#病毒與外泌體
病毒不存在論者把病毒Virus(左圖)認為是外泌體Exosome(右圖)。兩者的簡介如圖所述。
病毒不存在論者認為人會生病是因為毒素造成，外泌體就是細胞的排毒過程的產物，醫學檢測到的東西，就是把外泌體認為是病毒。
但是這種說法有幾個硬傷：
(1)外泌體不是人體生病才會分泌
(2)外泌體帶有人體自身的蛋白與DNA物質，進行快篩或PCR時無論有沒有生病都會檢測成都是「陽性」或是都是「陰性」。因為怎麼測都是自己的DNA，不會有變化。
(3)目前已有外泌體與病毒感染研究，表示兩者是不同的東西。
病毒介紹網址：
https://zh.m.wikipedia.org/zh-tw/%E7%97%85%E6%AF%92
外泌體介紹網址1：
https://zhuanlan.zhihu.com/p/460167315?utm_id=0
外泌體介紹網址2：
https://www.xuehua.us/a/5eb7931a86ec4d0bd8d89573?lang=zh-hk&=1
病毒檢測網址：
https://enews.nhri.org.tw/health/5946/
外泌體與病毒研究網址：
https://openvirologyjournal.com/VOLUME/12/PAGE/134/
#病毒 #外泌體 回目錄
病毒不存在論者把病毒Virus(左圖)認為是外泌體Exosome(右圖)。兩者的簡介如圖所述。
病毒不存在論者認為人會生病是因為毒素造成，外泌體就是細胞的排毒過程的產物，醫學檢測到的東西，就是把外泌體認為是病毒。
但是這種說法有幾個硬傷：
(1)外泌體不是人體生病才會分泌
(2)外泌體帶有人體自身的蛋白與DNA物質，進行快篩或PCR時無論有沒有生病都會檢測成都是「陽性」或是都是「陰性」。因為怎麼測都是自己的DNA，不會有變化。
(3)目前已有外泌體與病毒感染研究，表示兩者是不同的東西。
病毒介紹網址：
https://zh.m.wikipedia.org/zh-tw/%E7%97%85%E6%AF%92
外泌體介紹網址1：
https://zhuanlan.zhihu.com/p/460167315?utm_id=0
外泌體介紹網址2：
https://www.xuehua.us/a/5eb7931a86ec4d0bd8d89573?lang=zh-hk&=1
病毒檢測網址：
https://enews.nhri.org.tw/health/5946/
外泌體與病毒研究網址：
https://openvirologyjournal.com/VOLUME/12/PAGE/134/
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#台灣新冠病毒分離者
2020年1月30日，台大醫院張淑媛教授團隊(左圖)成功分離出新冠病毒株。
2020年4月7日，長庚醫院宣佈，長庚醫院施信如教授團隊(右圖)成功分離出新冠病毒株。
台大分離新冠病毒新聞連結：
https://www.storm.mg/article/2295532
台大張淑媛教授專訪連結：
https://www.twreporter.org/a/kids-and-covid-19-omicron-medical-laboratory-scientist
長庚分離新冠病毒新聞連結：
https://news.ltn.com.tw/news/life/breakingnews/3125385
長庚施信如教授專訪連結：
https://www.cmmedia.com.tw/home/articles/21163
#病毒 回目錄
2020年1月30日，台大醫院張淑媛教授團隊(左圖)成功分離出新冠病毒株。
2020年4月7日，長庚醫院宣佈，長庚醫院施信如教授團隊(右圖)成功分離出新冠病毒株。
台大分離新冠病毒新聞連結：
https://www.storm.mg/article/2295532
台大張淑媛教授專訪連結：
https://www.twreporter.org/a/kids-and-covid-19-omicron-medical-laboratory-scientist
長庚分離新冠病毒新聞連結：
https://news.ltn.com.tw/news/life/breakingnews/3125385
長庚施信如教授專訪連結：
https://www.cmmedia.com.tw/home/articles/21163
#病毒 回目錄
#長庚大學的新冠病毒分離
Culture-Based Virus Isolation To Evaluate Potential Infectivity of Clinical Specimens Tested for COVID-19
基於培養的病毒分離評估 COVID-19 臨床標本的潛在感染性
2020
04/07 宣佈成功分離病毒株
05/10 投稿
06/05 接受
07/23 出版
#請先了解病毒分離與病毒純化的定義
https://t.me/Truth_Tells/140
採樣
對 60 個經RT-PCR確認為新冠陽性患者的標本（29個咽拭子和24個鼻咽拭子及7個痰標本）進行病毒分離培養。
RT-PCR
RNA 萃取是通過 LabTurbo 自動系統，遵循廠商說明，除了在萃取 RNA 前用蛋白酶 K 預處理標本，並用試劑和引物/探針組分別檢測E、N和nsp12 RNA，並在含有 5 μl RNA 的 25 μl 反應混合物中進行 RT-PCR。
註：
LabTurbo系統採用的RNA萃取方式為Boom Method，是一種從生物樣品中分離核酸的固相提取法，特點是「將核酸吸附到磁性矽膠珠上」。
参考：https://en.m.wikipedia.org/wiki/Boom_method
病毒分離培養
程序均遵循台灣CDC的實驗室生物安全指南，在P3級設施中進行。
病毒培養從在 37°C 和 5% CO2條件下，添加了 10% 胎牛血清和 1× 青黴素-鏈黴素在Vero-E6 和 MK-2 細胞上的改良 Eagle 培養基(MEM)之標準螺旋蓋培養管開始，用含有 33 μl 標本和 2× 青黴素-鏈黴素的 500 μl 病毒溶液接種至生長80%~90% 匯合度的細胞中，在 37°C 下吸收 1 小時。隨後向管中加入5 ml由MEM、2%胎牛血清和1×青黴素-鏈黴素溶液組成的病毒培養基，將細胞保持在37°C培養箱中，每天觀察。在初始接種後每 2 天用從培養上清液中提取的 RNA 進行 RT-PCR 分析，驗證病毒的存在。
結果
從12個咽拭子和9個鼻咽拭子及2個痰標本中成功分離病毒。
#不純化病毒直接用PCR檢測確認病毒分離
論文連結
#病毒 回目錄
Culture-Based Virus Isolation To Evaluate Potential Infectivity of Clinical Specimens Tested for COVID-19
基於培養的病毒分離評估 COVID-19 臨床標本的潛在感染性
2020
04/07 宣佈成功分離病毒株
05/10 投稿
06/05 接受
07/23 出版
#請先了解病毒分離與病毒純化的定義
https://t.me/Truth_Tells/140
採樣
對 60 個經RT-PCR確認為新冠陽性患者的標本（29個咽拭子和24個鼻咽拭子及7個痰標本）進行病毒分離培養。
RT-PCR
RNA 萃取是通過 LabTurbo 自動系統，遵循廠商說明，除了在萃取 RNA 前用蛋白酶 K 預處理標本，並用試劑和引物/探針組分別檢測E、N和nsp12 RNA，並在含有 5 μl RNA 的 25 μl 反應混合物中進行 RT-PCR。
註：
LabTurbo系統採用的RNA萃取方式為Boom Method，是一種從生物樣品中分離核酸的固相提取法，特點是「將核酸吸附到磁性矽膠珠上」。
参考：https://en.m.wikipedia.org/wiki/Boom_method
病毒分離培養
程序均遵循台灣CDC的實驗室生物安全指南，在P3級設施中進行。
病毒培養從在 37°C 和 5% CO2條件下，添加了 10% 胎牛血清和 1× 青黴素-鏈黴素在Vero-E6 和 MK-2 細胞上的改良 Eagle 培養基(MEM)之標準螺旋蓋培養管開始，用含有 33 μl 標本和 2× 青黴素-鏈黴素的 500 μl 病毒溶液接種至生長80%~90% 匯合度的細胞中，在 37°C 下吸收 1 小時。隨後向管中加入5 ml由MEM、2%胎牛血清和1×青黴素-鏈黴素溶液組成的病毒培養基，將細胞保持在37°C培養箱中，每天觀察。在初始接種後每 2 天用從培養上清液中提取的 RNA 進行 RT-PCR 分析，驗證病毒的存在。
結果
從12個咽拭子和9個鼻咽拭子及2個痰標本中成功分離病毒。
#不純化病毒直接用PCR檢測確認病毒分離
論文連結
#病毒 回目錄
#病毒分離與病毒純化的定義
🔘病毒分離(Virus Isolation)(左圖)
取樣的初級培養物通常是含有不同種類微生物的混合培養物。但在實驗室中，不同的物種可能彼此分離。僅含有一種微生物的培養物稱為純培養物。通過將一種微生物從其他物種的混合物中分離出來獲得純培養物的過程稱為生物體的分離。
参考連結：
1.Isolation and Cultivation of Microorganisms
2.Understanding virus isolates, variants, and strains
#病毒分離並不是指萃取不含培養細胞雜質的病毒
#病毒分離是指穫得與宿主孤立和其他微生物分離但仍具活性可複製之純病毒株培養物的過程
🔘病毒純化(Virus Purification)(右圖)
病毒需要純化用於許多研究，在這些研究中，病毒的特性或結構必須與宿主細胞或培養基的特性或結構區分開來，以下是從污染材料中純化規定大小的顆粒的常用技術：
#超高速離心(UltraCentrifugation)
#柱層析(Column chromatography)
#沉澱(Precipitation)
#奈米過濾(NanoFiltration)
#使用體外細胞培養物進行病毒擴增
(Virus amplification using in vitro cell cultures)
🔘RNA萃取(RNA Extraction)
隨著分子生物學的發達，研究病毒的方法已經可以跳過純化病毒本身，直接純化萃取病毒的RNA來作檢驗與應用，以下為幾種病毒RNA的萃取方法：
#核酸酶處理(Nuclease treatment)
#商用病毒RNA提取試劑盒(Commercial viral RNA extraction)
#基於cDNA擴增限制性片段長度多態性技術(VIDISCA)
#使用rRNA特異性DNA剪刀探針選擇性去除rRNA(Selective rRNA depletion with rRNA-specific DNA “scissor probes”)
参考連結：
1.Virus Purification Methods
2.Methods of Virus Purification
#病毒不存在論者喊的新冠病毒至今沒被分離其實意思是新冠病毒至今沒被純化才對
#病毒純化屬於非必要的實驗步驟
#病毒 回目錄
🔘病毒分離(Virus Isolation)(左圖)
取樣的初級培養物通常是含有不同種類微生物的混合培養物。但在實驗室中，不同的物種可能彼此分離。僅含有一種微生物的培養物稱為純培養物。通過將一種微生物從其他物種的混合物中分離出來獲得純培養物的過程稱為生物體的分離。
参考連結：
1.Isolation and Cultivation of Microorganisms
2.Understanding virus isolates, variants, and strains
#病毒分離並不是指萃取不含培養細胞雜質的病毒
#病毒分離是指穫得與宿主孤立和其他微生物分離但仍具活性可複製之純病毒株培養物的過程
🔘病毒純化(Virus Purification)(右圖)
病毒需要純化用於許多研究，在這些研究中，病毒的特性或結構必須與宿主細胞或培養基的特性或結構區分開來，以下是從污染材料中純化規定大小的顆粒的常用技術：
#超高速離心(UltraCentrifugation)
#柱層析(Column chromatography)
#沉澱(Precipitation)
#奈米過濾(NanoFiltration)
#使用體外細胞培養物進行病毒擴增
(Virus amplification using in vitro cell cultures)
🔘RNA萃取(RNA Extraction)
隨著分子生物學的發達，研究病毒的方法已經可以跳過純化病毒本身，直接純化萃取病毒的RNA來作檢驗與應用，以下為幾種病毒RNA的萃取方法：
#核酸酶處理(Nuclease treatment)
#商用病毒RNA提取試劑盒(Commercial viral RNA extraction)
#基於cDNA擴增限制性片段長度多態性技術(VIDISCA)
#使用rRNA特異性DNA剪刀探針選擇性去除rRNA(Selective rRNA depletion with rRNA-specific DNA “scissor probes”)
参考連結：
1.Virus Purification Methods
2.Methods of Virus Purification
#病毒不存在論者喊的新冠病毒至今沒被分離其實意思是新冠病毒至今沒被純化才對
#病毒純化屬於非必要的實驗步驟
#病毒 回目錄
#王群光醫師車禍事故分析2
#路口監控影像沒有被裁切
死咬著王醫師是假車禍的人，對於警方給媒體公佈的案發路口監視器畫面(上圖)，堅持是造假或非同一天拍攝的理由不外乎有：
1.影片無時間標註，疑似被裁切
2.拍到當事人的畫面疑似被裁切，只剩背部以上
3.畫面中女生未出現在行車記錄器錄像中
4.監控畫面微微晃動，是人用手持攝影機擺拍。
證明：
1.由「臺北市即時交通資訊網」(https://its.taipei.gov.tw/)所公佈的台北市所有路口即時監控影像來看，全部的監控畫面都沒有標註時間(中左圖)，而且畫面的長寬比例都是16:9。所以案發路口監控影像沒有標註時間是正確的。
2.由Google Map的街景記錄，找到距離王醫師2022/9/15車禍日期最近的5月和11月兩個街景。用一般監控攝影機鏡頭的標準水平視角大約45~70度，垂直視角大約25~40度的條件來分析：
🔘5月街景可看出攝影機鏡頭的朝向較低且較平行於車道(中圖)，以拍攝視角來估算，無法拍到監控影像(上圖)的畫面範圍，甚至連撞擊點都在視角範圍之外(中右圖)，拍不到王醫師被撞的情況，故可知案發當晚路口攝影機不是5月的朝向。
🔘再檢視11月街景，可看出攝影機鏡頭的朝向較高且較垂直於車道(左下圖)，考慮鏡頭的水平視角，估計可拍到畫面範圍(中下圖)的左右邊緣AB與監控影像(上圖)的左右邊緣AB吻合。再考慮鏡頭的垂直視角，估計可拍到畫面範圍(右下圖)的上下邊緣CD與監控影像(上圖)的上下邊緣CD也吻合。比對撞擊點位置與人約略的身高，推估王醫師經過斑馬線時，可被攝影機拍攝到的身體部位與監控影片(上圖)顯示的內容吻合。
🔘所以可推斷，案發當晚攝影機鏡頭的朝向是11月街景顯示的方向，路口攝影機在5月~9月間，已經被調整到11月的方向。因此由路口攝影機視角範圍、鏡頭方向和監控錄像拍到的畫面範圍與比例都一致的情況合理判斷，無時間標註的路口監控影像是原始錄像，並且沒有被後製裁切過。
3.這點已證明，請參考「這一篇」。
4.
A.記者手持攝影機翻拍螢幕，為了閃避螢幕邊框，影像範圍會比原始影像略小。
B.因大樓的「風切效應」與窄巷的「峽谷效應」使得進出羅斯福路三段269巷的氣流較強，造成固定路口攝影機的號誌燈柱，頂端路牌受到氣流推動，產生輕微的晃動帶動攝影機一起震動，也是合理且常見的。
按此回評論惡意文
#王群光 上一篇 下一篇 回目錄
#路口監控影像沒有被裁切
死咬著王醫師是假車禍的人，對於警方給媒體公佈的案發路口監視器畫面(上圖)，堅持是造假或非同一天拍攝的理由不外乎有：
1.影片無時間標註，疑似被裁切
2.拍到當事人的畫面疑似被裁切，只剩背部以上
3.畫面中女生未出現在行車記錄器錄像中
4.監控畫面微微晃動，是人用手持攝影機擺拍。
證明：
1.由「臺北市即時交通資訊網」(https://its.taipei.gov.tw/)所公佈的台北市所有路口即時監控影像來看，全部的監控畫面都沒有標註時間(中左圖)，而且畫面的長寬比例都是16:9。所以案發路口監控影像沒有標註時間是正確的。
2.由Google Map的街景記錄，找到距離王醫師2022/9/15車禍日期最近的5月和11月兩個街景。用一般監控攝影機鏡頭的標準水平視角大約45~70度，垂直視角大約25~40度的條件來分析：
🔘5月街景可看出攝影機鏡頭的朝向較低且較平行於車道(中圖)，以拍攝視角來估算，無法拍到監控影像(上圖)的畫面範圍，甚至連撞擊點都在視角範圍之外(中右圖)，拍不到王醫師被撞的情況，故可知案發當晚路口攝影機不是5月的朝向。
🔘再檢視11月街景，可看出攝影機鏡頭的朝向較高且較垂直於車道(左下圖)，考慮鏡頭的水平視角，估計可拍到畫面範圍(中下圖)的左右邊緣AB與監控影像(上圖)的左右邊緣AB吻合。再考慮鏡頭的垂直視角，估計可拍到畫面範圍(右下圖)的上下邊緣CD與監控影像(上圖)的上下邊緣CD也吻合。比對撞擊點位置與人約略的身高，推估王醫師經過斑馬線時，可被攝影機拍攝到的身體部位與監控影片(上圖)顯示的內容吻合。
🔘所以可推斷，案發當晚攝影機鏡頭的朝向是11月街景顯示的方向，路口攝影機在5月~9月間，已經被調整到11月的方向。因此由路口攝影機視角範圍、鏡頭方向和監控錄像拍到的畫面範圍與比例都一致的情況合理判斷，無時間標註的路口監控影像是原始錄像，並且沒有被後製裁切過。
3.這點已證明，請參考「這一篇」。
4.
A.記者手持攝影機翻拍螢幕，為了閃避螢幕邊框，影像範圍會比原始影像略小。
B.因大樓的「風切效應」與窄巷的「峽谷效應」使得進出羅斯福路三段269巷的氣流較強，造成固定路口攝影機的號誌燈柱，頂端路牌受到氣流推動，產生輕微的晃動帶動攝影機一起震動，也是合理且常見的。
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#王群光 上一篇 下一篇 回目錄
#看穿病毒不存在論者的手法
病毒不存在論者們的手法與德國麻疹比賽發起者Stefan Lanka的手法如出一轍。簡而言之，就是要求科學家重複發明輪子。
科學是累積的，科學家的研究也是一點一點的推進而堆疊成厚實的學科。所以學者們發表論文的習慣，就是稍微取得一點成果就馬上發表，不會等到整門研究都作完再發表，因為經費申請，資料與細節太多，篇幅限制，再加上同儕的競爭。別人已做過的研究，通常只是引用而不會再做。
Lanka就是利用這個漏洞，要求麻疹研究史上的所有成果要集中在一篇科學出版物中(左圖，已翻譯)。在未知麻疹的年代，只能靠一步步探索，集合眾人的結晶才可以完整描述麻疹。縱使有人為了獎金刻意去發表論文，不僅因重複研究而申請不到經費，也會因不具新穎性而被拒絕刊登。
也許有人會想集合歷年論文成冊出版，但Lanka聲稱出版品要是德國病毒研究所的文章，而且必須是IFGS法規後的研究論文，才算是「科學」。一切都是要阻止他人得到獎金。沒人得獎後，他就可以宣稱麻疹病毒不存在了。
而Michael S.和他夥伴Christine Massey的手法也一樣。要求新冠病毒的研究記錄要由一個國家的CDC提供。或者是政策機構WHO提供。
研究新冠病毒的學者在論文中會省略提及別人做過的步驟，只引用文獻，不會在論文中詳細描述，但並不代表沒做。一份完整證明新冠病毒的研究記錄，沒有單一的機構或人可以提供得出來，因為科研像是堆疊積木。
譬如他們否定使用非洲綠猴與胎牛血清作為病毒培養基。可是這種方法是1962年發展至今學界認為最好的方法。而且他們聲稱世界上的病毒研究都未經過病毒純化。這不是事實，但是這些文獻不是缺少驗證病毒的敘述，不然就是缺少對照組的敘述，缺東缺西。文獻中，研究人員都只關注他們那塊積木。
Michael S.宣稱的「科學」文獻必須包含病毒存在假設，病毒基因序列100%可重複製性與實驗對照組描述(病毒變異性將於另外篇幅討論)。一些基礎例行性的程序如病毒存在假設與實驗對照組，作為一個具有同儕知識背景的閱讀者是不需要知道詳情的，且因篇幅關係大多省略或含糊帶過。這也就讓他們有空間指控都是詐欺性研究。
他們就是想看科學家重複發明輪子的完整記錄。沒人有。這是他們保持論述不敗的方法：設一個別人達不到的標準來自圓其說，然後不須要證明自己是對的(右圖)。但證明別人是錯的並不能證明自己是對的，這之間還有距離，不是嗎？
#病毒 回目錄
病毒不存在論者們的手法與德國麻疹比賽發起者Stefan Lanka的手法如出一轍。簡而言之，就是要求科學家重複發明輪子。
科學是累積的，科學家的研究也是一點一點的推進而堆疊成厚實的學科。所以學者們發表論文的習慣，就是稍微取得一點成果就馬上發表，不會等到整門研究都作完再發表，因為經費申請，資料與細節太多，篇幅限制，再加上同儕的競爭。別人已做過的研究，通常只是引用而不會再做。
Lanka就是利用這個漏洞，要求麻疹研究史上的所有成果要集中在一篇科學出版物中(左圖，已翻譯)。在未知麻疹的年代，只能靠一步步探索，集合眾人的結晶才可以完整描述麻疹。縱使有人為了獎金刻意去發表論文，不僅因重複研究而申請不到經費，也會因不具新穎性而被拒絕刊登。
也許有人會想集合歷年論文成冊出版，但Lanka聲稱出版品要是德國病毒研究所的文章，而且必須是IFGS法規後的研究論文，才算是「科學」。一切都是要阻止他人得到獎金。沒人得獎後，他就可以宣稱麻疹病毒不存在了。
而Michael S.和他夥伴Christine Massey的手法也一樣。要求新冠病毒的研究記錄要由一個國家的CDC提供。或者是政策機構WHO提供。
研究新冠病毒的學者在論文中會省略提及別人做過的步驟，只引用文獻，不會在論文中詳細描述，但並不代表沒做。一份完整證明新冠病毒的研究記錄，沒有單一的機構或人可以提供得出來，因為科研像是堆疊積木。
譬如他們否定使用非洲綠猴與胎牛血清作為病毒培養基。可是這種方法是1962年發展至今學界認為最好的方法。而且他們聲稱世界上的病毒研究都未經過病毒純化。這不是事實，但是這些文獻不是缺少驗證病毒的敘述，不然就是缺少對照組的敘述，缺東缺西。文獻中，研究人員都只關注他們那塊積木。
Michael S.宣稱的「科學」文獻必須包含病毒存在假設，病毒基因序列100%可重複製性與實驗對照組描述(病毒變異性將於另外篇幅討論)。一些基礎例行性的程序如病毒存在假設與實驗對照組，作為一個具有同儕知識背景的閱讀者是不需要知道詳情的，且因篇幅關係大多省略或含糊帶過。這也就讓他們有空間指控都是詐欺性研究。
他們就是想看科學家重複發明輪子的完整記錄。沒人有。這是他們保持論述不敗的方法：設一個別人達不到的標準來自圓其說，然後不須要證明自己是對的(右圖)。但證明別人是錯的並不能證明自己是對的，這之間還有距離，不是嗎？
#病毒 回目錄
#非洲綠猴腎細胞與胎牛血清
非洲綠猴腎細胞培養病毒研究被病毒不存在人士戲稱為「猴子生意」(Monkey business)。他們質疑為什麼不用其他的培養基，但用這些東西真的是學術欺詐嗎？我們來了解一下這些材料以及它們的好處：
非洲綠猴腎細胞(Vero)
Vero(Verda Reno)是「綠色腎臟」的意思。最初由日本千葉大學的安村美博於1962年分離自正常成年非洲綠猴的腎臟上皮細胞。Vero E6是Vero 76細胞衍生的克隆株。
特點：
1.可以通過許多分裂週期不會老化
2.被病毒感染時不會分泌干擾素α/β
3.對多種類型的病毒高度敏感
4.在形成單層膜後顯示出一定程度的接觸抑制，容易觀察
經過20世紀後的科學發展，科學家手上逐漸有幾個讓病毒容易生長的細胞株, Vero cell (猴腎細胞是其中之一)，另外還有幾個常用的。在當年SARS剛開始的時候，人類並不知道是哪一種病原菌，只好都試試 (包含猜可能是細菌) ，結果就有冠狀病毒在這一些細胞株中被培養出來，經過後續的病毒學、血清學、免疫學、分子生物學等的鑑定，確認 SARS冠狀病毒是當年造成嚴重肺炎的病源；而2019年底在武漢出現肺炎症狀時，因為實驗室裡已有原先的SARS病毒，在短時間內即比對出這一次也是冠狀病毒，並且有一些序列(+生活史和致病情況)的相似度，因此命名為SARS-CoV-2 (SARS冠狀病毒第2型)，並且發現在Vero 細胞可以有效的培養出該病毒，所以就持續使用。
此外，Vero細胞被廣泛應用於病毒感染分子機制研究、疫苗及重組蛋白的生產，世界衛生組織甚至認可其作為疫苗生產細胞系。
胎牛血清(FBS)
FBS(Fetal Bovine Serum)是一種取自牛胚胎的血清，常用於配置動物細胞的培養基。胎牛血清中含有生長因子等蛋白質，且抗體含量少。細胞生物學的研究人員通常會在培養基中加入一定比例的胎牛血清，以幫助維持體外培養的細胞的存活，並非是用來培養病毒。
科學家一開始的時候，發現提供的培養液 (含必須胺基酸、脂肪酸、礦物質、或是維生素等)，無法讓細胞長的好，但加入馬或是牛血清 (西方人養豬量比較少)可以讓細胞生長的好與穩定，並且牛隻取得成本比較便宜，慢慢的大家就都使用牛血清。再後來，發現胎牛血清可能含有更多未知的生長因子，所以就多使用胎牛血清。
#本文參考了維基百科與長庚大學生醫所微生物與免疫學主任的說法
#病毒 回目錄
非洲綠猴腎細胞培養病毒研究被病毒不存在人士戲稱為「猴子生意」(Monkey business)。他們質疑為什麼不用其他的培養基，但用這些東西真的是學術欺詐嗎？我們來了解一下這些材料以及它們的好處：
非洲綠猴腎細胞(Vero)
Vero(Verda Reno)是「綠色腎臟」的意思。最初由日本千葉大學的安村美博於1962年分離自正常成年非洲綠猴的腎臟上皮細胞。Vero E6是Vero 76細胞衍生的克隆株。
特點：
1.可以通過許多分裂週期不會老化
2.被病毒感染時不會分泌干擾素α/β
3.對多種類型的病毒高度敏感
4.在形成單層膜後顯示出一定程度的接觸抑制，容易觀察
經過20世紀後的科學發展，科學家手上逐漸有幾個讓病毒容易生長的細胞株, Vero cell (猴腎細胞是其中之一)，另外還有幾個常用的。在當年SARS剛開始的時候，人類並不知道是哪一種病原菌，只好都試試 (包含猜可能是細菌) ，結果就有冠狀病毒在這一些細胞株中被培養出來，經過後續的病毒學、血清學、免疫學、分子生物學等的鑑定，確認 SARS冠狀病毒是當年造成嚴重肺炎的病源；而2019年底在武漢出現肺炎症狀時，因為實驗室裡已有原先的SARS病毒，在短時間內即比對出這一次也是冠狀病毒，並且有一些序列(+生活史和致病情況)的相似度，因此命名為SARS-CoV-2 (SARS冠狀病毒第2型)，並且發現在Vero 細胞可以有效的培養出該病毒，所以就持續使用。
此外，Vero細胞被廣泛應用於病毒感染分子機制研究、疫苗及重組蛋白的生產，世界衛生組織甚至認可其作為疫苗生產細胞系。
胎牛血清(FBS)
FBS(Fetal Bovine Serum)是一種取自牛胚胎的血清，常用於配置動物細胞的培養基。胎牛血清中含有生長因子等蛋白質，且抗體含量少。細胞生物學的研究人員通常會在培養基中加入一定比例的胎牛血清，以幫助維持體外培養的細胞的存活，並非是用來培養病毒。
科學家一開始的時候，發現提供的培養液 (含必須胺基酸、脂肪酸、礦物質、或是維生素等)，無法讓細胞長的好，但加入馬或是牛血清 (西方人養豬量比較少)可以讓細胞生長的好與穩定，並且牛隻取得成本比較便宜，慢慢的大家就都使用牛血清。再後來，發現胎牛血清可能含有更多未知的生長因子，所以就多使用胎牛血清。
#本文參考了維基百科與長庚大學生醫所微生物與免疫學主任的說法
#病毒 回目錄
#京都府立醫科大學的病毒純化
Differences in environmental stability among SARS-CoV-2 variants of concern: both omicron BA.1 and BA.2 have higher stability
受關注的SARS-CoV-2變體之間的環境穩定性差異：omicron BA.1和BA.2均具有更高的穩定性
2022
03/09 投稿
05/10 修訂
05/14 接受
05/28 線上發佈
11月 出版
方法
為了評估環境穩定性，隨時間測量了塑料和人體皮膚表面殘留的病毒滴度。使用回歸分析計算它們的存活時間和半衰期。
樣本
武漢菌株、Alpha 變異體、Beta 變異體、Gamma 變異體、Delta 變異體、Omicron BA.1 變異體和 Omicron BA.2 變異體，皆由日本東京傳染病研究所提供。
病毒分離培養
採用VeroE6/TMPRSS2細胞購自日本研究生物資源收集細胞庫，並在Dulbecco改良的Eagle培養基(DMEM)中培養。補充了5%的胎牛血清和G418(遺傳黴素)。
病毒純化
感染後96小時，收穫培養基並在 4°C下以2500xg離心10分鐘以消除細胞碎片。使用 Beckman SW28 轉子，在4°C下以27,000 rpm超速離心2.5小時，通過磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中的20%蔗糖墊層沉澱上清液中的病毒粒子。
表面評估
將病毒溶液塗於塑料或人體皮膚表面。每個樣品在受控環境(25°C，45-55%相對濕度)中孵育0-120小時。殘留在表面的病毒隨後被收集在1.0 mL DMEM中並滴定。
在VeroE6/TMPRSS2細胞中使用 50%組織培養感染劑量(TCID 50)測量病毒滴度。接種三天后，在顯微鏡下對每個孔中的細胞病變效應進行評分，計算TCID 50 。
結果
(i)塑料和皮膚表面的Alpha、Beta、Delta和Omicron變體比武漢毒株的存活時間更長；(ii)Omicron BA.1和BA.2變體具有相似的環境穩定性和最長的存活時間；(iii) 人體皮膚上的所有病毒都通過暴露於35%乙醇15秒而完全滅活。
論文連結
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Differences in environmental stability among SARS-CoV-2 variants of concern: both omicron BA.1 and BA.2 have higher stability
受關注的SARS-CoV-2變體之間的環境穩定性差異：omicron BA.1和BA.2均具有更高的穩定性
2022
03/09 投稿
05/10 修訂
05/14 接受
05/28 線上發佈
11月 出版
方法
為了評估環境穩定性，隨時間測量了塑料和人體皮膚表面殘留的病毒滴度。使用回歸分析計算它們的存活時間和半衰期。
樣本
武漢菌株、Alpha 變異體、Beta 變異體、Gamma 變異體、Delta 變異體、Omicron BA.1 變異體和 Omicron BA.2 變異體，皆由日本東京傳染病研究所提供。
病毒分離培養
採用VeroE6/TMPRSS2細胞購自日本研究生物資源收集細胞庫，並在Dulbecco改良的Eagle培養基(DMEM)中培養。補充了5%的胎牛血清和G418(遺傳黴素)。
病毒純化
感染後96小時，收穫培養基並在 4°C下以2500xg離心10分鐘以消除細胞碎片。使用 Beckman SW28 轉子，在4°C下以27,000 rpm超速離心2.5小時，通過磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中的20%蔗糖墊層沉澱上清液中的病毒粒子。
表面評估
將病毒溶液塗於塑料或人體皮膚表面。每個樣品在受控環境(25°C，45-55%相對濕度)中孵育0-120小時。殘留在表面的病毒隨後被收集在1.0 mL DMEM中並滴定。
在VeroE6/TMPRSS2細胞中使用 50%組織培養感染劑量(TCID 50)測量病毒滴度。接種三天后，在顯微鏡下對每個孔中的細胞病變效應進行評分，計算TCID 50 。
結果
(i)塑料和皮膚表面的Alpha、Beta、Delta和Omicron變體比武漢毒株的存活時間更長；(ii)Omicron BA.1和BA.2變體具有相似的環境穩定性和最長的存活時間；(iii) 人體皮膚上的所有病毒都通過暴露於35%乙醇15秒而完全滅活。
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