★طريقة الصبغ باصبغة جرام★
قبل الصبغ يجب عليك
🔍التاكد من كل الصبغات انها تعمل قبل الصبغ وذلك من اجل الحصول على نتائج دقيقه .

👈بعد التاكد من ان الصبغة فعاله نبدا عملية الصبغ .

نرتب الصبغات بحسب تسلسل الصبغ:-
١-كرستال فيليت crystal violet
٢-ليوجلس ايودينLugol,s Iodine.
٣- اسيتون الكحول
Acetone alcohol.
٤-سفرانين safranine .

بعد ترتيب الصغبة نبدا عمليه الصبغ
🔻🔻🔻🔻🔻🔻🔻🔻🔻🔻🔻

١- نضع الشريحة على الحامل الخاص بالصبغ وتغطى اللطخه بالصبغة الاولى الكرستال فيلت (الاساسيه ) وتترك لمده من نصف دقيقة دقيقة واحده.
٢- تغسل اللطخه بالماء وتغطى بالصبغة الثانيه ليوجل ايودين.
والتي تعتبر الصبغه( المثبته )وتترك لمدة من نصف دقيقة الى دقيقة.
٣- تغسل الشريحه بالماء وتغطى با استون الكحول وهو (مزيل اللون) لمده ١٠ ثواني.
٤- تغسل الشريحه بسرعه بعد انتهاء الوقت وتضاف الصبغة الاخيره السفرانين
(الصبغة البديلة ) وتترك لمده دقيقتين.
٥- تغسل الشريحه بالماء وتترك لتجف.
٦- بعد ان تجف نضع قطره من الزيت وتدرس تحت العدسه
١٠٠ x

★ما الذي تتوقع رويته تحت المجهر★

🔍البكتيريا الموجبة لصبغة جرام 👈تظهر باللون البنفسجي الغامق.

🔍البكتيريا السالبة لصبغة جرام 👈تظهر باللون الاحمر.

🔍الخمائر👈 تظهر باللون البنفسجي الغامق.

🔍الخلايا الطلائية 👈تظهر باللون احمر فاتح.

🔍انوية الخلايا القيحية 👈تظهر باللون الاحمر.

قنــاة الميكروبيلوجي🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAD-9_z56fB6h3kDmTA

صبغ البكتيريا بصبغة جرام

Gram positive cocci. فوق خليه طلائيه لونها وردي فاتح
والبكتيريا لونها بنفسجي

Gram positive cocci
موجوده مع انويه خلايا قيحيه لونها
ا حمرغامق

Gram negative bacilli

Gram positive bacilli

★كتابه التقرير★

يتظمن التقرير :-
١-عدد البكتيريا الموجوده
(many moderate few or scanty )
٢-تفاعل البكتيريا مع الصبغه
(G+ve or G-ve)

@MicroLabMed
٣-شكل وترتيب البكتيريا
(cocci, diplocci ,streptococci, rod ,coccobacilli)
وكذالك في ما اذا كانت البكتيريا داخل الخلايا (intracellular )
٤-وجود الخلايا القيحيه وعددها
٥- وجود الخمائر والخلايا الطلائيه.

قنــاة الميكروبيلوجي🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAD-9_z56fB6h3kDmTA

الاخطاء المرافقه لعملية الصبغ

⚙⚙ما هي الاخطاء التي تجعل البكتيريا الموجبة لصبغة جرام تصبغ باللون الاحمر ا❓❓❓❓❓❓❓❓❓❓❓الخاص بالبكتيريا السالبة لصبغة جرام :-
١-حدوث تحطم لجدار البكتيريا الموجبة لصبغة جرام بسبب التعرض للحراره لفتره طويله خلال عمليه الثبيت.
٢- ترك مزيل اللون acetone alcohol على الشريحه لفترة طويلة وعدم اللتزام بفترة الصبغ المحدده وهي ثواني قليله.
٣- استخدام lugol,s Iodine قديم وحدث له تحول في لونه من اللون البني الى اللون الاصفر اذا تحول لونه الى الاصفر اصبح غير فعال من شروط الحفظ الجيد للصبغات تحفظ في حاويات معتمه او زجاجه بنيه اللون وبعيد عن الضؤ.
٤- ان تكون اللطخة البكتيرية المراد صبغها قد حضرت من وسط زراعي قديم له اكثر من٢٤ ساعه.

⚙⚙ماهي الاخطاء التي تؤدي الى صبغ البكتيريا السالبة لصبغة جرام باللون الازرق الخاص البكتيريا الموجبة لصبغة جرام ❓❓❓❓❓❓❓❓❓❓

@MicroLabMed

★اخذ كمية كبيرة من البكتيريا خلال تحضير اللطخه البكتيريه مما يؤدي العدم قدره مزيل اللون على النفاذ الي الطبقه السميكه من البكتيريا وبالتالى لا يحدث ازله كامله للون في حاله البكتيريا السالبة لصبغة جرام( لذلك يجب ان تكون كمية البكتيريا الماخوذه لعمل اللطخه البكتيريه مجرد لمس للمستعمره فقط).

قنــاة الميكروبيلوجي🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAD-9_z56fB6h3kDmTA

https://m.youtube.com/watch?v=vlnIDGmgQfk

فيديو يوضح طريقة اعداد اللطخة البكتيريه وطريقة الصبغ

🔰Catalase test
🔴الهدف م̷ـــِْن catalase test
يفرق بين ⬅️Staphylococci
والتي تكون
catalase +ve
عن ⬅️streptococcus
والتي تكون. catalase -ve

🔴مبدأ العمل catalase :-
انزيم الكاتليز المفرز من البكتيريا يحطم ماده H 2O2
الى ماء و اوكسجين والذي يظهر بشكل فقاعات.
Colonies
( catalase)➕H2O2 ➡️
H2O ➕O2 ( bubbles)
🔴الطريقه:-
ملاحظه يجرى هذا الفحص بعد دراسة المستعمرات باستخدام صبغة جرام وكان ناتج الصبغ
G+ve cocci
بعد ذلك نجري هذا الفحص بالخطوات التاليه :-

١- ننقل مستعمرات بكتيريه عمرها ٢٤ ساعه باستخدام Wire loop مصنوع من البلاتين او اداه خشبية الى سطح شريحه زجاجيه.
٢- ضع قطرات من الهيدروجين بروكسيد على المستعمرات البكتيرية ونخلط

🔴النتيجه المتوقعه:-

⬅️تكون فقاعات يعني +ve البكتيريا هي مجموعه Staphylococci.

⬅️عدم تكون فقاعات -ve
البكتيريا هي من مجموعه Streptococci
@MicroLabMed

ضبط الجوده في هذا الفحص:-
🚫متى يحدث false positive result
تحدث النتائج الاجابيه الخاطئه نتيجة:-
١- استخدام Wire loop يحتوي على الصدأ المفترض ان يكون مصنوع من البلاتين.
٢- استخدام مستعمرات عمرها اكثر من ٢٤ ساعه
٣- استخدام مستعمرات من داخل وسط Blood agar واخذ جزء من آجار الدم مع المستعمرات.
@MicroLabMed
💢ملاحظه مهمه💢
لاختبار صلاحية محلول الهيدروجين بيروكسيد ناخد جزء من اجار الدم ونضع عليه قطرات من المحلول H2O2 ولان الدم يحتوي على الانزيم الكاتليز سوف يتكون فقاعات وهذا دليل ان المحلول صالح للعمل في حالة لم يتكون فقاعات يعني ذلك ان المحلول منتهي الصلاحية.

قنــاة الميكروبيلوجي🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAD-9_z56fB6h3kDmTA

ⓂICRO🅱IOLOGY:

🔰Coagulase test
🔴الهدف م̷ـــِْن coagulase test
يفرق بين ⬅️S.aureus والتي تكون
coagulase +ve
عن ⬅️other staphylcoccus والتي تكون coagulase -ve

⬅️هناك نوعين من هذا الانزيم
حر ومرتبط
Coagulase Boundمرتبط بالخلية البكتيريه ( clumping factor)
Coagulase free
النوع الحر يكون عباره عن انزيم بروتيني خارج الخلية يعمل clot .

🔴 مبدأ العمل :-
انزيم coagulase المفرز من البكتيريا يحول الفيبرونوجين الى فيبرين والذي يظهر بشكل clot.
Colonies (Coagulase) ➕poly plasma( fibrinogen) ➡️ fibrin clot.

🔴الطريقة:-
ملاحظه يجرى هذا الفحص بعد دراسة المستعمرات والتاكد انها G+ve catalase +ve
خطوات اجراء الفحص :-

١- نضع قطرة من البلازما على احد جوانب الشريحه test
وعلى الطرف الاخر نضع قطرة من محلول الملح⬅️ control -ve.
٢-ناخذ بواسطة Wire loop مستعمرة بكتيرية ونضعها على البلازما test وتخلط و مستعمرة اخرى ونضعها في محلول الملح control تخلط الى ان يتكون مستحلب بكتيري متجانس.

٣- خلط المستعمرات البكتيرية لمدة
5- 10 ثواني
@MicroLabMed

🔴النتيجه المتوقعه:-

⬅️تكوّن كتل يعني ve+ البكتيريا هي S.aureus.

⬅️عدم تكوّن كتل ve- البكتيريا هي
other staphylococci
(S.epdermidis or S.saprophyticus )

في حالة اذا كانت سالبة لا تُعتمد الا بعد التاكد بطريقة☜
Tube Method

نحضر مستحلب من البكتيريا مع 0.5 ml من البلازما في انبوبة زجاجية تحضّن في الحضّان عند ℃37 درجه لمدة 4 ساعات وتفحص كل ساعة للكشف عن تكون clot اذا لم يتكون clot بعد 4 ساعات تحضن الانبوبه 24 ساعة قبل اعطاء النتيجه ve-

🔴ضبط الجوده :-
عمل كنترول ve-
و كنترول ve+
ومن المفترض ان يكون عند الكنترول السالب لا يتكون اي تكتلات وعند الموجب يتكون تكتلات مشابه للتكتلات test.
@MicroLabMed


قنــاة الميكروبيلوجي🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAD-9_z56fB6h3kDmTA

شرح مبسّط لكيفية االاشتراك بمكتبة #الطـب_المخبري وتحميل الكتب ‏ ‏ منـِْهـ♡̨̐ـِْا
✅📚للدخول للمكتبة من هنا👇
🔻✨🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/Lab_Med_ALMAS_bot

Bacterial vaginosis - Gardnerella vaginalis - Microscopic
@MicroLabMed

B. cereus 👇

B. cereus was grown on urea agar induce spore formation. The endospore stain was done using malachite green as the primary stain and safranin as counter the stain.
Malachite green was applied to the smear and set over a steaming water bath for 10 min then safranin added for several minutes .
A). Endospore’s stain blue, still in the vegetative cells which stains red (parent cell).
B). The vegetative cell, stains red.
C). Spores that have been released from the vegetative .
✅📸للانضمام لنا:👇
🔻✨🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAD-9_z56fB6h3kDmTA

Acid Fast stain done on a mix of Staphylococcus aureus and Mycobacterium smegmatis.
@MicroLabMed

Streak plate isolation of E. coli on MacConkey Agar
@MicroLabMed
قناة الميكروبيلوجي ⤴️⤴️⤴️

Streak plate isolation of E. coli on MacConkey Agar grown for 24 hrs at 37 degrees.
E. coli demonstrates strong lactose fermentation indicated by the bright pink halo, bile precipitant around the colonies, and pink colony growth.
@MicroLabMed ☜

C. diptheriae Morphology
⤵️⤵️⤵️⤵️⤵️