款。其臉書上有很多惡搞普丁圖片。)
#真要斬首就一鍋端就好了(都在一起)
#假消息 回目錄
#核電冷卻水不通過反應堆:部份正確
最近日本排放福島核處理水事件引發各國關注,網路上有種說法,即「福島核廢水通過核反應堆,而一般核電廠冷卻水不通過核反應堆」這個觀念只是部份正確的。
其實一般核電廠的冷卻系統依照型式分為2~3個冷卻循環迴路 (沸水式2迴路; 壓水式3迴路)。 只有最外層的冷卻迴路的冷卻水排放帶熱量不帶輻射污染物。最內層迴路,爐內的冷卻水是會接觸反應堆的。
輕水反應爐內的冷卻水長期使用也會劣化須要排放更換。所以基本上這類的水也會含有氚、碳14,是由於核反應時中子輻射轟擊反應爐中冷卻水中的硼與氧原子,使它們補獲中子而產生氚與碳14,兩者一樣難以吸附過濾去除。而因為接觸反應堆,所以也會有少量核污染物釋出 (左下圖)。福島核電廠因為爐心熔毀,反應堆破碎。所以冷卻水會含有更多的「超鈾」放射性元素,如鈈、鍶、銫等64種 (如右下圖)。
就日本東電ALPS系統的架構設計,就存在著其他核種吸附不完全與更換吸附柱時可能污染的問題。要談任何毒性之前都要先考慮劑量,如果真如日本所言排放廢水的核輻射值低於標準值,那確實是比一般核電廠高於標準值的排放要安全,但是最重要的是數據有無造假?是否可信?
東電ALPS介紹
福島62種放射性元素
一般核電廠核廢水排放
#一般核電廠爐內水也會處理排放
#科普 回目錄
最近日本排放福島核處理水事件引發各國關注,網路上有種說法,即「福島核廢水通過核反應堆,而一般核電廠冷卻水不通過核反應堆」這個觀念只是部份正確的。
其實一般核電廠的冷卻系統依照型式分為2~3個冷卻循環迴路 (沸水式2迴路; 壓水式3迴路)。 只有最外層的冷卻迴路的冷卻水排放帶熱量不帶輻射污染物。最內層迴路,爐內的冷卻水是會接觸反應堆的。
輕水反應爐內的冷卻水長期使用也會劣化須要排放更換。所以基本上這類的水也會含有氚、碳14,是由於核反應時中子輻射轟擊反應爐中冷卻水中的硼與氧原子,使它們補獲中子而產生氚與碳14,兩者一樣難以吸附過濾去除。而因為接觸反應堆,所以也會有少量核污染物釋出 (左下圖)。福島核電廠因為爐心熔毀,反應堆破碎。所以冷卻水會含有更多的「超鈾」放射性元素,如鈈、鍶、銫等64種 (如右下圖)。
就日本東電ALPS系統的架構設計,就存在著其他核種吸附不完全與更換吸附柱時可能污染的問題。要談任何毒性之前都要先考慮劑量,如果真如日本所言排放廢水的核輻射值低於標準值,那確實是比一般核電廠高於標準值的排放要安全,但是最重要的是數據有無造假?是否可信?
東電ALPS介紹
福島62種放射性元素
一般核電廠核廢水排放
#一般核電廠爐內水也會處理排放
#科普 回目錄
Media is too big
VIEW IN TELEGRAM
#911事件的18個角度
911屆滿22週年(東亞應該是明天晚上)。如果是電腦動畫,造假18個角度的目擊還真累。由這些畫面來看,似乎不可能是造假的。但飛機真的可以完全撞進鋼筋混凝土而機翼不會脫落嗎?
有沒有飛機不影響發動戰爭與緊縮監控,事件的本身就是人為的陰謀。
#大家自由心證
#探討未知 回目錄
911屆滿22週年(東亞應該是明天晚上)。如果是電腦動畫,造假18個角度的目擊還真累。由這些畫面來看,似乎不可能是造假的。但飛機真的可以完全撞進鋼筋混凝土而機翼不會脫落嗎?
有沒有飛機不影響發動戰爭與緊縮監控,事件的本身就是人為的陰謀。
#大家自由心證
#探討未知 回目錄
#一年後戳破叫囂者的謊言
王群光醫生車禍去世一年以來,王大師夥同愛將踹共(@Zorro)不斷持續叫囂持有行車記錄器影片的群友是網軍,什麼「王案交出影片就會水落石出」,「王案因群友不交影片而罪行加重」。眾多群眾被唬得一愣一愣的,還真的以為有誰隱匿了什麼重大事證,罪無可赦。現在讓他們表現一年的跳樑後,揭開他們偽善邪惡、羅織人入罪、箝制自由言論的假面具。
2022/9/16中時網路新聞的王群光醫生車禍報導照片的右下角,有行車記錄器的品牌與時間戳記。這代表第一時間警方與記者已經持有行車記錄器的影片。兩個跳樑小丑借勢借端誣陷他人,一年了,大家看清楚了沒?
王大師與踹共精彩表演頻道
王群光車禍事故始末
#王群光 回目錄
王群光醫生車禍去世一年以來,王大師夥同愛將踹共(@Zorro)不斷持續叫囂持有行車記錄器影片的群友是網軍,什麼「王案交出影片就會水落石出」,「王案因群友不交影片而罪行加重」。眾多群眾被唬得一愣一愣的,還真的以為有誰隱匿了什麼重大事證,罪無可赦。現在讓他們表現一年的跳樑後,揭開他們偽善邪惡、羅織人入罪、箝制自由言論的假面具。
2022/9/16中時網路新聞的王群光醫生車禍報導照片的右下角,有行車記錄器的品牌與時間戳記。這代表第一時間警方與記者已經持有行車記錄器的影片。兩個跳樑小丑借勢借端誣陷他人,一年了,大家看清楚了沒?
王大師與踹共精彩表演頻道
王群光車禍事故始末
#王群光 回目錄
#原始人又恐慌了
今天台北天空佈滿卷層雲,是飛機凝結尾好發的天氣。沒錯!一堆原始人又恐慌了。🤣
原因說明
註:
卷層雲出現的意義,就是與凝結尾會發生的重疊空域中的水氣含量過飽和,才會有多餘的冰晶形成卷層雲滯空。重疊空域的水氣不足時,則不會有卷雲。
#Chemtrail 回目錄
今天台北天空佈滿卷層雲,是飛機凝結尾好發的天氣。沒錯!一堆原始人又恐慌了。🤣
原因說明
註:
卷層雲出現的意義,就是與凝結尾會發生的重疊空域中的水氣含量過飽和,才會有多餘的冰晶形成卷層雲滯空。重疊空域的水氣不足時,則不會有卷雲。
#Chemtrail 回目錄
#今日台北凝結尾密集原因
2023/9/11 8:00由中央氣象局探空斜溫圖可看出氣壓200hPa的高空(約當36,000ft高度)的氣溫為-53°C, 濕度為80%~85%RH。而到11:00左右,氣壓200hPa處的濕度增加至100%,高空風力為西風7級陣風。
經過1小時觀測,幾乎九成的飛機飛過大台北上空都會產生凝結尾,在天空飄移與擴散非常快。這麼多的凝結尾同時出現相當罕見,也必須要高空100%RH的濕度條件配合才行。
#Chemtrail 回目錄
2023/9/11 8:00由中央氣象局探空斜溫圖可看出氣壓200hPa的高空(約當36,000ft高度)的氣溫為-53°C, 濕度為80%~85%RH。而到11:00左右,氣壓200hPa處的濕度增加至100%,高空風力為西風7級陣風。
經過1小時觀測,幾乎九成的飛機飛過大台北上空都會產生凝結尾,在天空飄移與擴散非常快。這麼多的凝結尾同時出現相當罕見,也必須要高空100%RH的濕度條件配合才行。
#Chemtrail 回目錄
#新冠病毒早已被證明會人傳人
2022 年初,英國研究團隊在倫敦的皇家自由醫院 (Royal Free Hospital) 進行了一項針對 SARS-COV-2 的人體挑戰實驗。
34 名18-29 歲血清陰性健康志願者均接種了 10 TCID 50 數量的 SARS-CoV-2/ human/GBR/484861/2020(一種含有 D614G 的 pre-alpha 野生型病毒)通過鼻內滴劑。18 名參與者,隨後出現了 PCR 確認的感染,並出現症狀,佔所有參與者的 53%。
#TCID50是組織培養中一半感染的劑量
實驗用的病毒株是在英國 COVID-19 患者鼻/咽拭子採集同意的情況下獲得的。基本上這個實驗已經能證明從人類病患採集下來的病毒樣本可以感染其他健康的人類,也就是已經證明了病毒可以人傳人。
病毒感染的實驗劑量為10 TCID 50 是 WHO 建議 100 ~ 10000 TCID 50 之最低劑量的 1/10。
因此,推測另外 16 名參與者未感染的原因可能為:
1⃣受測者年輕健康且免疫力強
2⃣病毒株為傳染力較不強的Alpha株
3⃣實驗感染劑量不足
4⃣參與人數少比例偏頗
以上僅為推測,未來仍需有更多相關的研究來探討這些人未感染的原因。
#病毒 回目錄
2022 年初,英國研究團隊在倫敦的皇家自由醫院 (Royal Free Hospital) 進行了一項針對 SARS-COV-2 的人體挑戰實驗。
34 名18-29 歲血清陰性健康志願者均接種了 10 TCID 50 數量的 SARS-CoV-2/ human/GBR/484861/2020(一種含有 D614G 的 pre-alpha 野生型病毒)通過鼻內滴劑。18 名參與者,隨後出現了 PCR 確認的感染,並出現症狀,佔所有參與者的 53%。
#TCID50是組織培養中一半感染的劑量
實驗用的病毒株是在英國 COVID-19 患者鼻/咽拭子採集同意的情況下獲得的。基本上這個實驗已經能證明從人類病患採集下來的病毒樣本可以感染其他健康的人類,也就是已經證明了病毒可以人傳人。
病毒感染的實驗劑量為10 TCID 50 是 WHO 建議 100 ~ 10000 TCID 50 之最低劑量的 1/10。
因此,推測另外 16 名參與者未感染的原因可能為:
1⃣受測者年輕健康且免疫力強
2⃣病毒株為傳染力較不強的Alpha株
3⃣實驗感染劑量不足
4⃣參與人數少比例偏頗
以上僅為推測,未來仍需有更多相關的研究來探討這些人未感染的原因。
#病毒 回目錄
#加拿大法院沒有承認病毒未分離
加拿大極右活動與陰謀論者Patrick King於2020年在一次反封鎖集會上抗議Alberta省的COVID-19法規時收到了一張約1600元加幣的罰單。他決定告上法院捍衛自己的權益,請求法官傳喚Alberta省的首席醫療官(CMOH)出庭作證,並要求提供病毒分離證據。
2021/7/16法院通知要審議駁回他的要求,發給他的公文(如下方3圖)中,明確敘述他的要求不符合訴訟目的(目的是罰單的執行而不是法律內容的釋憲)。最後法院判決Patrick King必須乖乖繳罰款。
沒隔多久,於2021/7/28,與訴訟無關,Alberta省取消了禁令。隨後在2021/8/3他參加了陰謀論線上脫口秀節目《Stew Peters Show》,大談解禁是因為他的努力,CMOH沒有新冠病毒分離的證據,新冠病毒不存在。
這不是第一次「無病毒論者」「扭曲解釋法院的文件,用法律手段來誤導科學問題」。加拿大法院並沒有判他勝訴,也沒有承認病毒沒有分離。
#駁回審議通知文件紅框翻譯如下:
「
傳票在技術上存在缺陷
7⃣地方治安法官無權根據第 1 條發出傳票。 《Alberta證據法》第34(3)條,RSA 2000,c. A-18,並應據此予以撤銷。
CMOH未擁有證據(與罰單執行相關)
8⃣King先生沒有證據表明從CMOH尋求的證據可能對省法院的訴訟程序具有重要意義,違反了 《刑法》第698條和第699條。因此,地方治安法官無權簽發傳票。並應在此基礎上予以廢除。
9⃣King先生在傳票附表A中解釋了傳票的原因。顯然,King先生尋求與CMOH根據該法案發布命令的理由相關的證據:他尋求有關“制定法規”的證據。
🔟省法院的訴訟程序是關於2020年12月5日法律的執行(King先生收到罰單時),而不是立法的合理性。 #CMOH未擁有 且Mr. King #也沒有向CMOH尋求任何有關向King先生開出2020年5日罰單的證據。
⏸此外,在沒有根據《司法法》RSA 2000. c. J-2,向加拿大總檢察長和Alberta省司法部長發出適當通知的情況下,不得對該法案、CMOH根據該法案發布的命令提出憲法質疑。King先生未在省法院訴訟中發出此類通知。
」
#最後他還是要繳罰款
#法院駁回他的要求他卻解讀為法院承認病毒沒有分離
#病毒 回目錄
加拿大極右活動與陰謀論者Patrick King於2020年在一次反封鎖集會上抗議Alberta省的COVID-19法規時收到了一張約1600元加幣的罰單。他決定告上法院捍衛自己的權益,請求法官傳喚Alberta省的首席醫療官(CMOH)出庭作證,並要求提供病毒分離證據。
2021/7/16法院通知要審議駁回他的要求,發給他的公文(如下方3圖)中,明確敘述他的要求不符合訴訟目的(目的是罰單的執行而不是法律內容的釋憲)。最後法院判決Patrick King必須乖乖繳罰款。
沒隔多久,於2021/7/28,與訴訟無關,Alberta省取消了禁令。隨後在2021/8/3他參加了陰謀論線上脫口秀節目《Stew Peters Show》,大談解禁是因為他的努力,CMOH沒有新冠病毒分離的證據,新冠病毒不存在。
這不是第一次「無病毒論者」「扭曲解釋法院的文件,用法律手段來誤導科學問題」。加拿大法院並沒有判他勝訴,也沒有承認病毒沒有分離。
#駁回審議通知文件紅框翻譯如下:
「
傳票在技術上存在缺陷
7⃣地方治安法官無權根據第 1 條發出傳票。 《Alberta證據法》第34(3)條,RSA 2000,c. A-18,並應據此予以撤銷。
CMOH未擁有證據(與罰單執行相關)
8⃣King先生沒有證據表明從CMOH尋求的證據可能對省法院的訴訟程序具有重要意義,違反了 《刑法》第698條和第699條。因此,地方治安法官無權簽發傳票。並應在此基礎上予以廢除。
9⃣King先生在傳票附表A中解釋了傳票的原因。顯然,King先生尋求與CMOH根據該法案發布命令的理由相關的證據:他尋求有關“制定法規”的證據。
🔟省法院的訴訟程序是關於2020年12月5日法律的執行(King先生收到罰單時),而不是立法的合理性。 #CMOH未擁有 且Mr. King #也沒有向CMOH尋求任何有關向King先生開出2020年5日罰單的證據。
⏸此外,在沒有根據《司法法》RSA 2000. c. J-2,向加拿大總檢察長和Alberta省司法部長發出適當通知的情況下,不得對該法案、CMOH根據該法案發布的命令提出憲法質疑。King先生未在省法院訴訟中發出此類通知。
」
#最後他還是要繳罰款
#法院駁回他的要求他卻解讀為法院承認病毒沒有分離
#病毒 回目錄
#加拿大疫情禁令判決無效並非因為沒病毒
2023/7/31加拿大Alberta省國王法院裁定該省自2020/12/4開始實施的封鎖禁令違反憲法無效。
禁令裁定無效的原因:是因為禁令的決定是出於省內閣閣員的決策而非由衛生局長作出的決定。如果決策是出自於衛生局長則禁令仍然有效。
反針者誤傳,以為正義得到伸張,其實並沒有。如果是衛生局長下令封城,那麼命令仍然是符合Alberta省憲法,是有效的。
#這件事很奇妙地被人用來證明沒病毒😂
#病毒 回目錄
2023/7/31加拿大Alberta省國王法院裁定該省自2020/12/4開始實施的封鎖禁令違反憲法無效。
禁令裁定無效的原因:是因為禁令的決定是出於省內閣閣員的決策而非由衛生局長作出的決定。如果決策是出自於衛生局長則禁令仍然有效。
反針者誤傳,以為正義得到伸張,其實並沒有。如果是衛生局長下令封城,那麼命令仍然是符合Alberta省憲法,是有效的。
#這件事很奇妙地被人用來證明沒病毒😂
#病毒 回目錄
#又一個玩文字遊戲的病毒有獎徵答
又有人學Stefan Lanka玩弄文字遊戲來想證明「病毒不存在」。這個人是反疫苗的傳道牧師兼記者Samual Eckert,2021年4月他在他的網頁上寫道:
「150萬歐元獎勵給一位病毒學家,他提供了冠狀病毒存在的科學證明,包括證明中所採取的所有步驟的記錄對照實驗。」
以Stefan Lanka的詐騙手法與法院攻防:所有研究必須在「同一份」科學出版物呈現,導致無人可以得到獎金的邏輯來檢視這份懸賞的陷阱:
1⃣150萬歐元獎勵給「一位」病毒學家👉任何病毒研究是無法單人獨力完成的。
2⃣他提供了「冠狀病毒」存在的「科學」證明👉未指定冠狀病毒種類,到法院攻防時可能會要求一個人提供所有種類冠狀病毒存在科學證明。且未定義「科學」的意義。
3⃣包括證明中所採取的「所有步驟」的記錄對照實驗👉未有詳細步驟規格。
🚨結論:無論是誰都拿不到獎金。越籠統的遊戲規則越容易被賴賬,和簽訂商業合約一樣。Samual Eckert當大家是笨蛋。
#懸賞者出發點就沒誠意支付獎金
#以為大家還會再次上當被操作成法院認證沒有新冠病毒
#沒人想投稿後他又可以宣傳成沒有病毒分離成功的研究
#這是個莊家立於不敗的騙局
#只有智障會拿它來證明病毒不存在
#病毒 回目錄
又有人學Stefan Lanka玩弄文字遊戲來想證明「病毒不存在」。這個人是反疫苗的傳道牧師兼記者Samual Eckert,2021年4月他在他的網頁上寫道:
「150萬歐元獎勵給一位病毒學家,他提供了冠狀病毒存在的科學證明,包括證明中所採取的所有步驟的記錄對照實驗。」
以Stefan Lanka的詐騙手法與法院攻防:所有研究必須在「同一份」科學出版物呈現,導致無人可以得到獎金的邏輯來檢視這份懸賞的陷阱:
1⃣150萬歐元獎勵給「一位」病毒學家👉任何病毒研究是無法單人獨力完成的。
2⃣他提供了「冠狀病毒」存在的「科學」證明👉未指定冠狀病毒種類,到法院攻防時可能會要求一個人提供所有種類冠狀病毒存在科學證明。且未定義「科學」的意義。
3⃣包括證明中所採取的「所有步驟」的記錄對照實驗👉未有詳細步驟規格。
🚨結論:無論是誰都拿不到獎金。越籠統的遊戲規則越容易被賴賬,和簽訂商業合約一樣。Samual Eckert當大家是笨蛋。
#懸賞者出發點就沒誠意支付獎金
#以為大家還會再次上當被操作成法院認證沒有新冠病毒
#沒人想投稿後他又可以宣傳成沒有病毒分離成功的研究
#這是個莊家立於不敗的騙局
#只有智障會拿它來證明病毒不存在
#病毒 回目錄
#Ivermectin伊維菌素的藥理
伊維菌素分子式: C₄₇H₇₂O₁₄ (H₂B₁b)
🔘抗寄生蟲方面
伊維菌素化合物的親和力很強,選擇性與無脊椎動物之神經和肌肉細胞內之麩氨酸(glutamate-gated)氯離子通道(glutamate-gate chloride ion)結合。這會導致加速細胞膜滲透氯離子和神經或肌肉細胞的過極化(hyperpolarization),造成寄生蟲的癱瘓和死亡。(參考網頁)
🔘抗病毒方面
內輸蛋白Impα/β1異二聚體屬於核轉運蛋白。大多數的蛋白質都需要核轉運蛋白才能進入細胞核,Impα/β1也是病毒進入感染細胞核的管道。伊維菌素會與Impα/β1異二聚體結合並使其不穩定,從而阻止Impα/β1與病毒蛋白(底部)結合並阻止其進入細胞核複製。這可能會產生正常、更有效的抗病毒反應。(參考文獻)
#病毒 回目錄
伊維菌素分子式: C₄₇H₇₂O₁₄ (H₂B₁b)
🔘抗寄生蟲方面
伊維菌素化合物的親和力很強,選擇性與無脊椎動物之神經和肌肉細胞內之麩氨酸(glutamate-gated)氯離子通道(glutamate-gate chloride ion)結合。這會導致加速細胞膜滲透氯離子和神經或肌肉細胞的過極化(hyperpolarization),造成寄生蟲的癱瘓和死亡。(參考網頁)
🔘抗病毒方面
內輸蛋白Impα/β1異二聚體屬於核轉運蛋白。大多數的蛋白質都需要核轉運蛋白才能進入細胞核,Impα/β1也是病毒進入感染細胞核的管道。伊維菌素會與Impα/β1異二聚體結合並使其不穩定,從而阻止Impα/β1與病毒蛋白(底部)結合並阻止其進入細胞核複製。這可能會產生正常、更有效的抗病毒反應。(參考文獻)
#病毒 回目錄
#淺談基因定序1
(第1代定序:Sanger Sequencing 桑格定序)
其採用的原理是Chain-termination,也就是藉由合成中終止的方式,獲得長度不一片段,再用電泳停留位置判斷序列。
步驟:
1⃣將樣本加熱,使 DNA 雙股打開。
2⃣用PCR將有興趣的片段複製變多。
3⃣加上引子(Primer)。
4⃣準備4個管子,皆含有DNA聚合酶,dNTP,但分別加入 ddATP、ddTTP、ddCTP、ddGTP 在不同管子 (以4種顏色示意)。
5⃣再用PCR,過程中聚合酶合成某片段若抓到 ddNTP 的材料時,會使得該片段因聚合酶無法繼續延長而終止鏈式反應。
6⃣因為反應遇上各管內獨有的 ddNTP 的機率是隨機的,最終管內會有長度不一的 DNA 片段 (末端含有各管獨有的 ddNTP),然後將原始DNA模板移除。
7⃣把4個管分別倒在不同的電泳膠道上反應,長度不同分子量不同的DNA片段會因電場不同而停在不同位置,檢測螢光,由下往上讀,就是目標DNA的序列。
8⃣或是使用毛細管膠道進行混合電泳,用雷射光照射毛細管中由短到長依序通過的DNA片段,不同ddNTP開端受到雷射激發會放出不同波長的螢光,可以依序記錄下來,就是目標DNA的序列。
註:
🔘DNA聚合酶以去氧核苷酸三磷酸dNTPs為受質,dNTPs 型態包括去氧腺苷三磷酸(dATP)、去氧鳥苷三磷酸(dGTP)、去氧胞苷三磷酸(dCTP)、去氧胸腺苷三磷酸(dTTP)。
🔘雙去氧核苷酸三磷酸ddNTPs 型態包括雙去氧腺苷三磷酸(ddATP)、雙去氧鳥苷三磷酸(ddGTP)、雙去氧胞苷三磷酸(ddCTP)、雙去氧胸腺苷三磷酸(ddTTP)。 ddNTP被加入PCR程序,因3’端少一個氧原子,無法與下一個核苷酸的5’-磷酸結合,使DNA合成中止。
桑格定序膠道電泳說明影片
桑格定序毛細管電泳說明影片
#病毒 回目錄
(第1代定序:Sanger Sequencing 桑格定序)
其採用的原理是Chain-termination,也就是藉由合成中終止的方式,獲得長度不一片段,再用電泳停留位置判斷序列。
步驟:
1⃣將樣本加熱,使 DNA 雙股打開。
2⃣用PCR將有興趣的片段複製變多。
3⃣加上引子(Primer)。
4⃣準備4個管子,皆含有DNA聚合酶,dNTP,但分別加入 ddATP、ddTTP、ddCTP、ddGTP 在不同管子 (以4種顏色示意)。
5⃣再用PCR,過程中聚合酶合成某片段若抓到 ddNTP 的材料時,會使得該片段因聚合酶無法繼續延長而終止鏈式反應。
6⃣因為反應遇上各管內獨有的 ddNTP 的機率是隨機的,最終管內會有長度不一的 DNA 片段 (末端含有各管獨有的 ddNTP),然後將原始DNA模板移除。
7⃣把4個管分別倒在不同的電泳膠道上反應,長度不同分子量不同的DNA片段會因電場不同而停在不同位置,檢測螢光,由下往上讀,就是目標DNA的序列。
8⃣或是使用毛細管膠道進行混合電泳,用雷射光照射毛細管中由短到長依序通過的DNA片段,不同ddNTP開端受到雷射激發會放出不同波長的螢光,可以依序記錄下來,就是目標DNA的序列。
註:
🔘DNA聚合酶以去氧核苷酸三磷酸dNTPs為受質,dNTPs 型態包括去氧腺苷三磷酸(dATP)、去氧鳥苷三磷酸(dGTP)、去氧胞苷三磷酸(dCTP)、去氧胸腺苷三磷酸(dTTP)。
🔘雙去氧核苷酸三磷酸ddNTPs 型態包括雙去氧腺苷三磷酸(ddATP)、雙去氧鳥苷三磷酸(ddGTP)、雙去氧胞苷三磷酸(ddCTP)、雙去氧胸腺苷三磷酸(ddTTP)。 ddNTP被加入PCR程序,因3’端少一個氧原子,無法與下一個核苷酸的5’-磷酸結合,使DNA合成中止。
桑格定序膠道電泳說明影片
桑格定序毛細管電泳說明影片
#病毒 回目錄