‍ #VAN_GIESON_METHOD

💠رنگ‌آمیزی به روش ون‌گیسون💠
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
✔️هنگام بررسی یک نمونه بافت زیر میکروسکوپ نوری، تشخیص سلول‌های مختلف و بافت‌ها اغلب دشوار است، زیرا معمولا بی‌رنگ هستند. بنابراین برای مشاهده و تجزیه و تحلیل واضح‌تر سلول‌ها از تکنیک‌های رنگ‌آمیزی استفاده می‌شود. رنگ‌های اختصاصی برای شناسایی و نشان دادن ساختارها و بافت‌های خاصی استفاده می‌شوند که توسط تکنیک هماتوکسلین-ائوزین (H&E) قابل مشاهده نیستند. رنگ‌آمیزی به روش ون گیسون (VAN GIESON) از این قبیل رنگ‌آمیزی‌ها است.

✔️رنگ‌آمیزی ون گیسون یک تکنیک بسیار رایج در آزمایشگاه‌های هیستوپاتولوژی است که برای برجسته کردن تفاوت بین کلاژن و سایر بافت‌های همبند مانند بافت‌های عضلانی استفاده می‌شود. این رنگ از مخلوط اسید پیکریک (picric acid) و اسید فوشین (acid fuchsin) تشکیل شده است که به نمونه‌ی بافت نفوذ کرده و باعث قرمز شدن کلاژن می‌شوند. بافت‌های عضلانی اطراف و سلول‌های خونی به رنگ زرد قابل مشاهده خواهند بود.
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
✔️مولکول‌های اسید پیکریک بسیار کوچک هستند، بنابراین به انواع بافت‌ها نفوذ می‌کنند. با این حال، این رنگ تنها در گلبول‌های قرمز و عضله حفظ می‌شوند.

✔️اسید فوشین دارای مولکول‌های بزرگتری است و با نفوذ به کلاژن، مولکول‌های اسید پیکریک را جابجا می‌کند. این باعث می‌شود که کلاژن متفاوت از عضله و گلبول‍‌های قرمز خون رنگ آمیزی شود. مزیت اصلی رنگ‌آمیزی ون گیسون این است که تضاد شدیدی بین کلاژن (قرمز) و هر چیز دیگری (زرد) ایجاد می‌کند.

◀️ مواد مورد استفاده در رنگ‌آمیزی ون‌ گیسون

✔️توجه داشته باشید که در این مطلب از رنگ‌آمیزی ون گیسون برای برش‌های ۵ میکرومتری بلوک پارافین‌ استفاده شده است.

1️⃣ فیکساتیو: بافر فرمالین خنثی ۱۰ ٪

2️⃣ محلول هماتوکسیلین آهنWeigert

➖آماده‌سازی استوک محلول A:
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
💥1 گرم هماتوکسیلین
💥100 میلی‌لیترالکل 95%

➖آماده‌سازی استوک محلول B:

💥4 میـلی‌لیتر کلرید فریک محلول در آب 29%
💥95 میـلی‌لیتر آب مقطر
💥1 میـلی‌لیتر اسید هیدروکلریک غلیظ

👈قسمت‌های مساوی محلول استوک A و B را مخلوط کنید. این محلول برای ۳ ماه پایدار است و استفاده از آن بعد از گذشت ۴ ماه از زمان آماده‌سازی توصیه نمی‌شود.

3️⃣ محلول ون گیسون
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
💥4 میـلی‌لیتر اسید فوشین محلول در آب C.I. 42685ء,۱%
💥40 میـلی‌لیتر اسید پیکریک محلول در آبِ اشباع شده

◀️ مراحل رنگ‌آمیزی

➖ مراحل پارافین‌زدایی و هیدراسیون بافت را انجام دهید.

➖ لام را به مدت ۵ دقیقه درون محلول هماتوکسیلین آهن Weigert قرار دهید.

➖ لام را برای مدت کوتاهی زیر آب شیر بشویید و سپس دو مرتبه با آب مقطر آبکشی کنید.

➖سپس لام را به مدت ۳ دقیقه در تماس با محلول ون گیسون قرار دهید.

➖ مراحل دهیدراسیون را با استفاده از درجات مختلف الکل از جمله الکل خالص و الکل ۹۵ % انجام دهید.
🔬 @MLSandBIOLOGY 🔬
➖ لام را با استفاده از زایلین (زایلین) شفاف (clear) کنید.

◀️ نتایج رنگ آمیزی

➖کلاژن به رنگ قرمز
➖سیتوپلاسم، عضله، فیبرین و گلبول قرمز خون به رنگ زرد
➖هسته‌ به رنگ آبی تیره

⬇️urmc

⛔️فقط فوروارد مجاز است⛔️
#اختصاصی_کانال
🧬Instagram Link🧬

❤️کانال جامع علوم آزمایشگاهی و بیولوژی👇👇
🔬 @MLSandBIOLOGY 🩸