🔰تکنیک های مورد استفاده در مطالعات سیتوژنتیک :
1_karyotype
2_Banding(نوار بندی کروموزوم ها)
3_ Fish 🐠(دورگه سازی فلورسانس درجا)
4_CGH(دو رگ سازی ژنومی مقایسه ای)
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_karyotype
2_Banding(نوار بندی کروموزوم ها)
3_ Fish 🐠(دورگه سازی فلورسانس درجا)
4_CGH(دو رگ سازی ژنومی مقایسه ای)
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍4
🔰کاریوتایپ :
🔸تصویر کروموزوم های یک فرد که به طور استاندارد از بزرگ به کوچک مرتب می شوند
🙊بین کروموزوم 21 و 22 استثنا وجود دارد به این صورت که کروموزوم 22بزرگتر از 21 (22>21)
✅ ٱیدیوگرام: شکل نقاشی شده از کروموزوم های مرتب شده انسانی در حالت استاندارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔸تصویر کروموزوم های یک فرد که به طور استاندارد از بزرگ به کوچک مرتب می شوند
🙊بین کروموزوم 21 و 22 استثنا وجود دارد به این صورت که کروموزوم 22بزرگتر از 21 (22>21)
✅ ٱیدیوگرام: شکل نقاشی شده از کروموزوم های مرتب شده انسانی در حالت استاندارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍4
🔰تهیه کروموزوم ها از سلول های انسان؛
🔴 در بررسی کروموزوم ها استفاده از #لنفوسیت های خون محیطی شایعتر است.
🔵 به غیر از لنفوسیت ها⬅از پوست، مغز استخوان، پرز های جفتی(سلول های مایع امنیون استفاده کرد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔴 در بررسی کروموزوم ها استفاده از #لنفوسیت های خون محیطی شایعتر است.
🔵 به غیر از لنفوسیت ها⬅از پوست، مغز استخوان، پرز های جفتی(سلول های مایع امنیون استفاده کرد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍1
🔰مراحل تهیه کروموزوم ها از خون:
1_ تهیه نمونه خونی و سپس افزودن #فیتوهماگلوتینین⬅ سبب تحریک تقسیم سلول های 🇹
2_ سلول ها سه روز در دمای 37 درجه کشت داده می شوند.
3_ #کلشیسین افزوده میشود⬅باعث عدم تشکیل دوک تقسیم و متوقف شدن تقسیم سلولی در #متافاز
💣 چون در متافاز،کروموزوم ها به #حداکثرفشردگی رسیده اند و بهتر قابل رویت اند.😊
4_ لیز سلول ها توسط نمک های هیپوتونیک و پخش کروموزوم ها روی اسلاید
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_ تهیه نمونه خونی و سپس افزودن #فیتوهماگلوتینین⬅ سبب تحریک تقسیم سلول های 🇹
2_ سلول ها سه روز در دمای 37 درجه کشت داده می شوند.
3_ #کلشیسین افزوده میشود⬅باعث عدم تشکیل دوک تقسیم و متوقف شدن تقسیم سلولی در #متافاز
💣 چون در متافاز،کروموزوم ها به #حداکثرفشردگی رسیده اند و بهتر قابل رویت اند.😊
4_ لیز سلول ها توسط نمک های هیپوتونیک و پخش کروموزوم ها روی اسلاید
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍3
🔰نوار بندی(Banding) کروموزومی
🔸با کمک این تکنیک توانایی #شناسایی دقیق کروموزوم ها و #ناهنجاری های کوچک فراهم می شود.
🍒باندینگ مشخص کرد که کروموزوم ها به دو صورت:
☝️ هتروکروماتین ⬅ نوار های تیره و غنی از باز های A,T و از لحاظ رونویسی غیر فعال
✌️یوکروماتین ⬅ نوار های روشن و غنی از باز های C,G و از لحاظ رونویسی فعال میباشد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔸با کمک این تکنیک توانایی #شناسایی دقیق کروموزوم ها و #ناهنجاری های کوچک فراهم می شود.
🍒باندینگ مشخص کرد که کروموزوم ها به دو صورت:
☝️ هتروکروماتین ⬅ نوار های تیره و غنی از باز های A,T و از لحاظ رونویسی غیر فعال
✌️یوکروماتین ⬅ نوار های روشن و غنی از باز های C,G و از لحاظ رونویسی فعال میباشد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰تکنیک G_Banding:
1_ تیمار کروموزوم با #تریپسین
2_رنگ آمیزی DNA با گیمسا
💣نوار تیره =هتروکروماتین
نوار روشن = یوکروماتین
🔸نوار بندی G سبب ایجاد 400_500نوار در هر مجموعه هاپلوئید میشود و طول هر نوار 6تا 8 مگاباز یا 6000تا 8000(kb)
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_ تیمار کروموزوم با #تریپسین
2_رنگ آمیزی DNA با گیمسا
💣نوار تیره =هتروکروماتین
نوار روشن = یوکروماتین
🔸نوار بندی G سبب ایجاد 400_500نوار در هر مجموعه هاپلوئید میشود و طول هر نوار 6تا 8 مگاباز یا 6000تا 8000(kb)
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰تکنیک Q_Banding
1- از رنگ فلورسنت #کوینیاکرین استفاده می شود،نیاز به 🔬فلورسنت دارد.
👈الگوی نوار بندی مشابه گیمسا
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1- از رنگ فلورسنت #کوینیاکرین استفاده می شود،نیاز به 🔬فلورسنت دارد.
👈الگوی نوار بندی مشابه گیمسا
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔰تکنیک R_banding ( نواربندی معکوس):
1_ دناتوره کردن کروموزوم ها توسط حرارت
2_رنگ آمیزی گیمسا
🔸الگوی نواربندی عکس گیمسا
👈نوار تیره= یوکروماتین
👈نوار روشن = هتروکروماتین
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_ دناتوره کردن کروموزوم ها توسط حرارت
2_رنگ آمیزی گیمسا
🔸الگوی نواربندی عکس گیمسا
👈نوار تیره= یوکروماتین
👈نوار روشن = هتروکروماتین
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰تکنیک C_banding(نوار بندی سانترومر):
1_تیمار کروموزوم با #اسیدوقلیا
2_ رنگ آمیزی با گیمسا
🔹 نواحی سانترومری حاوی تکرار زیاد رنگ آمیزی می شود.
❗️بیشترین میزان هتروکروماتین ژنی روی کروموزوم Y قرار دارد
🔰 تکنیک T- banding:
🔸برای رنگ آمیزی نواحی تلومری
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
1_تیمار کروموزوم با #اسیدوقلیا
2_ رنگ آمیزی با گیمسا
🔹 نواحی سانترومری حاوی تکرار زیاد رنگ آمیزی می شود.
❗️بیشترین میزان هتروکروماتین ژنی روی کروموزوم Y قرار دارد
🔰 تکنیک T- banding:
🔸برای رنگ آمیزی نواحی تلومری
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍2
🔰 تکنیک SKY یا multiplex FISH
🔸 24 پروب برای 24 کروموزوم استفاده میشود.
👈کاربرد: جابه جایی، منشا کروموزوم اضافه ، ناهنجاری عددی
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
🔸 24 پروب برای 24 کروموزوم استفاده میشود.
👈کاربرد: جابه جایی، منشا کروموزوم اضافه ، ناهنجاری عددی
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍4❤1
🔰نوار بندی با حد تفکیک بالا High resolution banding :
❗️این تکنیک در مراحل ابتدایی میتوز مثل #پروفاز و پرومتافاز که کروموزم فشردگی کمتری دارد انجام می شود،و سبب ایجاد 800تا 1000 نوار و طول هر نوار 3تا 4 مگاباز میشود
👈این تکنیک ⬅ دقیق تر
@EmeryPlus
☢روش انجام High resolution banding :
1_ افزودن #متوتروکسات یا #تیمیدین ⬅⬅⬅ برای مهار تقسیم
2_ افزودن #اسیدفولیک یا #دئوکسی سیتیدین ⬅⬅⬅برای ورود سلول ها به میتوز
3 _ افزودن #کلشیسین در زمانی که بیشتر سلول ها در پروفاز هستند
🔴در نتیجه این تکنیک کروموزوم ها فشرده می شوند و نوار بندی با جزئیات بیشتر بدست می آید
🍁 در مراحل ابتدایی میتوز مثل پروفاز و یا پرومتافاز حساسیت بالایی دارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
❗️این تکنیک در مراحل ابتدایی میتوز مثل #پروفاز و پرومتافاز که کروموزم فشردگی کمتری دارد انجام می شود،و سبب ایجاد 800تا 1000 نوار و طول هر نوار 3تا 4 مگاباز میشود
👈این تکنیک ⬅ دقیق تر
@EmeryPlus
☢روش انجام High resolution banding :
1_ افزودن #متوتروکسات یا #تیمیدین ⬅⬅⬅ برای مهار تقسیم
2_ افزودن #اسیدفولیک یا #دئوکسی سیتیدین ⬅⬅⬅برای ورود سلول ها به میتوز
3 _ افزودن #کلشیسین در زمانی که بیشتر سلول ها در پروفاز هستند
🔴در نتیجه این تکنیک کروموزوم ها فشرده می شوند و نوار بندی با جزئیات بیشتر بدست می آید
🍁 در مراحل ابتدایی میتوز مثل پروفاز و یا پرومتافاز حساسیت بالایی دارد.
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍1
🔰انواع پروب:
✅ پروب های سانترومری :
حاوی توالی های DNA تکراری سانترومر یا اطراف سانترومر کروموزومی می باشد
💣 #اولین پروب های بودند که برای تشخیص #انیوپلوییدی های کروموزومی مثل تریزومی ( 13_18_22) در تشخیص پیش از تولد بکار برده شوند
🔑 امروزه تکنیکQF_PCR برای تشخیص این تریزومی ها متداول تر است
✅ پروب های ویژه کروموزوم با توالی منحصر به فرد :
🔴برای تشخیص #حذف شدگی ها یا #مضاعف شدگی ها کوچک زیر حد تفکیک میکروسکوپ(مثل سندرم های ریز حذفی)
🔵برای شناسایی بیان بیش از حد ژن HER_2
در تومور های سینه برای بیمارانی که با #هرسپتین درمان میشوند.
@EmeryPlus
✅ پروب های تلومری:
🔴شناسایی ناهنجاری نزدیک تلومری پنهان یا cryptic
🔵مجموعه ای از پروب های تلومری را برای 24 کروموزوم می توان طراحی کرد (22 جفت کروموزوم اتوزومی و X,Y)و ناحیه مجاور تلومری تمام کروموزوم ها را میتوان در یک اسلاید بررسی کرد.
🔴 امروزه بجای پروب های تلومری از Q_PCR و MLPA استفاده میشود
✅ پروب های رنگ آمیزی کل کروموزوم:
شامل مخلوط از پروب ها که از بخش های مختلف یک کروموزوم خاص بدست آمده اند.
زمانی که از همه این پروب ها استفاده شود و هیبریداسیون صورت بگیرد کل کروموزوم از خودش رنگ فلورسنت ساطع میکند.
👈کاربرد:
1_ باز آرایی کروموزوم ها ظریف مانند حذف ها و جابجایی ها
2_ تعیین منشاء مواد کروموزومی اضافه مثل مارکر های متعدد کوچک و حلقه ها
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
✅ پروب های سانترومری :
حاوی توالی های DNA تکراری سانترومر یا اطراف سانترومر کروموزومی می باشد
💣 #اولین پروب های بودند که برای تشخیص #انیوپلوییدی های کروموزومی مثل تریزومی ( 13_18_22) در تشخیص پیش از تولد بکار برده شوند
🔑 امروزه تکنیکQF_PCR برای تشخیص این تریزومی ها متداول تر است
✅ پروب های ویژه کروموزوم با توالی منحصر به فرد :
🔴برای تشخیص #حذف شدگی ها یا #مضاعف شدگی ها کوچک زیر حد تفکیک میکروسکوپ(مثل سندرم های ریز حذفی)
🔵برای شناسایی بیان بیش از حد ژن HER_2
در تومور های سینه برای بیمارانی که با #هرسپتین درمان میشوند.
@EmeryPlus
✅ پروب های تلومری:
🔴شناسایی ناهنجاری نزدیک تلومری پنهان یا cryptic
🔵مجموعه ای از پروب های تلومری را برای 24 کروموزوم می توان طراحی کرد (22 جفت کروموزوم اتوزومی و X,Y)و ناحیه مجاور تلومری تمام کروموزوم ها را میتوان در یک اسلاید بررسی کرد.
🔴 امروزه بجای پروب های تلومری از Q_PCR و MLPA استفاده میشود
✅ پروب های رنگ آمیزی کل کروموزوم:
شامل مخلوط از پروب ها که از بخش های مختلف یک کروموزوم خاص بدست آمده اند.
زمانی که از همه این پروب ها استفاده شود و هیبریداسیون صورت بگیرد کل کروموزوم از خودش رنگ فلورسنت ساطع میکند.
👈کاربرد:
1_ باز آرایی کروموزوم ها ظریف مانند حذف ها و جابجایی ها
2_ تعیین منشاء مواد کروموزومی اضافه مثل مارکر های متعدد کوچک و حلقه ها
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👍1
🔰تصویر متافازی از پروب ناحیه ویلیامزELN
👈از پروب های ویژه با توالی منحصر به فرد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus
👈از پروب های ویژه با توالی منحصر به فرد
🖌 گروه آموزشی امری پلاس
➕ @EmeryPlus