🔰نوار بندی(Banding) کروموزومی
🔸با کمک این تکنیک توانایی #شناسایی دقیق کروموزوم ها و #ناهنجاری های کوچک فراهم می شود.
🍒باندینگ مشخص کرد که کروموزوم ها به دو صورت:
☝️ هتروکروماتین ⬅ نوار های تیره و غنی از باز های A,T و از لحاظ رونویسی غیر فعال
✌️یوکروماتین ⬅ نوار های روشن و غنی از باز های C,G و از لحاظ رونویسی فعال میباشد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔸با کمک این تکنیک توانایی #شناسایی دقیق کروموزوم ها و #ناهنجاری های کوچک فراهم می شود.
🍒باندینگ مشخص کرد که کروموزوم ها به دو صورت:
☝️ هتروکروماتین ⬅ نوار های تیره و غنی از باز های A,T و از لحاظ رونویسی غیر فعال
✌️یوکروماتین ⬅ نوار های روشن و غنی از باز های C,G و از لحاظ رونویسی فعال میباشد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰تکنیک G_Banding:
1_ تیمار کروموزوم با #تریپسین
2_رنگ آمیزی DNA با گیمسا
💣نوار تیره =هتروکروماتین
نوار روشن = یوکروماتین
🔸نوار بندی G سبب ایجاد 400_500نوار در هر مجموعه هاپلوئید میشود و طول هر نوار 6تا 8 مگاباز یا 6000تا 8000(kb)
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_ تیمار کروموزوم با #تریپسین
2_رنگ آمیزی DNA با گیمسا
💣نوار تیره =هتروکروماتین
نوار روشن = یوکروماتین
🔸نوار بندی G سبب ایجاد 400_500نوار در هر مجموعه هاپلوئید میشود و طول هر نوار 6تا 8 مگاباز یا 6000تا 8000(kb)
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰تکنیک Q_Banding
1- از رنگ فلورسنت #کوینیاکرین استفاده می شود،نیاز به 🔬فلورسنت دارد.
👈الگوی نوار بندی مشابه گیمسا
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1- از رنگ فلورسنت #کوینیاکرین استفاده می شود،نیاز به 🔬فلورسنت دارد.
👈الگوی نوار بندی مشابه گیمسا
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔰تکنیک R_banding ( نواربندی معکوس):
1_ دناتوره کردن کروموزوم ها توسط حرارت
2_رنگ آمیزی گیمسا
🔸الگوی نواربندی عکس گیمسا
👈نوار تیره= یوکروماتین
👈نوار روشن = هتروکروماتین
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_ دناتوره کردن کروموزوم ها توسط حرارت
2_رنگ آمیزی گیمسا
🔸الگوی نواربندی عکس گیمسا
👈نوار تیره= یوکروماتین
👈نوار روشن = هتروکروماتین
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰تکنیک C_banding(نوار بندی سانترومر):
1_تیمار کروموزوم با #اسیدوقلیا
2_ رنگ آمیزی با گیمسا
🔹 نواحی سانترومری حاوی تکرار زیاد رنگ آمیزی می شود.
❗️بیشترین میزان هتروکروماتین ژنی روی کروموزوم Y قرار دارد
🔰 تکنیک T- banding:
🔸برای رنگ آمیزی نواحی تلومری
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_تیمار کروموزوم با #اسیدوقلیا
2_ رنگ آمیزی با گیمسا
🔹 نواحی سانترومری حاوی تکرار زیاد رنگ آمیزی می شود.
❗️بیشترین میزان هتروکروماتین ژنی روی کروموزوم Y قرار دارد
🔰 تکنیک T- banding:
🔸برای رنگ آمیزی نواحی تلومری
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰 تکنیک SKY یا multiplex FISH
🔸 24 پروب برای 24 کروموزوم استفاده میشود.
👈کاربرد: جابه جایی، منشا کروموزوم اضافه ، ناهنجاری عددی
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔸 24 پروب برای 24 کروموزوم استفاده میشود.
👈کاربرد: جابه جایی، منشا کروموزوم اضافه ، ناهنجاری عددی
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍4❤1
🔰نوار بندی با حد تفکیک بالا High resolution banding :
❗️این تکنیک در مراحل ابتدایی میتوز مثل #پروفاز و پرومتافاز که کروموزم فشردگی کمتری دارد انجام می شود،و سبب ایجاد 800تا 1000 نوار و طول هر نوار 3تا 4 مگاباز میشود
👈این تکنیک ⬅ دقیق تر
@EmeryPlus
☢روش انجام High resolution banding :
1_ افزودن #متوتروکسات یا #تیمیدین ⬅⬅⬅ برای مهار تقسیم
2_ افزودن #اسیدفولیک یا #دئوکسی سیتیدین ⬅⬅⬅برای ورود سلول ها به میتوز
3 _ افزودن #کلشیسین در زمانی که بیشتر سلول ها در پروفاز هستند
🔴در نتیجه این تکنیک کروموزوم ها فشرده می شوند و نوار بندی با جزئیات بیشتر بدست می آید
🍁 در مراحل ابتدایی میتوز مثل پروفاز و یا پرومتافاز حساسیت بالایی دارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
❗️این تکنیک در مراحل ابتدایی میتوز مثل #پروفاز و پرومتافاز که کروموزم فشردگی کمتری دارد انجام می شود،و سبب ایجاد 800تا 1000 نوار و طول هر نوار 3تا 4 مگاباز میشود
👈این تکنیک ⬅ دقیق تر
@EmeryPlus
☢روش انجام High resolution banding :
1_ افزودن #متوتروکسات یا #تیمیدین ⬅⬅⬅ برای مهار تقسیم
2_ افزودن #اسیدفولیک یا #دئوکسی سیتیدین ⬅⬅⬅برای ورود سلول ها به میتوز
3 _ افزودن #کلشیسین در زمانی که بیشتر سلول ها در پروفاز هستند
🔴در نتیجه این تکنیک کروموزوم ها فشرده می شوند و نوار بندی با جزئیات بیشتر بدست می آید
🍁 در مراحل ابتدایی میتوز مثل پروفاز و یا پرومتافاز حساسیت بالایی دارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍1
🔰انواع پروب:
✅ پروب های سانترومری :
حاوی توالی های DNA تکراری سانترومر یا اطراف سانترومر کروموزومی می باشد
💣 #اولین پروب های بودند که برای تشخیص #انیوپلوییدی های کروموزومی مثل تریزومی ( 13_18_22) در تشخیص پیش از تولد بکار برده شوند
🔑 امروزه تکنیکQF_PCR برای تشخیص این تریزومی ها متداول تر است
✅ پروب های ویژه کروموزوم با توالی منحصر به فرد :
🔴برای تشخیص #حذف شدگی ها یا #مضاعف شدگی ها کوچک زیر حد تفکیک میکروسکوپ(مثل سندرم های ریز حذفی)
🔵برای شناسایی بیان بیش از حد ژن HER_2
در تومور های سینه برای بیمارانی که با #هرسپتین درمان میشوند.
@EmeryPlus
✅ پروب های تلومری:
🔴شناسایی ناهنجاری نزدیک تلومری پنهان یا cryptic
🔵مجموعه ای از پروب های تلومری را برای 24 کروموزوم می توان طراحی کرد (22 جفت کروموزوم اتوزومی و X,Y)و ناحیه مجاور تلومری تمام کروموزوم ها را میتوان در یک اسلاید بررسی کرد.
🔴 امروزه بجای پروب های تلومری از Q_PCR و MLPA استفاده میشود
✅ پروب های رنگ آمیزی کل کروموزوم:
شامل مخلوط از پروب ها که از بخش های مختلف یک کروموزوم خاص بدست آمده اند.
زمانی که از همه این پروب ها استفاده شود و هیبریداسیون صورت بگیرد کل کروموزوم از خودش رنگ فلورسنت ساطع میکند.
👈کاربرد:
1_ باز آرایی کروموزوم ها ظریف مانند حذف ها و جابجایی ها
2_ تعیین منشاء مواد کروموزومی اضافه مثل مارکر های متعدد کوچک و حلقه ها
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
✅ پروب های سانترومری :
حاوی توالی های DNA تکراری سانترومر یا اطراف سانترومر کروموزومی می باشد
💣 #اولین پروب های بودند که برای تشخیص #انیوپلوییدی های کروموزومی مثل تریزومی ( 13_18_22) در تشخیص پیش از تولد بکار برده شوند
🔑 امروزه تکنیکQF_PCR برای تشخیص این تریزومی ها متداول تر است
✅ پروب های ویژه کروموزوم با توالی منحصر به فرد :
🔴برای تشخیص #حذف شدگی ها یا #مضاعف شدگی ها کوچک زیر حد تفکیک میکروسکوپ(مثل سندرم های ریز حذفی)
🔵برای شناسایی بیان بیش از حد ژن HER_2
در تومور های سینه برای بیمارانی که با #هرسپتین درمان میشوند.
@EmeryPlus
✅ پروب های تلومری:
🔴شناسایی ناهنجاری نزدیک تلومری پنهان یا cryptic
🔵مجموعه ای از پروب های تلومری را برای 24 کروموزوم می توان طراحی کرد (22 جفت کروموزوم اتوزومی و X,Y)و ناحیه مجاور تلومری تمام کروموزوم ها را میتوان در یک اسلاید بررسی کرد.
🔴 امروزه بجای پروب های تلومری از Q_PCR و MLPA استفاده میشود
✅ پروب های رنگ آمیزی کل کروموزوم:
شامل مخلوط از پروب ها که از بخش های مختلف یک کروموزوم خاص بدست آمده اند.
زمانی که از همه این پروب ها استفاده شود و هیبریداسیون صورت بگیرد کل کروموزوم از خودش رنگ فلورسنت ساطع میکند.
👈کاربرد:
1_ باز آرایی کروموزوم ها ظریف مانند حذف ها و جابجایی ها
2_ تعیین منشاء مواد کروموزومی اضافه مثل مارکر های متعدد کوچک و حلقه ها
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍1
🔰تصویر متافازی از پروب ناحیه ویلیامزELN
👈از پروب های ویژه با توالی منحصر به فرد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👈از پروب های ویژه با توالی منحصر به فرد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔰 تکنیک CGH و CGH ARRAY
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
❗️❗️اصلاحیه...
🔆در آخر این ویس تفاوت دو تکنیک، یک مورد اشتباه بیان شده
درستش میشه⬅️ هر دو تکنیک ارایه و Cgh توانایی شناسایی بازآرایی های متعادل را ندارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
❗️❗️اصلاحیه...
🔆در آخر این ویس تفاوت دو تکنیک، یک مورد اشتباه بیان شده
درستش میشه⬅️ هر دو تکنیک ارایه و Cgh توانایی شناسایی بازآرایی های متعادل را ندارد.
👍3
animation.gif
49.9 KB
🔰تکنیک CGH:
استفاده از کروموزوم متافازی
رنگ قرمز، از دست دادن(حذف)
رنگ سبز مضاعف شدن.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
استفاده از کروموزوم متافازی
رنگ قرمز، از دست دادن(حذف)
رنگ سبز مضاعف شدن.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔰فلوسایتومتری یا Facs(دسته بندی سلول فعال شده با فلورسانس)
👈 در ابتدا برای جداسازی سلول ها استفاده میشده
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👈 در ابتدا برای جداسازی سلول ها استفاده میشده
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔰 فلوکاریوتایپ
⬅️ اگر یک خط به صورت قطری از مبدا نمودار رسم کنیم، کروموزم هایی که بالای این خط می افتند، درصد AT بالایی دارند و آنهایی که پایین خط می افتند، درصد GC بالا دارند.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
⬅️ اگر یک خط به صورت قطری از مبدا نمودار رسم کنیم، کروموزم هایی که بالای این خط می افتند، درصد AT بالایی دارند و آنهایی که پایین خط می افتند، درصد GC بالا دارند.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
❤2
🔰سیستم نام گذاری کروموزوم ها
❗️بازوی کوتاه را با نماد p و بازوی بلند را با نماد q نشان می دهیم
❗️مثال : 6P23.1
6= شماره کروموزوم
P= بازوی کوتاه
q= بازوی بلند
2= ناحیه ( Region)
3= نوار یا باند(band)
1= زیرنوار ( sub band)
❗️مثال
t(5;13)(p12;q23)
💡یعنی جابجایی دو طرفه بین بازوی کوتاه کروموزم 5 در ناحیه 1 باند 2
با بازوی بلند کروموزوم 13 ناحیه 2 باند3
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
❗️بازوی کوتاه را با نماد p و بازوی بلند را با نماد q نشان می دهیم
❗️مثال : 6P23.1
6= شماره کروموزوم
P= بازوی کوتاه
q= بازوی بلند
2= ناحیه ( Region)
3= نوار یا باند(band)
1= زیرنوار ( sub band)
❗️مثال
t(5;13)(p12;q23)
💡یعنی جابجایی دو طرفه بین بازوی کوتاه کروموزم 5 در ناحیه 1 باند 2
با بازوی بلند کروموزوم 13 ناحیه 2 باند3
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍3