✨🍃🍂🌺🍃🍂🌺🍃🍂🌺
Adjusted or Corrected Total Calcium for albumin concentration:
✨🍃🍂🌺🍃🍂🌺🍃🍂🌺
==================================
🅾 Changes in the concentration of albumin in plasma affect the total Ca concentration but not the free Ca content.☞ A low plasma albumin concentration produces a low total plasma Ca concentration and, conversely, a high plasma albumin concentration gives rise to a high total plasma Ca concentration.

🅾 (1 g/dl of albumin binds approximately 0.8 mg/dl of calcium).
👌 The effect of these changes can be overcome by measuring free Ca.

🅾 Equations:
=========
🅰 When [albumin] is less than 4.0 g/dl then:
Corrected Calcium (mg/dl) =
measured total Ca + 0.8 (4 – Albumin [g/dl] ).

🅱 When [albumin] is more than 4.5 g/dl then:
Corrected Calcium (mg/dl) =
measured total Ca – 0.8 (albumin – 4.5 [g/dl])

Because ionized calcium best correlates with the biological activity of calcium, as well as with symptoms of hypercalcemia or hypocalcemia, the direct measurement of it may often be more valuable clinically.

🅾 Since the free Ca2+ concentration is unaffected by variations in the concentration of albumin, clinical symptoms are not manifested. However, free Ca2+ competes with H+ for negatively charged binding sites on albumin and changes in the concentration of free Ca2+ may occur in acute acid–base disorders, with clinical consequences. These do not, however, affect the total plasma Ca2+ concentration. In alkalosis, more H+ dissociates from albumin allowing increased amounts of free Ca2+ to bind to it. This has the effect of increasing the protein bound Ca2+ fraction but at the expense of decreasing the free plasma Ca2+ leading to hypocalcemia. In acidosis, increasing amounts of H+ bind to albumin as Ca2+ dissociates from it, decreasing the protein bound Ca2+ and increasing free plasma Ca2+ producing hypercalcemia.


🅾 الكالسيوم الحر مشحون بشحنة موجبة وايضا الهيدروجين مشحون بشحنة موجبة. يحدث تنافس بين الكالسيوم والهيدروجين للإرتباط الى الشحنة السالبة للبروتين، وارتباط كل منهما - في الحالة الطبيعية - يكون في حالة توازن. في حال نقص ذرات الهيدروجين في الدم ( ↑ PH ، وسط قاعدي ) تنفصل ذرات من الهيدروجين المرتبطة مع البروتين لتعويض النقص في هيدروجين الدم، تاركةً مواقع حرّة على البروتين ترتبط اليها ايونات الكالسيوم فيزيد الكالسيوم المرتبط على حساب الكالسيوم الحر اي انّ الكالسيوم الحر يقل، والعكس يحدث عندما تزيد ايونات الهيدروجين ( ↓ PH ، وسط حامضي ) فإن هذه الذرات تنافس الكالسيوم اكثر للإرتباط على البروتين فيقل ارتباط الكالسيوم الى البروتين ويبقى حراً فتزيد بذلك ايونات الكالسيوم الحرة.
لذلك يُفضّل فحص الـPH لكل عينة مطلوباً لها فحص الكالسيوم الحر، خاصة تلك التي تأتي من خارج المختبر، لمعرفة هل تم سحب وفصل وارسال العينة بالشكل الصحيح ام لا؟ فقد يلزمنا عندها تصحيح نتيجة الكالسيوم الحر اذا كان الـPH للعينة اكبر او اقل من 7.4 حسب معادلة خاصة ( المعادلة منشورة على هذه القناة مسبقا ويمكن الرجوع اليها )، غير انَّه، حتى وفي حالة كانت نتيجة الاس الهيدروجيني متغيّرة سواء قاعدية او حامضية، فقد يكون التصحيح وفق المعادلة خاطئاً اذا كان المريض اصلاً يعاني من الـ acidosis or alkalosis.

👌 ملاحظة مهمة : انه في حال نقص الالبيومين يقل التوتال بينما لا يتغير الحر، وفي حالة التغير في الاس الهيدروجيني يتغير الحر –زيادة او نقصان - بينما لا يتغير التوتال لان العملية عكسية: زيادة او نقصان احدهما يكون على حساب الآخر، فالتوتال يبقى ثابتاً.
♦️ مما سبق نفهم انه في حال كان التغيّر في:
❗️ الالبيومين يكون التصحيح لنتيجة الكالسيوم الكلي ( التوتال ) فقطـ، اما الكالسيوم الحر فلا يتأثر.
‼️ وفي حال كان التغيّر في الاس الهيدروجيني فلا تتغيّر نتيجة الكالسيوم الكلي، ويكون التصحيح لنتيجة الكالسيوم الحر فقط بشرط ان يكون التغير في هذا الاس ناتج بسبب سوء سحب او نقل او فصل عينة الدم ، و انّ المريض لا يعاني هو اصلاً من اضطراب في اُسّه الهيدروجيني.

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

✨🍃🍂🌺🍃🍂🌺🍃🍂🌺
PTH, Parathyroid hormone, parathormone or parathyrin:
✨🍃🍂🌺🍃🍂🌺🍃🍂🌺
==================
♦️ Parathyroid hormone (PTH), also called parathormone or parathyrin, is the most important endocrine regulator of calcium and phosphorus concentration in extracellular fluid. This hormone is secreted from cells of the parathyroid glands and finds its major target cells in bone and kidney.

♦️ High PTH levels stimulate the conversion of 25¬(OH)D (inactive) to 1,25¬(OH)2D (active), while low PTH levels allows 25¬(OH)D to be metabolized to 24,25¬(OH)2D (inactive) instead of 1,25¬(OH)2D.

Addition information on how parathyroid hormone and vitamin D control calcium balance can be found in this channel, please check the link below

https://t.me/Biochem_Lab/580

♦️Primary hyperparathyroidism:
Primary hyperparathyroidism results from parathyroid adenoma.
Most commonly results from a benign tumor affecting one of the four parathyroid glands. Occasionally, all four glands are enlarged. Excessive secretion of PTH results in increased bone resorption, increased renal reabsorption of calcium, and increased production of 1,25(OH)2 vitamin D (and thus increased intestinal calcium absorption). These combined actions result in hypercalcemia and, over time, bone loss due to hyperresorption. A similar syndrome occurs in patients with malignant (nonparathyroid) tumors that secrete large amounts of PTHrP.

♦️ Secondary hyperparathyroidism:
Secondary hyperparathyroidism is a result of hypocalcemia secondary to renal insufficiency or intestinal malabsorption.
can occur as a result of conditions that produce chronic hypocalcemia such as chronic renal failure. Hypocalcemia has both a direct stimulatory effect on PTH secretion and an indirect effect by promoting the increased proliferation of parathyroid cells. Over time, chronic hypocalcemia produces a massive increase in the size of the parathyroid glands due to hyperplasia. This results in very high circulating levels of PTH and excessive bone resorption, often resulting in bone pain and fragility.

♦️ Tertiary hyperparathyroidism
Tertiary hyperparathyroidism is a state of excessive secretion of parathyroid hormone (PTH) after a long period of secondary hyperparathyroidism and resulting in a high blood calcium level.

♦️ Pseudohypoparathyroidism is a condition where excessive secretion of PTH occurs because the target tissues fail to respond to this hormone (resistance) and hypocalcaemia persists.

Action of PTH ⤵️⤵️

https://t.me/Biochem_Lab/580

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

Ca and PTH tests Interpretation, See image above ⤴️ ⤴️

🆔 @Biochem_Lab

Ca and PTH tests Interpretation, :

1️⃣ Ca ↓
PTH ↑
then the parathyroid glands are responding appropriately, producing appropriate amounts of PTH. Investigate a low calcium level further by measuring vitamin D, phosphorus, and magnesium levels.
◎●━ @Biochem_Lab ━●◎•

2️⃣ Ca ↓
PTH → or ↓
then PTH is not responding properly ( hypoparathyroidism ). Hypoparathyroidism is a failure of the parathyroid glands to produce sufficient PTH. It may be due to a variety of conditions and may be persistent, progressive, or transient. Causes include an autoimmune disorder, parathyroid damage or removal during surgery, a genetic condition, or a severe illness. Those affected will generally have low PTH levels, low calcium levels, and high phosphorus levels.

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

3️⃣ Ca ↑
PTH ↑
then the parathyroid glands are producing inappropriately high amounts of PTH ( hyperparathyroidism ). Hyperparathyroidism is a group of conditions characterized by an overproduction of PTH by the parathyroid glands that is separated into primary, secondary, and tertiary hyperparathyroidism.

4️⃣ Ca ↑
PTH ↓
then the parathyroid glands are responding properly.
Perform further investigations to check for non-parathyroid-related reasons for the elevated calcium, such as rare mutations in calcium receptors or tumors that secrete a peptide ( PTH related peptide, PTHrP ) that has PTH-like activity and increases calcium concentration, which in turn decreases PTH.

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

✨🍃🍂🌺🍃🍂🌺🍃🍂🌺
🍃🍂🌺🍃🍂🌺
🍂🌺🍂
🌺

تخفيف تراكيز المحاليل:
==========================
من الامور المهمّة والاولية والتي يجب على كل مخبري معرفتها هي كيفية تخفيف التراكيز، فمثل هكذا موضوع يُصادفنا كثيرا اثناء عملنا كمخبريين ؛ والسبب في ذلك يعود الى انّ المواد تورّد الينا على هيئة محاليل مركّزة لتخفيف نفقات النقل ولإتاحة الفرصة لتحضير اكثر من تركيز مختلف من محلول مركّز واحد.. فبدلاً من شراء 10 لترات من ( حمض الكبريتك مثلاً ) تركيزه 2 مولار يمكنني شراء لتر واحد فقط من هذا الحمض بتركيز 18 مولار، واكون بذلك قللت من نفقة النقل ومن المساحة الزائدة لتخزين المحلول، كما اني استطيع منه تحضير التركيز الذي اريده بدلاً من شراء اكثر من محلول بتراكيز مختلفة.

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

الشاهد من هذا الدرس هو معرفة كيف نحضّر او نخفف "الاحماض" من تركيز معلوم مسبقاً الى اي تركيز نريده، ويمكن تطبيق ما سندرسه اليوم على اي محاليل كانت سواء احماض او غيرها والتي تحتاج الى تخفيف.
فعلى سبيل المثال جاء مريض الى المختبر ومعه ورقة مكتوب عليها:
Calcium, 24 Hour Urine
يتطلب هذا الفحص تجميع عينة يورين 24 ساعة داخل قارورة مضاف اليها - مسبقا - حمض هيدروكلوريك بتركيز "معيّن" كمادة حافظة. فإذا كان لدينا محلول من الهيدروكلوريك اسيد تركيزه نفس التركيز المطلوب لحفظ العينة فلا مشكلة نواجهها، ولكن المشكلة تكمن فيما اذا كان تركيز الحمض الذي لدينا يختلف عما هو مطلوب لحفظ العينة كأن يكون تركيزه اعلى او اقل مثلاً.
البعض قد لا يواجه مشكلة هنا ايضاً في حال الاختلاف في التركيزين ( المطلوب للعينة و المدوّن على قارورة الحمض ) بإستخدامه لقانون "تخفيف التراكيز" والذي سنعرفه في مثال آتٍ، ولكنهم قد يواجهون بعض الصعوبات فيما لو كان تركيز الحمض الذي لديهم مكتوباً بـ "النسبة المئوية "%" وليس بالمولارية "M ..
فبعض شركات التصنيع تدوّن التركيز على قارورة الحمض انه 11.45 مولار مثلاً ( فنستخدم قانون "تخفيف التراكيز" بكل سهولة ) ، والبعض الاخر منها تدوّنه بـ 36 % ، ( فكيف نستخدم القانون هنا ) ؟

👌لاحظ بعض الامثلة لتدوين تراكيز الاحماض بالصور في الاسفل، مع ملاحظة ان ما سنأخذه من امثلة في الاسفل ينطبق على كل الاحماض وما حمض الهيدروكلوريك المذكور في الامثلة الآتية إلا مثالاً للتعامل مع الاحماض الاخرى كالبوريك اسيد والنترك اسيد وغيرها..
https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

دعونا نتعرّف على كيفية التخفيف على مختلف التراكيز المدوّنة سواء كانت بالمولارية او النسبة المئوية وسنذكر الهيدروكلوريك اسيد كمثال :
فحص كيميائي ( الكالسيوم مثلاً ) يتطلب تجميع عينة يورين لمدة 24 ساعة، في قارورة مضاف اليها – مسبقا - هيدروكلوريك اسيد ( 20 مل من الحمض بتركيز 6 مولار ) ، ولدينا في المختبر اربعة احماض من الهيدروكلوريك بتراكيز مختلفة هي:
1️⃣ 4 mol/L
2️⃣ 6 mol/L
3️⃣ 10 mol/L
4️⃣ 36 %
فكيف تكون الاضافة او التخفيف من كل حمض الى قارورة تجميع اليورين ؟
الإجابة في المنشور الذي يلي في الاسفل 👇👇

الاجابة كالتالي:

1️⃣ Prepare ( 20 ml of 6 mol/L HCL ) from ( 4 mol/L HCL ):

لا يمكن تحضير تركيز اعلى من تركيز اقل.. فلا يمكن تحضير تركيز 6 مولار من تركيز 4 مولار.
( لا يمكنك شراء سلعة ما بـ 80 ريالاً في الوقت الذي تمتلك فيه 60 ريالاً ) .


2️⃣ Prepare ( 20 ml of 6 mol/L HCL ) from ( 6 mol/L HCL ):

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

هنا التركيز المطلوب ( 6 مولار وتركيز الحمض الذي لدينا 6 مولار ) فلا مشكلة مع التركيز لدينا. نضيف 20 مل مباشرة لقارورة تجميع عينة اليورين دون الحاجة للتخفيف؛ لأن تركيز الحمض نفس التركيز المطلوب لحفظ العينة.

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

3️⃣ Prepare ( 20 ml of 6 mol/L HCL ) from ( 10 mol/L HCL ):

هنا نخفف الحمض بإستخدام قانون "تخفيف التراكيز" وهو:
C1 V1 = C2 V2
C1 = تركيز المحلول المراد التخفيف منه ( 10 مولار )
V1 = حجم المحلول المراد التخفيف منه ( مجهول )
C2 = التركيز المطلوب ( 6 مولار )
V2 = الحجم المطلوب ( 20 مل )
10×? = 6×20 →
? = (6×20)/10 = 12
اذاً: نأخذ 12 مل من الحمض ونضيفها الى 8 مل من الماء المقطر وبذا نكون حصلنا على حجم 20 مل من الحمض بتركيز 6 مولار.
( يمكنك دفع 80 ريالاً ثمناً لسلعة ما دون تردد ولا حساب؛ اذا كان ما تملك من مال هو نفس او اكبر من الثمن المطلوب لشراء السلعة كما في المثالين 2 وَ 3 على التوالي ) .


4️⃣ Prepare ( 20 ml of 6 mol/L HCL ) from ( %36 HCL ):
عندما يكون التركيز على الحمض مكتوباً بالمولارية فلا توجد أي مشكلة، كل ما علينا فقط هو تطبيق القانون كما في المثال رقم 3، لكن بعض الاحماض يأتي التركيز عليها مكتوباً بالنسبة المئوية (%)، فهل نستطيع تطبيق قانون "تخفيف التراكيز" ام لا ؟؟
الأمر وبكل سهلولة كالتالي:
لابد لنا اولاً: من تحويل التركيز المئوي (36%) الى تركيز مولاري (مول/لتر).
وثانياً: تطبيق قانون "تخفيف التراكيز" ( شريطة ان يكون التركيز بعد التحويل الى المولارية "اكبر" من التركيز الذي نريده وهو هنا (6 مولار) والا فلا نستطيع التخفيف.
Molarity =
(%×10×density) / molecular weight
Molarity = ( 36×10×1.16 ) / 36.46
= 11.45 mol/L
الان بعد ان عرفنا تركيز الحمض بالمولارية وعرفنا انه اكبر من التركيز المطلوب لحفظ العينة سنستخدم - وبكل بساطة - قانون التخفيف:
C1 V1 = C2 V2
11.45×? = 6×20
? = 120/11.45 → 10.5
اذاً: نأخذ (10.5 مل) من الحمض ونضيفها الى (9.5 مل) من الماء المقطر وبذا نكون حصلنا على حجم 20 مل من الحمض بتركيز 6 مولار.
( اذا كان لديك 10 دولارات امريكية وثمن السلعة التي تريدها هو 80 ريالاً، فهل تستطيع دفع ثمن السلعة ام لا؟
في البداية يجب عليك تحويل مالديك من العملة الاجنبية الى العملة المحلية، وبالنظر الى مقدار ما تحوّل من مال بالعملة المحلية ستعرف ما اذا كان بإستطاعتك دفع 80 ريالاً ثمناً للسلعة ام لا ).

ملاحظة: الكثافة نجدها مكتوبة على قارورة الحمض ضمن مكونات المحلول ، ولكل تركيز كثافته، فكثافة حمض الهيدروكلوريك ذو التركيز 36% هي 1.16 والتي تختلف عن كثافة نفس الحمض لو اختلفت درجة الحرارة او اختلف تركيزه 30% مثلاً.

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

ملخص:
اذا كان تركيز الحمض الذي نريده (6 مولار) "اكبر" من تركيز الحمض الذي لدينا (4 مولار) - كما في المثال1 - فلا نستطيع التخفيف.

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

اذا كان تركيز الحمض الذي نريده و تركيز الحمض الذي لدينا متساويين (كلٍ منهما 6 مولار) - كما في المثال2 – نضيف الكمية المطلوبة مباشرة ( 20 مل مثلاً ) دون الحاجة للتخفيف.

اذا كان تركيز الحمض الذي نريده (6 مولار) "اقل" من تركيز الحمض الذي لدينا (11.45 مولار) – كما في المثال3 - نستخدم قانون "تخفيف التراكيز"
C1 V1 = C2 V2

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

اذا كان الحمض الذي لدينا تركيزه بالنسبة المئوية "%" – كما في المثال4 - فلابد لنا اولاً من تحويل التركيز من "المئوية" الى "المولارية" ، ومن ثم نستخدم قانون "تخفيف التراكيز" بكل سهولة شريطة ان يكون التركيز بعد التحويل الى المولارية "اكبر" من التركيز الذي نريده والا فلا نستطيع التخفيف.

كل الامثلة التي اخذناها عن تخفيف الاحماض تنطبق على أي حمض وليست حصرية على الهيدروكلوريك اسيد، فبعض الفحوصات على عينات اليورين تتطلب احماض اخرى كالبوريك اسيد او النتريك اسيد ...الخ.

#قناة_الكيمياء_السريرية
#الدكتور سميح عبدالرحمن

✅ للانضمام لنا:👇
🔻✨🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA
🌺
🍂🌺🍂
🍃🍂🌺🍃🍂🌺
✨🍃🍂🌺🍃🍂🌺🍃🍂🌺

Clinical Practice Guidelines Update for the Chronic Kidney Disease 2017
┏━━━📚━━━━┓
☞ @Biochem_Lab ☜
┗━━━🔬━━━━┛
⤵️⤵️

🆔 @Biochem_Lab

Some Principles of Measurement:
=========================
🈴Photometry:
Photometry relies on measurement of light by a photodetector. The light may be:
1⃣absorbed by a substance dissolved in solution (absorbance),
2⃣the light may be scattered or refracted by particles suspended in solution (turbidimetry or nephelometry), or
3⃣the light may be emitted from a substance that absorbs light at one wavelength and emits light at another wavelength (fluorescence).
◎●━ @Biochem_Lab ━●◎•

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

🅰️Absorbance and fluorescence:
========================
1⃣Absorbance: When an analyte has an intrinsic color (or generates a color upon chemical reaction), visible light is absorbed when it passes through a solution containing the analyte (or reaction products). the detector is placed in a direct line with the incident light
Compounds that have no visible color often absorb light in the ultraviolet region and this absorbance can be used in the same way as absorbance of visible light.
◎●━ @Biochem_Lab ━●◎•

2⃣Fluorescence:
Certain kinds of chemical structures are able to absorb light of one wavelength and emit light of another wavelength. These substances are termed fluorescent compounds or fluorophores. In each case the incident light is of shorter wavelength and higher energy than the emitted light. So a substance that absorbs blue light (wavelength 400) may emit lower energy
green light (wavelength 500).
The detector is placed at a 90° angle from the incident light so that it detects only emitted light and not residual incident light which passes directly through the sample.

♦الامتصاصيةوالفَلْوَرَة:
عندما يمر شعاع ضوئي خلال محلول، سيتم امتصاص جزء منه والجزء الاخر سينفذ، وعلى حسب المادة التي امتصت الضوء فإنه سيتم القياس إما بما يعرف بالامتصاصية وإما يعرف بالفلورة.
يمتص الكترون المادة جزء من طاقة الضوء المارّة من خلاله ( تُسمى طاقة الإثارة ) تعمل على إثارته فينتقل من مستوى طاقة ادنى الى مستوى طاقة اعلى. ولأنه سيكون غير مستقرٍ في مستواه الجديد من الطاقة، فلا يلبث ان يعود الى مستواه السابق في جزء من آلاف الاجزاء من الثانية فاقداً للطاقة التي امتصها على احد الشكلين:
إماعلى شكل حرارة في وسط التفاعل، وهنا يتم القياس بما يعرف بالامتصاصية.
او على شكل طاقة ضوئية اخرى ( تُسمى طاقة الإنبعاث ) تكون اقل قوة من التي امتصها، وهنا يتم القياس بما يعرف بالفلورة.
تكون طاقة الانبعاث هذه اقل قوة لأن الالكترون سيكون قد فقد جزءً منها في رحلة الذهاب والاياب، ولأنها اقل قوة فيكون طولها الموجي اطول ولونها مختلف عن التي تم امتصاصها.

*كلما كان الطول الموجي اكبر كلما كانت طاقته اقل والعكس صحيح.
◎●━ @Biochem_Lab ━●◎•

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

🅱️Turbidimetry and Nephelometry:
=========================
some tests are based on formation of insoluble particles that interfere with the passage of light through the solution. The analyte reacts with an added reagent to produce insoluble particles that remain suspended in the solution. When light hits these particles some of it is reflected in different directions.
👉It is possible to measure the loss of light passing straight through the solution (called turbidimetry) or the increase of light reflected in a different direction (called nephelometry).

👉In turbidimetry the detector is placed in a direct line with the incident light.

👉In nephelometry the detector is placed at an angle to the light path to avoid detection of light passing through the sample.

👉Turbidimetric and nephelometric methods are often chosen to measure proteins such as transferrin or prealbumin. Proteins are relatively large molecules that can be easily cross-linked by selective reagents to produce aggregate particles that are the right size to reflect light in the visible or ultraviolet range.
في حالة التشتيت للضوء فإن الضوء المسلّّط على المحلول سيصطدم بجزيئات المادة فيتشتت جزء منه والجزء الاخر ينفذ، فيتم قياس إما الجزء النافذ او المتشتت. فإذا تم قياس الجزء النافذ تسمى العملية
Turbidimetry
واذا تم قياس الجزء المتشتت تسمى العملية
nephelometry

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

Endpoint and Rate (kinetic) Reactions:
==============================
🔰When an analyte is detected using a chemical reaction, there are two options for measuring its concentration.
✝️One is to wait until the reaction is complete and the total amount of analyte is converted to product – called an endpoint reaction.

✝️The other is to measure the rate of change in product formed over time – called a rate reaction.

Endpoint Reactions.
🔰Endpoint reactions are especially suitable for chemical reactions which are completed in a relatively short time and produce one product molecule or complex for each molecule of analyte.
👉For example, a reaction of albumin with the dye bromocresol purple (BCP) produces a colored complex. If the reaction is allowed to continue until all the albumin present in solution has reacted and the maximum amount of colored product has formed, the color at the end of the reaction reflects the total amount of albumin as the albumin-dye complex.

🔰Endpoint reactions can measure the creation of a product or the loss of reactant.
🔰If the method measures the creation of a product, the absorbance is higher at the endpoint than at the start point (called an end-up reaction).
🔰If the method measures the disappearance of a reactant, the absorbance is lower at the endpoint than at the start point (called an end-
down reaction).

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

Rate (kinetic) Reactions:
===================
If the analyte is an enzyme, a molecule which can catalyze the conversion of unlimited numbers of reagent molecules (termed substrates) to product, the amount of product at the endpoint would not reflect the amount of enzyme. Instead, the endpoint would reflect the amount of substrate that was present.
For this reason, enzyme activity is determined by a rate reaction rather than an endpoint reaction. In such cases determination of the enzyme concentration is based on how fast a fxed amount of substrate is converted to
product. The more enzyme present, the faster the conversion.
Examples of enzymes that are often measured in the clinical laboratory include lipase and alanine.

Rate reactions may also be used for measurement of analytes that are not enzymes. For example, if a reaction is very slow to reach an endpoint, a rate method may be more practical in order to obtain a result in a shorter timeframe. Some examples of analytes other than enzymes that are measured using rate reaction include ammonia (a waste product of protein metabolism) and amikacin (a therapeutic drug).

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

“End-point” OR “Rate-reaction ( kinetic )”:
=============================
🔰كيف يتم اختيار طريقة فحص مادة ما؟
End-point” OR kinetic:
سنضرب مثالاً وسنمثّل " اجهزة الـ سي . بي . سي " بالانزيمات وَ " عينات الدم " بالمادة الاساس او السبسترايت substrate

👌إذا افترضنا انك مالك مختبر مرجعي او مركزي كبير الى درجة انه يوجد به غرفة خاصة يتم فيها تحليل صورة للدم او ما نعرفه بـ CBC
ولديك بهذه الغرفة عدد كبير من هذه الاجهزة و الموزعة داخلها، وجاءت الى المختبر حافظة بها عدد من عينات الدم يراد قياس صورة الدم لكل واحدة منها، وطبعاً لديك عدد من فنيي المختبر هم من يشتغل وانت من تقبض ثمن الفحوصات.. فكيف تعرف عدد ما بداخل الحافظة من عينات، اذا كان ثمن فحص كل عينة دولار واحد؟
بكل بساطة ستعطي فنيي المختبر الوقت الكافي – خمس، عشر، عشرين دقيقة ...الخ – حتى يكتمل العمل، و تنظر في النهاية الى كمية المال الذي تم توريده للخزينة . اذا تم توريد عشرة دولارات معناه ان عدد العينات كان عشرة واذا عشرون دولاراً معنى ان عدد العينات كان عشرون ..
وهكذا بالنسبة لفحوصات الـ End-point
اذا اردنا معرفة تركيز مادة ما ولتكن الجلكوز مثلاً:
سنحضر محلولاً به تركيز من الانزيم ونضع فيه السيرم او البلازما، وعند إنتهاء التفاعل سننظر الى تركيز المادة الناتجة والتي بدورها تعكس تركيز المادة الاساس ( الجلكوز )، اذا علمنا ان كل جزيئ من الناتج يمثل جزيئ من الجلكوز..
إذاً سنعرف تركيز الجلكوز بمعرفة تركيز الناتج.

لكن🤔ماذا لو اردنا معرفة تركيز الانزيم وليس المادة الاساس كيف سنعمل؟ هل سنطبّق طريقة End-point؟
دعونا نعود الى المثال السابق ونمثّمل الاجهزة بالانزيمات وعينات الدم داخل الحافظة بالمادة الاساس ونطبق طريقة ال" إيند بوينت" فهل ستفلح ام ان هناك طريقة اخرى غيرها؟

لنفترض ان لدينا عشرون عينة دم داخل الحافظة، واردنا معرفة عدد " اجهزة الـ سي . بي . سي " داخل الغرفة: فإذا اعطينا الوقت الكافي ليتم شغل جميع العينات، فإننا في النهاية سنحصل على عشرون دولاراً والتي تعكس عدد العينات بإفتراض ان ثمن كل عينة دولار واحد ولكنها لا تعكس عدد الاجهزة التي نريد معرفة عددها. فقد يكون عدد الاجهزة: جهاز واحد وبه تم شغل كل العينات، وقد يكون هناك جهازين اشتغل كل منهم عشر عينات او اربعة اجهزة اشتغل كل منهم خمس عينات ....الخ، فهذه الاجهزة تشتغل عدد لا محدود من العينات. فجهاز واحد قادر على شغل عشرين عينة اذا ما اعطيته عشرين دقيقة ليشتغل وجهازين قادرين على شغل عشرين عينة اذا ما اعطيتهم عشر دقائق ليشتغلوا..الخ.
ونفس المشكلة نواجهها اذا اردنا معرفة تركيز الانزيم بطريقة الـ End-point.
اذا وضعنا السيرم او البلازما في المحلول وانتطرنا الى ان يتم انتهاء التفاعل، فإن الناتج سيعكس تركيز المادة الاساس وليس الانزيم؛ فمهما كان تركيز الناتج فإنه قد يكون تم انتاجه بفعل وحدة واحدة من الانزيم موجودة بالسيرم او وحدتين او ثلاث او عشر او عشرين...الخ؛ اذا ما اعطيت الوقت حتى اكتمال العمل كون الانزيم يُنتج عدد لا محدود من النواتج، فيعمل على تحويل جزيئة من المادة الاساس الى ناتج وينفك منها وينتقل الى جزيئة ثانية ويعمل على تحويلها وينفك وينتقل الى ثالثة ورابعة وخامسة ويستمر بتحويل جزيئة تلو الاخرى ... عدد لا محدود ... فوحدة واحدة من الانزيم قادرة على تحويل ما تحوله الف وحدة من الانزيمات اذا ما اعطيناه الوقت الذي يحتاجه ليتم تحويل كل المادة الاساس.

فما العمل🤔 في مثل هذه الحالة؟ وكيف نقيس تركيز الانزيم؟ اذا كان الوقت الكافي او نقطة انتهاء العمل لا يمكن من خلالها معرفة تركيز الانزيم او عدد الأجهزة كما في المثال المضروب اعلاه؟؟
👌الحل يكمن في تثبيت وقت محدد للعمل ( دقيقة واحدة مثلاً ) وليس بترك وقت كافٍ لينتهي العمل:
إذا عدنا الى مثالنا السابق والى حيث توقفنا لمعرفة عدد الاجهزة الـ سي بي سي:
اذا كانت هناك عشرون عينة، و عرفنا ان كل جهاز يشتغل عينة واحدة في الدقيقة، سنضبط مؤقت الساعة لدقيقة وبنفس الوقت نبدأ العمل وعند انتهاء الدقيقة ننظر كم عينة تم انجازها، اذا مثلا تم شغل خمس عينات في دقيقة واحدة معناه ان هناك خمسة اجهزة سي بي سي موجودة؛ لأن كل جهاز يشتغل عينة واحدة فقط في الدقيقة، واذا تم انجاز عشر في هذه الدقيقة عينات معناه وجود عشرة اجهزة، واذا اُنجزت خمسة عشر عينة معناه وجود خمسة عشر جهازاً.. وهكذا بالنسبة للانزيم. فالوحدة الواحدة من الانزيم تُحوّل او تُنتج واحد ميكرومول من المادة في الدقيقة ، فإذا تم تحويل او انتاج عشرة ميكرمول من المادة في الدقيقة معناه ان تركيز الانزيم عشر وحدات واذا تم تحويل او انتاج عشرين ميكرومول فتركيز الانزيم يكون عشرين...وهكذا..


لمزيد من المعرفة اكثر عن End-point” & kinetic
نرجو قراءة المنشورين السابقين لهذا المنشور..

https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

🔺بسم الله الرحمن الرحيم 🔻
♦ وحياكم الله مشاهدين قناة الكيمياء الحيوية السريرية على تليجرام ،

💠لقاء يتجدد مرة اخرى مع الدكتور سميح عبدالرحمن احد مشرفي هذه القناة @Biochem_Lab ...

👈وسنتحدث اليوم في هذا اللقاء -ان شاء الله- عن البلانكBLANK المُستخدم في الفحوصات المخبرية وخاصة الكيميائية…

ماهيته، اهميته، كيفية استخدامه، وانواعه💭..
نتمنى الاستفادة للجميع.

🔛- بداية دكتور.. ماذا يعني البلانك في الفحوصات المخبرية وخاصة الكيميائية؟

👈- مرحبا بك اخي علاء وبكل متابعين قنوات #الطب_المخبري
و سنبدأ بضرب مثال بسيط لتتوضح الفكرة اكثر فيما بعد..

◾▪اذا كان الوزن الكلي لقارورة مياة معدنية هو 400 جرام، فما هو وزن الماء فقط الذي بداخلها؟

◽▫طبعاً لا نعرف الاجابة بالضبط الا اذا عرفنا اولاً وزن القارورة وهي فارغة واستبعاده بالتصفير او الطرح من الوزن الكلي للقارورة المحتوية على الماء.

🔹ضع قارورة فارغة على الميزان، صفّر وزنها وليكن مثلاً 20 جرام، زن القارورة المحتوية على الماء ستلاحظ ان الوزن اصبح 380 بعد التصفير بدلاً من 400 قبل التصفير وهو وزن الماء فقط.
🔹او – بطريقة الطرح في حال كان الميزان لا يدعم خاصية التصفير

🔹- ضع قارورة فارغة على الميزان، دوّن وزنها وليكن الوزن مثلاً 20 جرام، استخدم معادلة الطرح لايجاد وزن الماء فقط : الوزن الكلي - وزن القارورة الفارغة.
400 – 20 = 380 gram

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

🔸هذا الاستبعاد لوزن القارورة الفارغة لمعرفة وزن الماء، هو ما نعرفه في روتين عملنا اليومي في المختبر بـ "البلانك".

🔸فالبلانك في الفحوصات المخبرية معناه: تصفير او طرح امتصاصية المواد المتداخلة من قيمة الامتصاصية الكلية للتيست .

*الامتصاصية الكلية للتيست هي:( امتصاصية المواد المتداخلة + امتصاصية المادة تحت الفحص ).

🔸عند عبور شعاع ضوئي ذو طول موجي مناسب خلال خلية قياس تحتوي على مادة نحن بصدد قياس تركيزها، يجب ان تكون الامتصاصية التي نحصل عليها ناتجة عن هذه المادة فقط دون سواها، وان لا تكون هناك مواد اخرى امتصت جزء من الضوء و شاركت به في قيمة هذه الامتصاصية الناتجة.
🔸بمعنى اخر يجب الحصول على صافي امتصاصية - بقدر الامكان - معزية للمادة الهدف فقط، صافي الامتصاصية هذا يمكن الحصول عليه بإستخدام البلانك.
🔅هناك الكثير من المواد، سواء كانت موجودة ضمن محلول الفحص او ضمن المصل المُضاف للمحلول، تكون لها امتصاصية مشابهة او قريبة من امتصاصية المادة الهدف وتمتص الضوء عند نفس الطول الموجي المُستخدم. مثل هذه المواد تسمى بالمواد المتداخلة او
Interfering substance/s
والتي يجب التخلص من امتصاصيتها بتصفيرها او طرحها تماما كما فعلنا في مثال قارورة المياة المعدنية في الاعلى.

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

⛔ وكيف يتم التخلص من امتصاصية هذه المواد المتداخلة دكتور؟ أي كيف نستخدم البلانك في التصفير او الطرح؟

👈هناك عدة طرق للتخلص من امتصاصية المواد المتداخلة مثل التحويل و البلانك:
التحويل ليس لنا نحن أي يدٍ فيه ونسرده هنا كمعلومة فقط... فماهو التحويل؟؟
اذا حدث وان كانت هناك مواد او مركبات في الوسط ، تمتص الطاقة الضوئية ، عند نفس او بالقرب من الطول الموجي المُستخدم للمادة المُراد قياسها ، فإننا نضطر الى تحويل المادة الهدف الى مادة اخرى جديدة، لها امتصاصية بعيدة عن المواد او الجزيئات المتداخلة. وهذا لا نعمله نحن المخبريين العاديين وانما تعمله شركات تصنيع المحاليل بعد دراسات و بحوثات تم اعتمادها من قِبَل هيئات او منظمات معتمدة.
◎●━ @Biochem_Lab ━●◎•

⛔هلا اوضحت لنا اكثر دكتور؟ مع امكانية ان تضرب لنا مثلاً لنفهم و نستفد اكثر؟

👈نعم.. اذا اخذنا الجلكوز - بطريقة الجلكوز اوكسيداز - كمثال:
الجلكوز - واغلب المركبات العضوئية ، واهمها الماء - تمتص الضوء في المنطقة الحمراء البعيدة، أي عند 1000 نانومتر واكثر ( الجلكوز يمتص الضوء عند 1100 نانومتر )، وانت تعرف ان اغلب المحاليل المستخدمة محضّرة من الماء، وان البلازما او السيرم المُضاف للمحلول ايضاً يحتوي على، بل واغلبه ماء ، فلا ينفع ان تقيس امتصاصية الجلكوز عند هذا الطول الموجي ، لانه وبكل بساطة سيكون للماء والجزيئات السكرية الاخرى المشابهه للجلكوز نصيب كبير في امتصاص طيف الضوء. فنضطر، وبتفاعل كيميائي، الى تحويل جزيئات الجلكوز الى جزيئات مادة اخرى لها امتصاصية بعيدة عن امتصاصية الماء والمواد المتداخلة الاخرى حتى نتفادى امتصاصية هذه المواد.
https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

يتــــــبع ......↲

👈ففي طريقة قياس الجلكوز بالجلكوز اوكسيداز، والذي يكون فيه الناتج النهائي لتفاعل الجلكوز مع الانزيم هو ( كوينون امين )، يتم استخدام طول موجي 505 nm بدلًاً من 1100. عند هذا الطول الموجي الجديد للمادة الجديدة لا تستطيع جزئات الماء ولالمواد المشابهة للجلكوز ان تمتص طيف الضوء 505 نانومتر،
👈ونكون بهذا التحويل قد استبعدنا امتصاصية زائدة كبيرة كانت ستنتج لو اننا استخدمنا 1100 نانومتر لقياس جزيئات الجلكوز نفسها.
🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

♦حسناً.. اذا كان يمكن تحويل المادة التي نريد قياسها الى مادة اخرى جديدة تماماً، لها امتصاصية مغايرة بعيدة عما تمتصّه المواد المتداخلة،،،
⏮ فلماذا او ما فائدة استخدام البلانك في روتين عملنا اليومي دكتور؟ اقصد انه اذا كنا بهذا التحويل قد تفادينا امتصاصية المواد المتداخلة، فلما البلانك اذاً ؟
🔹رغم التحويل الذي ذكرناه للمادة الهدف الى مادة اخرى، تفرض عليك ظروف التفاعل التي ستتبعها ان تستخدم مواد في صناعة المحلول تكون ضرورية إما لتحضير المحلول او ضرورية للمحافظة على استقراريته.. قد تكون هذه المواد ذا لون او يمكن لها ان تمتص ولو جزءً بسيطاً من طيف الضوء الذي ستستخدمه لقياس المادة الجديدة فتُشارك به في قيمة الامتصاصية الكلية للتيست.
🔹فنستبعد هذه الامتصاصية المتداخلة التي فرضتها الظروف بعمل "البلانك".
🔹ولو جئت الى مقارنة قيمة الامتصاصية للمواد المتداخلة قبل وبعد التحويل تجد ان الفارق يكون كبيراً جداً.
🔹فبعد التحويل تكون الامتصاصية ناتجة من المادة الجديدة من التفاعل وهو الكوينون امين (اذا اخذنا فحص الجلكوز كمثال ) مع امتصاصية بسيطةجداً للمتداخلات يمكن استبعادها بالبلانك.
🔹بينما قبل التحويل تكون الامتصاصية ناتجة من مواد كثيرة واهمها الماء والمُشكّل نسبة كبيرة جدا للوسط فتتعدى الامتصاصية حينها الحدود التي يشترطها قانون بير-لامبرت في احد قوانينه والذي ينص على: ان يكون النقص في شدة الضوء الخارج - بعد عبوره الوسط - في حدود 20%-80% من شدة الضوء الداخل.

🅱º°‘¨([ @Biochem_Lab ])¨‘°º🅱

✅للانضمام لنا:👇
🔻✨🔻✨🔻✨🔻✨🔻
https://telegram.me/joinchat/AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA